基质辅助激光解析／电离飞行时间质谱仪检测KPC型碳青霉烯酶的研究

目的用基质辅助激光解析／电离飞行时间质谱仪（matrix—assisted laser desorption／ion-ization time—of-flight mass spectrometry，MALDI—TOFMS）比较产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌在不同药物浓度下水解厄他培南的能力。方法收集浙江大学医学院附属第二医院临床分离的19株单产KPC肠杆菌科细菌，包括10株奇异变形杆菌，3株产气肠杆菌，2株黏质沙雷菌，2株弗劳地柠檬酸杆菌，1株肺炎克雷伯菌，1株阴沟肠杆菌；杭州市中医院分离的7株产KPC摩根摩根菌，以及上述7株摩根摩根菌和部分奇异变形杆菌（4株）的大肠埃希菌转移接合子。用MALDI．TOFMS检测产KPC肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。结果当厄他培南浓度为0．1g／L时，37株单产KPC型碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌在1．5h内全部水解厄他培南，质谱图显示厄他培南所呈现的3个峰全部消失，灵敏度高达100％；当厄他培南浓度为0．3g／L时，1．5h组水解厄他培南的灵敏度为70．3％（26／37），2．5h组为89．2％（33／37），3．5h组为94．6％（35／37）；当厄他培南浓度为0．5g／L时，1．5h组水解厄他培南的灵敏度为48．6％（18／37），2．5h组为83．8％（31／37），3．5h组为94．6％（35／37）。两独立样本非参数检验统计显示：厄他培南0．1g／L组与0．3g／L、0．5g/L组之间的水解时间差异有统计学意义，而0．3g／L与0．5g／L组之间的水解时间差异无统计学意义；细菌组内数据统计显示，除奇异变形杆菌组与大肠埃希菌组之间差异有统计学意义外，其他各细菌组之间差异没有统计学意义。结论MALDI—TOFMS操作简便，可快速检测产KPC型碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌，敏感率高，假阳性率低，适合微生物检验中用于产KPC型碳青霉烯酶的检测，推荐使用0．1g／L的厄他培南作为水解底物来检测产KPC型肠杆菌科细菌。

混合性念珠菌血症的临床特征及危险因素分析

目的探讨混合性念珠菌血症的临床特征及相关危险因素方法回顾性收集2012年1月至2015年6月期间入住浙江大学医学院附属第二医院重症医学科混合性念珠菌血症的临床特征、微生物学检查及临床结局等,与同期单一念珠菌血症患者进行对照分析,并应用Logistic回归探讨相关危险因素。结果念珠菌血症患者共136例,其中混合性念珠菌血症组40例(29.4%),单一念珠菌血症组96例(70.6%)。尽管最常见仍为白色念珠菌,但非白念珠菌(69例,50.7%)已超过白色念珠菌(67例,49.3%);两组比较,念珠菌菌种分布差异无统计学意义(P>0.05)。在40例混合感染组患者中,细菌血症以革兰阳性球菌为主(25例,62.5%),余为革兰阴性杆菌(15例,37.5%)。与单一念珠菌血症组相比,混合性念珠菌血症组所需抗真菌疗程更长[12.0(4.0-25.0)d vs. 7.0(3.0-13.5) d, P=0.027],但不增加30 d和90 d的总病死率(分别为:40.0% vs. 32.3%;45.0% vs. 36.5%;P>0.05)。单因素分析显示,感染前住院天数、感染时入住ICU、输血、输注白蛋白、机械通气、利奈唑胺使用、序贯性脏器功能衰竭评分(the Sequential Organ Failure Assessment,SOFA)为混合性念珠菌血症感染的危险因素(均P<0.05),但多因素回归分析显示仅SOFA评分高为独立危险因素(P=0.003)。结论混合性念珠菌血症以革兰阳性球菌为主,入住ICU时间和住院时间更长,抗真菌治疗疗程更长,但对病死率无影响;SOFA评分高,病情严重,是发生混合性念珠菌血症的独立危险因素。