肠杆菌科细菌mcr-1流行病学研究

目的探讨临床常见肠杆菌科细菌携带质粒介导多黏菌素耐药基因(mcr-1)的情况,为医院感染防控提供依据。方法收集2018年1月至2022年3月浙江省台州医院临床分离得到的菌株共1980株,包括大肠埃希菌1400株,肺炎克雷伯菌580株。采用PCR检测mcr-1基因;利用微量肉汤稀释法和E-test法检测抗生素对mcr-1阳性菌株的最低抑菌浓度;采用接合试验检测mcr-1基因在可转移质粒上的位置;通过提取细菌DNA基因组进行全基因组测序,并对测序结果进行多位点序列分型、质粒Inc分型和耐药基因识别等分析。结果在1400株大肠埃希菌中,共检测出6株携带mcr-1,阳性率为0.43%;580株肺炎克雷伯菌,仅1株检出mcr-1,阳性率为0.17%。其中5株菌株接合试验成功。6株大肠埃希菌的ST型分别是ST648、ST95、ST359、ST602、ST453、ST156,肺炎克雷伯菌是ST25。质粒Inc分型结果显示不同菌株携带相同类型质粒,提示该类质粒可以在菌株间水平传播。耐药基因分析发现7株细菌均携带大量的耐药基因,其中1株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时携带mcr-1和碳青霉烯耐药基因。结论mcr-1在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的分离率相对较低,然而考虑到含有mcr-1的质粒在不同细菌之间水平传播的潜力,以及mcr-1与同一质粒内的多个耐药基因整合的能力,在临床环境中要加强对多重耐药菌的管理。

从检查检验结果互认看检验医学的发展

2022年2月18日,国家卫生健康委员会、国家医疗保障局、国家中医药管理局、中央军委后勤保障部卫生局联合印发《关于印发医疗机构检查检验结果互认管理办法的通知》[1](下文简称《管理办法》),检查检验结果互认受到各界的广泛关注。《管理办法》提出,医疗机构开展检查检验结果互认工作的原则是以保障质量安全为底线,以质量控制合格为前提,以降低患者负担为导向,以满足诊疗需求为根本,以接诊医师判断为标准。

CBL联合PBL教学法在检验形态学教学中的应用

目的 探索以案例为基础的教学法(case-based learning,CBL)联合以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)在检验形态学临床实习教学过程中的应用。方法 将2020年7月至2022年12月在浙江大学医学院附属第二医院检验科进行临床实习的66名本科学生分为两组,试验组(n=34)采用CBL联合PBL教学法,对照组(n=32)采用传统的以授课为基础的教学法(lecture-based learning,LBL)。通过理论、实践技能考核及问卷调查形式评估两种教学方法的学习效果。结果 与传统教学方法相比,CBL联合PBL教学法能增强学生学习兴趣和主动性,提高学生的理论和实践技能成绩,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CBL联合PBL教学法可以有效提升检验科实习生培训质量及对教学的满意度。

医学检验技术专业实习生的学习倦怠与社会支持相关性分析与对策

目的了解医学检验技术专业的本科生在医院实习期间学习倦怠与社会支持现状,分析两者之间的相关性,并提出改善对策。方法通过问卷调查共回收有效问卷107份,采用描述性统计分析呈现医学检验本科生的学习倦怠和社会支持量表总分及各维度得分,运用Pearson相关分析检验学习倦怠与社会支持量表各维度得分之间的相关性。运用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析,采用t检验或F检验比较不同人口学特征之间的得分差异,采用Pearson相关分析检验大学生学习倦怠与社会支持量表各维度得分之间的相关性。结果医学检验本科生在实习期间学习倦怠检出率达67.29%(72/107),学习倦怠与社会支持量表总分分别为(42.87±8.02)、(57.22±16.94)。学习倦怠与社会支持量表总分呈负相关(r=-0.43,P=0.001)。结论实习期间需关注本科生的学习倦怠情况,切实提高他们的社会支持水平,尤其是来自带教教师的鼓励和支持,有利于提高学生实习主动性和实习成效。

肠杆菌科细菌去阻遏持续高产Amp C酶的检测与amp D基因突变的研究

目的 了解ampD基因突变与持续高产AmpC酶的关系。方法 对 5 3株细菌用三维试验方法检测AmpC酶 ,进行等电点测定和ampD基因扩增 ,2株测定核苷酸序列。结果 32株阴沟肠杆菌中 9株检出AmpC酶 ,检出率为 2 8% ,1 2株枸橼酸杆菌有 3株检出 ,检出率为 2 5 %。其余细菌没有检出。能被邻氯西林抑制的条带主要有 7 96、8 7、8 8和 8 9。有 2株三维试验阳性而ampD基因扩增阴性。对 2株亚胺培南中介其余抗生素耐药的细菌ampD基因测序 ,结果突变主要发生在表型的C′ 末端。阴沟肠杆菌主要在 1 0 1、1 4 9、1 5 5、1 6 6位氨基酸发生改变 ,枸橼酸杆菌主要在 95、1 5 8、1 6 4位氨基酸发生改变。结论 ampD基因突变可导致AmpC酶C′ 端氨基酸改变 ,从而使AmpC酶去阻遏持续高产 ,并导致细菌对 β 内酰胺类抗生素耐药。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的检测方法

由碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)引起的感染给临床治疗带来了巨大挑战。及时、准确地鉴别出产何种碳青霉烯酶,对指导临床抗感染治疗有至关重要的意义。目前,碳青霉烯酶的检测方法主要为表型筛选、基因检测和基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的检测方法。文章对CRE的各类检测方法进行综述。

浙江省重症碳青霉烯类耐药肠杆菌感染诊治现状分析

碳青霉烯类耐药肠杆菌(CRE)感染已经成为威胁公众健康的紧急问题,并成为重症医学科影响患者预后的重要因素。本文从浙江省重症监护病房CRE感染的临床实际情况出发,结合文献资料,从CRE的流行病学和耐药机制,CRE感染的危险因素、临床特征和预后,重症CRE感染的治疗,重症医学科内CRE感控措施几个方面进行了系统的阐述和分析,以期使读者对重症CRE的诊治有更深刻的认识。

磷霉素对肠杆菌科细菌的抗菌作用研究

目的评价磷霉素对肠杆菌科细菌的抗菌作用。方法收集3家医院2012年1月到2014年6月非重复分离的150株肠杆菌科细菌,包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌各50株,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌各包括25株碳青霉烯敏感株和25株碳青霉烯耐药株,用琼脂稀释法测定磷霉素药敏。结果 150株肠杆菌科细菌对磷霉素的耐药率为25.3%,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌对磷霉素的耐药率分别为2.0%、48.0%、26.0%;大肠埃希菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为4.0%和0%,肺炎克雷伯菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为0%和56.0%,粘质沙雷菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为20.0%和24.0%。结论磷霉素对肠杆菌科细菌体外有较好的抗菌活性。

白介素10-819 C>T位点多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性的关系

目的探讨白介素-10基因-819 C>T位点多态性与膀胱癌易感性的关系。方法以病例对照研究方法,应用等位基因特异性PCR(AS-PCR)分别检测400例膀胱癌患者和400例健康体检者的IL-10-819 C﹥T基因多态性,对各基因型和等位基因进行统计学分析。结果膀胱癌组变异纯合TT基因型的频率(54.5%)高于对照组基因型(42.0%),差异有统计学意义[χ2=4.740,P<0.05,OR=1.977(95%CI:1.064～3.674)],膀胱癌组携带变异T等位基因的频率(72.0%)高于对照组基因型(63.0%),差异有统计学意义[χ2=7.385,P<0.01,OR=1.510(95%CI:1.121～2.035)];IL-10-819 C>T的基因型频率在浅表型和浸润型膀胱癌之间无统计学意义。结论 IL-10-819 C﹥T基因多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性有关。

脑科ICU院内感染鲍曼不动杆菌的分子分型和耐药机制研究

目的:分析脑科监护室院内感染的鲍曼不动杆菌的同源性,并研究其主要耐药机制。主要是A型克隆株,对头孢菌素和碳青烯类抗生素的耐药性主要是由于产OXA-23型碳青霉烯酶。

急诊采血全流程信息化管理实践

目的:探讨急诊采血全流程信息化管理方式在急诊患者安全采血流程中的应用效果。方法:采用目的抽样法抽取我院急诊抢救室收治的874例患者为研究对象,将2021年第4季度的患者设为实施前组(n=438),2022年第4季度的患者设为实施后组(n=436),实施前组采用常规采血流程管理,实施后组采用全流程采血信息化管理,对两组不良事件发生率、标本延时送检率、标本送检时效性进行统计分析。结果:实施后组不良事件发生率低于实施前组,患者入抢救室时间至标本采集送出时间短于实施前组,标本延时送检率低于实施前组,标本签收至检验科出具报告时间短于实施前组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在急诊通过全流程信息化管理模式可有效提升检验效率,降低不良事件发生率,保障患者安全。

血浆降钙素原、肝素结合蛋白和白细胞介素-6对重症肺炎进展早期预判的临床意义

目的探讨血浆降钙素原(PCT)、肝素结合蛋白(HBP)和白细胞介素-6(IL-6)对早期预判肺炎进展为重症有临床意义。方法选取2019年6月1日至2022年2月23日在该院治疗的86例肺炎患者为研究对象,将患者分为普通肺炎组42例和重症肺炎组44例,同期选取该院体检健康者50例为对照组。化学发光法检测所有受试对象血浆PCT和IL-6,免疫荧光法检测血浆HBP水平;比较对照组、肺炎组PCT、HBP和IL-6;比较对照组、重症肺炎组PCT、HBP和IL-6;比较普通肺炎组和重症肺炎组PCT、HBP和IL-6,统计分析各种组间的差异。结果与对照组比较,肺部感染组PCT、HBP和IL-6水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,重症肺炎组PCT、HBP和IL-6水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与普通肺炎组比较,重症肺炎组PCT、HBP和IL-6水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血浆PCT、HBP和IL-6对肺部炎症患者进展为重症肺炎有早期预判的临床价值,为急诊将进展为重症肺炎患者的诊断提供早期预判,便于临床及时干预,让患者及时得到规范救治和准确用药。

神经系统副肿瘤综合征临床诊断进展

神经系统副肿瘤综合征(paraneoplastic neurological syndrome,PNS)是肿瘤通过远隔效应累及神经系统的一组罕见的免疫介导性疾病,其临床症状多样,通常伴有特异性的神经抗体。2021年,国际专家组修订了2004年PNS诊断标准,提出了新的临床评分系统,突出强调了“表型-抗体-肿瘤”的关联性。本研究回顾近年文献,围绕新标准,对PNS的临床诊断进展作一综述。

1株携带bla_(NDM-1)的临床多重耐药豚鼠气单胞菌的基因组及表型鉴定

目的分析从粪便筛查分离出的产NDM-1型碳青霉烯酶的豚鼠气单胞菌(XX182)的抗菌药物耐药表型和基因组特征,阐明该菌株的抗菌药物耐药机制及其耐药性转移的能力。方法肉汤微量稀释法检测该菌株的抗菌药物敏感性,PCR检测碳青霉烯酶耐药基因亚型(bla_(NDM)、bla_(VIM)、bla_(IMP)、bla_(KPC)),接合试验检测耐药基因的可转移性,通过全基因组测序(WGS)和生物信息学分析明确该菌株的基因组特征。结果该菌株对头孢菌素、碳青霉烯类、环丙沙星和多黏菌素耐药,对替加环素、阿米卡星和氨曲南敏感。该菌株携带多种抗菌药物耐药基因,主要包括bla_(NDM-1)、bla_(MOX-6)、bla_(RSA-1)、bla_(TEM-1)、aac(3)-Ⅱd、cmlA5、arr-2等。毒力因子分析发现其携带有极鞭毛、侧鞭毛、Ⅵ型分泌系统(T6SS)和溶血素A等毒力因子。结论该豚鼠气单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药主要由产NDM-1型碳青霉烯酶导致,且bla_(NDM-1)耐药基因位于不可接合质粒上。尽管目前气单胞菌属对碳青霉烯类耐药率较低,但仍应加强对该克隆菌株的监测。

遗传性血管性水肿诊治的“院内多学科会诊协作网联动线上线下全程管理”模式的初探

遗传性血管性水肿(hereditary angioedema,HAE)是一种常染色体显性遗传的罕见病,患病率约为50 000分之一,以反复发作、不可预测的皮肤或黏膜下水肿为临床特征,累及咽喉部可导致潜在的致命风险。其疾病的罕见性、临床表现的多样性,造成医务人员认识不足,导致临床的误诊误治。因此,提高医务人员对HAE的认识非常重要。本院建立以院内多学科会诊(multi-disciplinary treatment,MDT)团队、省内协作网联动、线上线下患者管理和媒体宣教交互的管理模式(“院内MDT协作网联动线上线下全程管理”),通过这种模式的推广,显著提高了浙江省HAE患者的精准诊断,缩短了诊断时间,显著降低了患者的严重喉头水肿发作急救,同时为HAE的临床诊治提供参考。

ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测与体外抗菌活性分析

目的检测杭州市4所医院分离的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的AmpC酶,并对临床常用的抗菌药物进行体外抗菌活性分析。方法收集2005-2006年浙江省人民医院、浙江大学医学院附属第二医院、杭州市中医院、浙江大学医学院附属第一医院的ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共324株,用纸片法和三维试验检测AmpC酶,并用多重PCR分析AmpC酶的基因型,对产AmpC酶的病原菌采用琼脂稀释法测定临床常用的10种抗菌药物的最低抑菌浓度(MICs)。结果324株ESBLs阳性菌株用表型筛选试验筛选出76株产AmpC酶菌株,阳性率为23.5%,用多重PCR共扩增到53株AmpC酶基因型,检出率为69.7%,碳青酶烯类抗菌药物MIC50<0.25μg/ml,同时还发现4株耐碳青酶烯酶菌株。结论在杭州市ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中存在较高的AmpC酶发生率,碳青酶烯类抗菌药物具有较好的抗菌活性。

金黄色葡萄球菌临床株对利奈唑胺耐药性及耐药机制

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)临床株对利奈唑胺耐药性及耐药机制。方法收集2011-2014年浙江省人民医院900株金葡菌,采用纸片扩散法测定利奈唑胺药敏,对筛选到的耐药菌株采用琼脂稀释法测定常用药物的最低抑菌浓度(MIC),同时对其耐药基因cfr、optr A、23S r RNA基因第5功能区进行PCR扩增和序列分析。对cfr或optr A基因阳性的菌株进行基因周围序列分析和菌株多位点序列分型(MLST)。结果临床分离金葡菌对利奈唑胺耐药率为0.1%(1/900),仅发现1株耐药株,该菌株为耐甲氧西林金葡菌(MRSA),对利奈唑胺MIC为8 mg/L、头孢西丁48 mg/L、青霉素32 mg/L、环丙沙星128 mg/L、克林霉素32 mg/L、氯霉素128 mg/L、万古霉素0.75 mg/L、替考拉宁0.5 mg/L。除万古霉素和替考拉宁,对其他抗菌药物均耐药。PCR结果显示该菌株cfr基因为阳性,optr A阴性,无23S rRNA突变。该菌株携带的cfr基因位于"Tn4001-like转座子-cfr-orf1-ISEnfa4"复合转座子中,并定位于一个39 504 bp的质粒上。该菌株的MLST分型为ST5。结论临床分离金葡菌对利奈唑胺耐药率低,发现1株cfr基因介导的利奈唑胺耐药株,cfr基因位于质粒上一个常见的复合转座子中。

2型糖尿病患者合并代谢综合征增加Framingham心血管危险评分

目的：采用Framingham心血管危险评分（FRS）探讨2型糖尿病患者合并代谢综合征对10年心血管疾病风险的影响。方法：入选1708例于2008年5月至2013年4月在浙江大学医学院附属第二医院住院治疗的2型糖尿病患者，测定人体形态学和生化指标。采用ATPm2005亚洲标准诊断代谢综合征，按不同性别分为未合并代谢综合征组和合并代谢综合征组。结果：男女性2型糖尿病合并代谢综合征组腰围、体质量、体质指数、收缩压、舒张压、空腹c肽、总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇均高于未合并代谢综合征组（均P〈0．05），高密度脂蛋白胆固醇低于未合并代谢综合征组（P〈0．01）。合并代谢综合征组FRS男性[13．0（10．0，15．0）与11．0（9．0，13．0）]、女性[15．0（12．0，18．0）与12．0（6．0，14．8）]和10年心血管风险男性[12．0％（6．0％，20．0％）与8％（5．0％，12．0％）]、女性[3．0％（1．0％，6．0％）与1．0％（0．0％，2．8％）]均高于未合并代谢综合征组（均P〈0．01）。FRS和10年心血管风险随代谢综合征组分增加而增加。结论：2型糖尿病患者合并代谢综合征心血管危险因素增加，进一步增加FRS和10年心血管疾病风险。