Minocycline对rhHGF刺激ECV304细胞株表达MMP9的抑制作用

目的探讨重组人类肝细胞增殖因子(recombinant human hepatocyte growth factor,rhHGF)刺激ECV304细胞株表达基质金属蛋白酶-9(matrjx metalloproteinase-9,MMP-9)的作用及米诺环素(minocycline)的影响作用.方法绘制正常ECV304细胞株生长曲线,明确最适生长浓度及对数生长期;明确rhHGF及minocycline的作用浓度;流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测ECV304细胞株的MMP-9水平.结果①ECV304细胞株的最适生长浓度为1.0E+4/mL,对数生长期为3～5d;rhHCF的作用浓度为8ng/mL,minocycline的作用浓度为1.0E-5mol/L.②对照组MMP-9的表达量为39.74%;培养基中加入rhHGF8ng/mL后,细胞存活率为1.388169±0.102033(P＜0.01),MMP-9的表达量为40.32%;培养基中加入minocycline1.0E5mol/L后,细胞存活率为0.294526±0.076829(P＜0.01),MMP-9的表达量为19.92%.③培养基中加入minocycline 1.0E5mol/L 15min后加入rhHGF 8ng/mL,细胞存活率为0.397291±0.099504(P＜0.01),MMP-9的表达量为22 28%.结论rhHGF可刺激ECV304细胞株增殖,使MMP-9的表达量增加;minocycline可抑制ECV304细胞株增殖,使MMP-9的表达量降低;minocycline可拮抗rhHGF所引起的ECV304细胞株增殖,从而使MMP-9的表达量降低.

他克莫思对rhHGF刺激ECV304细胞株表达MMP-9的抑制作用

目的 :探讨重组人类肝细胞增殖因子 (rh HGF)刺激 ECV30 4细胞株表达基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的作用及他克莫思 (Tacrolimus,FK5 0 6 )的抑制作用。方法 :绘制正常 ECV30 4细胞株生长曲线 ,明确最适生长浓度及对数生长期 ;明确 rh HGF及 FK5 0 6的作用浓度 ;流式细胞仪 (FCM)检测 ECV30 4细胞株的 MMP- 9水平。结果 :1ECV30 4细胞的最适生长浓度为 1.0 E+ 4 / ml,对数生长期为 3～ 5 d;rh HGF的作用浓度为 8ng/ ml,IC50 为 8.2 7ng/ ml;FK5 0 6的作用浓度为 5 0 ng/ ml,IC50 为 5 1.6 3ng/ ml。 2对照组 MMP- 9的表达量为 39.74 % ;培养基中加入rh HGF 8ng/ ml后 ,细胞存活率为 1.38816 9± 0 .10 2 0 33(P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 4 0 .32 % ;培养基中加入FK5 0 6 5 0 ng/ ml后 ,细胞存活率为 0 .39876 4± 0 .0 92 4 76 (P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 14 .6 1% ;培养基中加入FK5 0 6 5 0 ng/ ml15 min后加入 rh HGF8ng/ ml,细胞存活率为 0 .76 72 0 3± 0 .0 2 6 39(P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 35 .0 8%。结论 :rh HGF可刺激 ECV30 4细胞增殖 ,使 MMP- 9的表达量增加 ;FK5 0 6可抑制 ECV30 4细胞增殖 ,使 MMP- 9的表达量降低 ;FK5 0 6可拮抗 rh HGF所引起的 ECV30 4细胞增殖 ,从而使 MMP-

系统性红斑狼疮患者血清肝细胞生长因子及基质金属蛋白酶9的研究

目的探讨血清肝细胞生长因子(HGF)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动程度的关系和意义,并对相关机理进行探讨。方法①双抗体夹心法检测血清HGF及MMP-9水平;②绘制ECV304细胞株生长曲线;③明确重组人肝细胞生长因子(rhHGF)的作用浓度;④流式细胞仪检测MMP-9水平。结果患者血清HGF明显升高(P<0.001),MMP-9明显降低(P<0.001);经糖皮质激素治疗后HGF浓度下降(P<0.05),MMP-9浓度升高(P<0.05);活动期HGF高于非活动期(P<0.05),MMP-9低于非活动期(P<0.05);肾损组HGF高于非肾损组(P<0.001),MMP-9则低于非肾损组(P<0.05);关节炎组HGF高于非关节炎组(P<0.01),MMP-9水平两组之间差异无显著性(P>0.05);以HGF水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.707,灵敏度为66.7%;以MMP-9水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.984,灵敏度为97.2%;同时检测HGF及MMP-9水平,灵敏度为66.7%(24/36);rhHGF的作用浓度为8ng/mL;正常ECV304细胞株MMP-9的表达量为39.74%,rhHGF刺激后MMP-9的表达量为40.32%。结论HGF及MMP-9可能参与SLE的发病机制,其水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及疾病进展与改善的指标,且血清MMP-9水平诊断准确性更高;rhHGF可促进ECV304细胞株MMP-9的表达。

趋化因子和基质金属蛋白酶-9与系统性红斑狼疮活动性的关系

目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清中巨噬细胞来源的趋化因子 (MDC)及基质金属蛋白酶 9(MMP 9)水平与疾病活动程度的关系与意义。方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测和比较分析 36例SLE患者和 30名健康人血清MDC及MMP 9的水平。结果 SLE患者组血清MDC和MMP 9水平 (45 1± 77ng/L ,10 9± 113μg/L)比健康对照组 (6 0 6± 2 4ng/L ,35 2± 15 5μg/L)明显降低 (均P <0 0 0 1) ;经糖皮质激素治疗后血清MDC及MMP 9浓度升高 (P <0 0 0 1和P<0 0 5 )。活动期SLE血清MDC和MMP 9水平低于非活动期 (P <0 0 0 1和P <0 0 5 ) ;肾脏损害组均明显低于非肾脏损害组 (P <0 0 0 1和P <0 0 5 )。而血清MDC水平在关节炎组明显低于非关节炎组 (P <0 0 0 1) ,但MMP 9水平差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论 MDC和MMP 9可能参与SLE的发病机制 ,二者的血清水平可作为反映SLE活动程度、肾脏损害以疾病进展与改善的指标。