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microRNA-29c在雷公藤内酯醇抗克唑替尼耐药H3122肺癌细胞增殖的作用及机制研究
被引量:
2
1
作者
周小芸
龚柳
+1 位作者
潘虹
方勇
《全科医学临床与教育》
2019年第5期393-396,共4页
目的探讨microRNA-29c在雷公藤内酯醇(TP)抗克唑替尼耐药肺癌细胞增殖的作用及机制研究。方法将克唑替尼耐药H3122分为miRNA-29c inhibitor+TP组、阴性对照miRNA(miRNA-NC)+TP组、TP组和对照组。采用MTT检测细胞存活率,AnnexinV-FITC试...
目的探讨microRNA-29c在雷公藤内酯醇(TP)抗克唑替尼耐药肺癌细胞增殖的作用及机制研究。方法将克唑替尼耐药H3122分为miRNA-29c inhibitor+TP组、阴性对照miRNA(miRNA-NC)+TP组、TP组和对照组。采用MTT检测细胞存活率,AnnexinV-FITC试剂盒检测细胞凋亡,Western blot法检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3、DNMT3a表达,RT-qPCR检测DNA甲基转移酶3(DNMT3)mRNA、miRNA-29c表达,定量甲基化特异性PCR(QM‐SP)法检测视黄酸受体(RARb)、RAS域家族蛋白1(RASSF1)、死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)和p16 mRNA表达和甲基化状态。结果与对照组比较,TP组中,TP浓度为10 nmol/L、25 nmol/L和50 nmol/L时,miRNA-29c表达增加(t分别=43.12、61.65、83.50,P均<0.05),DNMT3a表达下降(t分别=146.56、628.05、653.16,P均<0.05)。与对照组比较,TP组细胞存活率、p16、RASSF1、DAPK1、RARb甲基化降低(t分别=14.76、94.52、103.08、67.15、72.22,P均<0.05)、细胞凋亡率增加(t=-9.32,P<0.05),Western blot结果显示DNMT3a、Bcl-2表达明显降低,Bax、cleaved-ca‐spase3表达明显增高。与miRNA-NC+TP组比较,miRNA-29c inhibitor+TP组细胞存活率、p16、RASSF1、DAPK1、RARb甲基化明显增加(t分别=-4.08、-7.77、-67.84、-59.66、-46.79,P均<0.05),细胞凋亡率明显下降(t=5.40,P<0.05)。Western blot结果显示DNMT3a、Bcl-2表达明显增加,Bax、cleaved-caspase3表达明显降低。结论 TP能够增加miRNA-29c表达,下调DNMT3表达和活性,降低抑癌基因的甲基化水平,抑制H3122CR细胞增殖,发挥抗肺癌作用。
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关键词
雷公藤内酯醇
microRNA-29c
DNA甲基化转移酶3a
甲基化
细胞增殖
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职称材料
题名
microRNA-29c在雷公藤内酯醇抗克唑替尼耐药H3122肺癌细胞增殖的作用及机制研究
被引量:
2
1
作者
周小芸
龚柳
潘虹
方勇
机构
浙江大学医学院附属邵逸夫医学下沙院区肿瘤内科
浙江大学
医学院
附属
邵逸夫
医院
肿瘤
内科
出处
《全科医学临床与教育》
2019年第5期393-396,共4页
基金
浙江省自然科学基金(LQ16H160003)
文摘
目的探讨microRNA-29c在雷公藤内酯醇(TP)抗克唑替尼耐药肺癌细胞增殖的作用及机制研究。方法将克唑替尼耐药H3122分为miRNA-29c inhibitor+TP组、阴性对照miRNA(miRNA-NC)+TP组、TP组和对照组。采用MTT检测细胞存活率,AnnexinV-FITC试剂盒检测细胞凋亡,Western blot法检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3、DNMT3a表达,RT-qPCR检测DNA甲基转移酶3(DNMT3)mRNA、miRNA-29c表达,定量甲基化特异性PCR(QM‐SP)法检测视黄酸受体(RARb)、RAS域家族蛋白1(RASSF1)、死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)和p16 mRNA表达和甲基化状态。结果与对照组比较,TP组中,TP浓度为10 nmol/L、25 nmol/L和50 nmol/L时,miRNA-29c表达增加(t分别=43.12、61.65、83.50,P均<0.05),DNMT3a表达下降(t分别=146.56、628.05、653.16,P均<0.05)。与对照组比较,TP组细胞存活率、p16、RASSF1、DAPK1、RARb甲基化降低(t分别=14.76、94.52、103.08、67.15、72.22,P均<0.05)、细胞凋亡率增加(t=-9.32,P<0.05),Western blot结果显示DNMT3a、Bcl-2表达明显降低,Bax、cleaved-ca‐spase3表达明显增高。与miRNA-NC+TP组比较,miRNA-29c inhibitor+TP组细胞存活率、p16、RASSF1、DAPK1、RARb甲基化明显增加(t分别=-4.08、-7.77、-67.84、-59.66、-46.79,P均<0.05),细胞凋亡率明显下降(t=5.40,P<0.05)。Western blot结果显示DNMT3a、Bcl-2表达明显增加,Bax、cleaved-caspase3表达明显降低。结论 TP能够增加miRNA-29c表达,下调DNMT3表达和活性,降低抑癌基因的甲基化水平,抑制H3122CR细胞增殖,发挥抗肺癌作用。
关键词
雷公藤内酯醇
microRNA-29c
DNA甲基化转移酶3a
甲基化
细胞增殖
Keywords
triptolide
microRNA-29c
DNA methyltransferase 3a
methylation
proliferation
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
microRNA-29c在雷公藤内酯醇抗克唑替尼耐药H3122肺癌细胞增殖的作用及机制研究
周小芸
龚柳
潘虹
方勇
《全科医学临床与教育》
2019
2
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