蛋白激酶C抑制剂Ro-31-8220逆转高糖诱导乳鼠心肌细胞肥大的作用及其相关机制

目的:观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro-31-8220对高糖诱导的乳鼠心肌细胞肥大的影响,并初步探讨PKC及其下游信号转导途径在其中的作用机制。方法:建立乳鼠心肌细胞培养模型,随机分成对照组(5.5mmol.L-1)、不同浓度高糖组(10mmol.L-1、15mmol.L-1、20mmol.L-1、25.5mmol.L-1)、高糖(25.5mmol.L-1)+PKC抑制剂Ro-31-8220组(50nmol.L-1)和高糖(25.5mmol.L-1)+NF-κB抑制剂BAY11-7082(5mmol.L-1)组,分别测定各组乳鼠心肌细胞直径和蛋白质含量,并应用Westernblotting检测乳鼠心肌细胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-κB和c-Fos等蛋白的表达水平。结果:高糖可以明显诱导乳鼠心肌细胞肥大,提高乳鼠心肌细胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-κB和c-Fos的蛋白表达,与对照组相比差异显著(P<0.01),并呈现一定的浓度依赖性;而Ro-31-8220能够逆转上述现象,其细胞直径和蛋白表达低于高糖组,并有显著差异(P<0.01)。结论:高糖能够浓度依赖性地诱导心肌细胞肥大,而PKC抑制剂Ro-31-8220则能抑制高糖所诱导的这种反应,其机制可能与PKC/NF-κB/c-Fos途径相关。

葡萄糖浓度变化对乳鼠心肌细胞的影响及其机制的探讨

目的观察不同浓度的葡萄糖培养对乳鼠心肌细胞形态及功能的影响，并初步探讨其机制。方法建立乳鼠心肌细胞培养模型，随机分成低糖（5．5mmol／L）组、高糖（25．5mmol／L）组、间歇性高糖（5．5mmol／L和25．5mmol／L交替培养）组以及高糖（25．5mmol／L）＋蛋白激酶C（PKC）抑制剂Ro-3l-8220（50nmol／L）组，培养5d后，观察心肌细胞搏动情况，测定心肌细胞直径，并应用Westernblot检测心肌细胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、核因子（NF）-κB和c-fos的蛋白表达水平。结果不同浓度葡萄糖培养的心肌细胞在搏动频率、细胞直径以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF—κB和c-fos的蛋白表达水平存在差异，其中高糖组心肌细胞搏动频率、细胞直径以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF—κB和c-fos的蛋白表达水平显著高于低糖组[高糖组比低糖组：搏动频率（64．15±1．55）次／min比（57．22±1．91）次／min，细胞直径（20．1l±0．91）Ixm比（17．18±0．82）／xm，P均〈0．01]，间歇性高糖组的上述指标则显著高于高糖[间歇性高糖组比高糖组：搏动频率（66．60±2．02）次／min比（64．15±1．55）次／min，细胞直径（22．39±0．92）μm比（20．11±0．91）μm，P均〈0．01]和低糖组[间歇性高糖组比低糖组：搏动频率（66．60±2．02）次／min比（57．22±1．91）次／min，细胞直径（22．39±0．92）μm比（17．18±0．82）μm，P均〈0．01]，而PKC抑制剂Ro-31—8220则能逆转高糖所诱导的上述变化[高糖＋PKC抑制剂Ro-31-8220组比高糖组：搏动频率（62．17±1．58）次／min比（64．15±1．55）次／min，细胞直径（18．41±0．78）μm比（20．11±0．91）μm，P均〈0．01]。结论高糖或间歇性高糖的环境能够导致心肌细胞肥大，搏动频率增加，同时影响心肌细胞PKC-α、PKC-β2、NF—κB和c—fos的表达和活性，而PKC抑制剂Ro-31-8220能够逆转高糖所诱导的上述变化。因此高糖特别是间歇性高糖可能通过PKC／NF-κB／c-fos途径诱导了心肌细胞结构和功能的改变，导致了糖尿病心肌损害。