端粒酶启动子肿瘤靶向肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因抗人肠癌细胞的活性研究

目的：探讨端粒酶(hTERT)启动子驱动下肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related Apoptosis-inducing Ligand，TRAIL)基因在大肠癌细胞 DLD1 和 HT-29的表达及其杀细胞作用。方法：通 过腺病毒载体系统将 hTERT 启动子驱动的 TRAIL 基因转入大肠癌细胞 DLD1和 HT-29，流式细胞仪检测 GFP/ TRAIL(绿色荧光蛋白和 TRAIL 融合基因)的表达和细胞凋亡率，MTT 法检测细胞生长抑制率。结果：端粒 酶启动子驱动的 GFP/TRAIL 基因和 CMV 启动子驱动的 GFP(绿色荧光蛋白)基因在 DLD1和 HT-29内的表 达平分别达41． 63%和31． 4%；GFP/TRAIL 基因对 DLD1和 HT-29细胞的生长抑制率分别达93． 5%和74． 2%， 凋亡率分别是41． 1%和25． 8%，与 PBS 和 Ad/CMV-GFP 的差异都有显著意义(P＜0． 05) 。结论：端粒酶启 动子驱动的 GFP/TRAIL 融合基因在大肠癌细胞 DLD1和 HT-29中能够有效的表达；TRAIL 基因对大肠癌细 胞 DLD1和 HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。

新型生物标志物对脓毒症急性肾损伤的诊断价值比较

目的比较中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、尿肾损伤分子-1（KIM-1）和血半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C（CystatinC）对脓毒症急性肾损伤（AKI）的诊断价值。方法采用随机对照前瞻性研究方法，选择自2011—01—2012—06人住绍兴市人民医院ICU的73例脓毒症患者。所有患者人院后分别测定血清NGAL（sNGAL）、血清CystatinC（sCystatinC）、血清肌酐（sEt）、尿NGAL（uNGAL）、尿KIM-1（uKIM-1），计算APACHEII评分、SOFA评分，随访记录28d病死率。依据AKIN定义的AKI诊断标准判断患者是否发生AKI，将患者分为AKI组和非AKI组。绘制受试者工作特征曲线（ROC），计算各指标预测脓毒症肾损伤的曲线下面积（AUC），比较不同来源的三种新型生物标志物对脓毒症AKI的诊断效能。计量资料采用t检验或Mann—WhitneyU检验，计数资料比较采用，检验。结果73例脓毒症患者中，非AKI组38例，AKI组35例，AKI组的APACHEⅡ评分、SOFA评分、sCr及28d病死率均高于非AKI组（P分别〈0．05和〈0．01）。sNGAL、sCystatinC、uNGAL、uKIM-1均与脓毒症AKI相关，AKI组各项检测指标均高于非AKI组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。各项指标的ROC曲线分析，uNGAL的AUC（0．933）最大，以118．5r,g／mL为截断值，其敏感度为92．6％，特异度为89．4％。结论sNGAL、sCystatinC、uNGAL、uKIM一1均能预测脓毒症AKI的发生，其中uNGAL准确度最高。uNGAL可作为脓毒症AKI患者的早期诊断标志物。

Caspase-3抑制剂抑制长春碱诱导的人乳腺癌细胞凋亡及IκΒ-α降解

目的:本实验通过阻断caspase-3途径,观察长春碱诱导的肿瘤细胞凋亡及胞浆内IκΒ-α蛋白降解的影响,以探索长春碱诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导途径。方法:用二甲基亚砜对照、100μmol/L caspase-3抑制剂(DEVD-CHO)预处理乳腺癌Bcap37细胞3h后,加入不同浓度的长春碱,以MTT法检测肿瘤细胞增殖能力,以细胞DNA片段分析及PI染色法检测肿瘤细胞凋亡,以蛋白免疫印迹法检测pro-caspase-3和IκΒ-α蛋白的变化。结果:蛋白免疫印迹法证实长春碱可诱导pro-caspase-3蛋白的降解。经MTT法、DNA凋亡梯状条带法及流式细胞仪PI染色法证实,DEVD-CHO能减弱由长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡。两组的IC50分别为56.8μmol/L和87.4μmol/L。蛋白免疫印迹实验表明,DEVD-CHO能抑制由长春碱所诱导的IκΒ-α蛋白磷酸化降解。结论:在长春碱诱导肿瘤细胞凋亡过程中,NF-κΒ/IκΒ信号转导途径起着重要作用,caspase-3途径参与调节。阻断该途径将减弱长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡和IκΒ-α磷酸化降解。

超声引导经皮肝穿刺活检假阴性分析

目的:分析超声引导经皮肝肿瘤穿刺活检失败的原因,提高穿刺活检的成功率。方法:收集1997-2000年间309例肝癌穿刺活检中,首次病理诊断阴性23例(占7.44％),回顾患者的穿刺过程。结果:穿刺针偏离肿瘤13例,标本质量不符合病理要求10例。结论:肿瘤位置过深或近膈面,肝硬化,脏器的退避与呼吸的影响是穿刺针偏离的主要原因;而取材部位的选择是影响标本质量的关键。

四种5-羟色胺3受体拮抗剂防治化疗所致恶心呕吐的安全性

目的分析甲磺酸多拉司琼、昂丹司琼、托烷司琼和帕洛诺司琼防治化学治疗(化疗)所致恶心呕吐的安全性。方法收集2017年1月—2019年9月在河南省肿瘤医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、浙江大学医学院附属邵逸夫医院接受化疗的患者病历2417份,均使用过甲磺酸多拉司琼、昂丹司琼、托烷司琼、帕洛诺司琼预防或者治疗呕吐。排除合并心血管疾病及药物禁忌证患者。分析4种5-羟色胺3(5-HT 3)受体拮抗剂在组间或同组内分层间心血管不良事件和总不良事件的发生情况。结果该研究人群心血管相关不良事件总发生率为6.79%,多拉司琼组的心血管不良事件发生率显著低于托烷司琼组(P<0.05)。总不良事件发生率为59.12%,甲磺酸多拉司琼组总不良事件发生率显著低于其他组(P<0.05)。结论在防治化疗所致恶心呕吐方面,临床数据显示,对于无心血管疾病的肺癌、胃癌或乳腺癌患者,甲磺酸多拉司琼用药安全。但研究结论需进一步通过前瞻性研究验证。

结直肠癌肝转移微创射频消融术远期疗效影像评估

目的:探讨射频消融对结直肠癌肝转移患者的远期疗效影像评估。方法:本研究回顾性分析2010年6月至2015年10月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院接受RFA治疗的CRLM患者临床及影像资料。对所有患者射频后生存期(射频OS)及无进展生存期(PFS)运用SPSS22.0统计分析软件,通过KaplainMeier方法描绘患者生存曲线,进行单因素分析筛选;并对单因素筛选后有统计学意义的指标采用Cox比例风险模型进行多因素分析。结果:影响射频OS结局的因素是肝脏肿瘤最大直径、肝脏病灶数目、RFA术后1个月肿瘤灭活情况。影响PFS结局的因素为肝脏肿瘤最大直径、RFA术后1个月肿瘤灭活情况。结论:结直肠癌肝转移患者通过射频消融治疗后可获得较好的远期生存,特别是针对直径≤3cm、单发的病灶来说是一种安全有效的治疗手段。

介入微弹簧圈栓塞术治疗颅内动脉瘤的临床应用情况

目的探讨介入微弹簧圈栓塞术治疗颅内动脉瘤的临床疗效。方法选择2015年3月至2017年10月浙江大学医学院附属邵逸夫医院收治的颅内动脉瘤患者80例,对患者进行介入微弹簧圈栓塞术治疗,对该术的治疗效果进行回顾性分析。结果80例患者中,完全栓塞60例,次全栓塞18例,不完全栓塞2例。动脉瘤大小<4.0 mm患者的完全栓塞率显著高于动脉瘤大小≥4.0 mm患者,次全栓塞发生率则低于动脉瘤大小≥4.0 mm患者,差异有统计学意义(P<0.05);80例患者中,微导管不到位出现2例,弹簧圈游走2例,形成血栓患者2例,动脉瘤再生长、脑血管痉挛、动脉瘤破裂各1例。结论介入微弹簧圈栓塞术对于治疗颅内动脉瘤患者具有较高的临床应用效果。

白细胞介素-18基因转染的肺癌细胞与树突状细胞融合体的抗肿瘤作用

目的研究白细胞介素-18（IL-18）基因转染的肺癌细胞与树突状细胞（DC）融合体的抗肿瘤作用。方法（1）从人外周血单核细胞诱导培养DC，与IL-18基因转染的NCI-H460肺癌细胞融合，经免疫磁珠筛选。（2）设转染组（GT组）、空载体转染组（PT组）、未转染组（NT组）和对照组（BC组），分别以IL-18转染的融合细胞、peDNA3．1^＋转染的融合细胞、未转染的融合细胞活化的T细胞为效应细胞，BC组不含效应细胞，用乳酸脱氢酶（LDH）法测定效应细胞对NCI—H460细胞的杀伤作用。（3）荷瘤裸鼠皮下注射上述3种效应细胞，以BC组为空白对照，比较4组裸鼠肿瘤体积和重量。结果3组效应细胞在体外对NCI-H460细胞的杀伤率分别为53．1％，30．1％和31．5％；3组裸鼠肿瘤体积及肿瘤重量明显低于BC组，以GT组最低。结论IL-18基因转染的融合细胞可有效诱导抗肿瘤免疫。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因对肝癌细胞杀伤作用及旁观者效应研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应 ,以及旁观者效应的可能机制。方法 构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad/GT TRAIL +Ad/PGK GV16 ,通过 2 93包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC772 1细胞中 ,RT PCR检测TRAIL基因的表达 ,以MTT法检测细胞生长抑制率 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率 ;不同比例混合培养SMMC772 1/TRAIL和SMMC772 1细胞 ,检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应 ,并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞 ,观测可溶性因子在TRAIL基因旁观者效应中的作用。结果 TRAIL基因对SMMC772 1细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;SMMC772 1细胞的凋亡率 ,TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;混合细胞的生长抑制率 ,以SMMC772 1/TRAIL占 0 %时为 0 ,占 5 %时为 15 .9% ,占 2 5 %时为 6 7.0 % ,占 5 0 %时为 80 .2 % ,占 10 0 %时为 87.7% ;以PBS对SMMC772 1的生长抑制率为 0 ,则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC772 1的生长抑制率为 4 % ,两者差异无显著性。

端粒酶启动子肿瘤靶向基因抗大肠癌的研究

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1,流式细胞仪检测GFP/TRAIL的表达和DLD1细胞凋亡率。结果端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白 )基因在DLD1内的表达率分别达 4 1 6 3%和 5 4 0 7% ;GFP/TRAIL基因对DLD1细胞的生长抑制率和凋亡率分别达 93 5 0 %和 5 6 97% ,与PBS和Ad/hTERT LacZ的差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL融合基因在大肠癌细胞中能够有效地表达 ;TRAIL基因对大肠癌细胞DLD1有明显的抑制生长和促凋亡作用。

结直肠癌术后FOLFOX化疗神经毒性的防治

FOLFOX方案化疗即奥沙利铂、亚叶酸和氟尿嘧啶的联合化疗，临床证明具有较高疗效。该方案已成为结直肠癌术后化疗的标准方案和姑息治疗的重要手段。但其毒副反应较大，主要为神经毒副反应，一种是用药后较快出现的急性神经毒性，另一种是多周期用药后出现的剂量累积性慢性神经毒性。FOLFOX化疗的神经毒性常影响患者完成预定的治疗计划。笔者近年根据其可能的毒理机制，

胰腺神经内分泌癌二例

例1 男，57岁，因B超发现肝内多发占位2周于2003年1月入院。体检：皮肤、巩膜无黄染，腹平软，腹部平脐水平偏左处可扪及一质地中等边界不清无压痛、活动性欠佳的肿块，6cm×7cm大小，肝脾肋下未及，移动性浊音阴性。血常规、肝肾功能无明显异常，癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）阴性，CA19—995．4ng／ml。CT示：左右肝内见多个大小不一近圆形低密度灶，边缘轻中度强化，中心密度较低，最大者位于左肝3．4cm×3．6cm。胰尾部一近圆形软组织肿块，向外明显膨隆，5．3cm×6．4cm大小，病灶增强后见其内大片低密度区，边缘明显强化。超声引导下胰腺肿块穿刺活检示：神经内分泌癌，免疫组化示神经特异性烯醇化酶（NSE）、