纳米相陶瓷支架与人成骨细胞生物相容性的体外实验研究

研究了 2种新型多孔纳米陶瓷支架材料 (hydroxyapatite,HA和tricalciumphosphate,TCP)的生物相容性 .从人 4月龄胚胎骨膜组织中分离培养出骨膜来源的成骨细胞 (periosteal derivedosteoblast,POB) ,采用人胚骨膜成骨细胞与 2种陶瓷支架的体外复合培养 ,观察细胞在材料上的生长及生理功能表达情况 .发现人POB在HA和TCP表面生长繁殖良好 ,并发挥成骨功能 .材料对细胞的增殖还有一定的促进作用 (p<0 0 5 ) .实验表明 :2种新型多孔陶瓷支架材料均有良好的生物相容性 .

脱蛋白骨-钛网支架成骨细胞复合物修复骨缺损的研究

探讨成骨细胞和脱蛋白骨-钛网(DPB- TM)支架复合物修复骨缺损的能力。用新西兰兔30只,随机分成3组,各10只。实验组第三代胎兔成骨细胞以5×10 6 m l- 1浓度接种于DBP- TM支架中,复合物体外培养1周后修复颅骨1.5 cm×1.5 cm缺损。对照组 、,同样的缺损分别用DBP- TM支架修复和注射成骨细胞悬液。术后12周,三维CT检查后,对取下的标本进行大体、扫描电镜、组织学观察及生物力学测试。结果显示,实验组植入的复合物与正常骨组织之间分界线模糊,有骨小梁通过,界面紧密融合;支架上有大量新骨形成,且支架部分被吸收;植入12周后的复合体抗压强度(18.93±1.12 MPa)大于正常颅骨(16 .96±1.6 0 MPa) (P<0 .0 5 )。对照组均无新生骨,仅见缺损区有纤维样组织覆盖。因此,体外培养的成骨细胞经增殖后接种于DPB- TM支架中可以用来修复骨缺损。

超低温冻存同种异体成骨细胞与异种脱钙骨复合异位组织工程化骨

目的 :研究同种异体成骨细胞经超低温冻存后在体内的成骨能力及其免疫反应。 方法 :体外分离培养 SD大鼠颅骨成骨细胞 ,提纯并传代至第 3代时一部分作为对照组用 ;另一部分采用 - 196℃超低温冻存 ,2 4 h后复苏。将该两种第 3代细胞分别与脱细胞并去抗原性的猪脱钙型松质骨 (decalcified bone,DB)复合 ,将两种复合体和单纯 DB分别植入 SD大鼠背部肌袋内 ,各2 4只 ,4周后取标本 ,应用组织学、碱性磷酸酶测定、体视学及免疫学测定 ,观察成骨现象及免疫反应。 结果 :经超低温冻存的同种异体成骨细胞异体异位植入后 ,成骨量、成熟度明显优于未冻存成骨细胞 ;引起的免疫反应亦低于未冻存细胞。 结论 :同种异体成骨细胞经超低温冻存、复苏后 ,抗原性明显降低 ,未引起强烈的免疫排斥反应 。

积雪草甙、羟基积雪草甙对体外培养人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究积雪草甙(asiaticoside,Ad)和羟基积雪草甙(madecassoside,Md)对体外培养人成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)的增殖及胶原蛋白合成的影响。方法:应用 XTT 方法比较研究 Ad 和Md 对 HSFb 增殖的影响,应用放射免疫的方法测定各实验组和空白对照组细胞上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原氨基端肽原(procollagen Ⅰ of aminoterminal propeptide,PINP;procollagen Ⅲ of aminoterminal propeptide,PⅢNP)的含量。结果:(1)Ad 和 Md 在浓度高达200μg/ml 时仍未见任何细胞毒性;(2)与空白对照组相比,Ad 和 Md 对 HSFb 有明显促进增殖作用(P<0.05);两者同时也可有效刺激 HSFb PⅠNP 和 PⅢNP 分泌;(3)Ad 和 Md 刺激靶细胞 PⅠNP 和 PⅢNP 分泌的生物学作用呈现明显的量效关系;(4)在一定剂量范围内,对促进 HSFb 增殖以及刺激 PⅠNP 分泌,Ad 显示出比 Md 更强的生物活性(P<0.05,P<0.01)。结论:Ad 和 Md 在刺激体外培养 HSFb 增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成中均有明显的生物活性。

兔颞下颌关节盘前移位后关节软骨细胞的凋亡及其意义

目的 观察颞下颌关节盘前移位动物模型的关节软骨细胞凋亡动态改变 ,探讨软骨细胞凋亡的意义。方法 日本大白兔 2 6只 ,实验组 2 0只行手术 ,在不打开颞下颌关节囊的情况下制成关节盘前移位动物模型 ,采用原位末端标记法 (TUNEL)观察术后不同病变时期关节区组织学的改变和软骨细胞凋亡的情况。结果 术后 1～ 2周为髁突软骨细胞凋亡的高峰期 ,集中于功能区的肥大层和增殖层。 4～ 6周进入关节改建期。结论 关节盘前移位后可激活软骨细胞的凋亡机制 。