不同致敏和激发时间对哮喘模型的影响

目的:研究不同致敏和激发时间对建立哮喘气道炎症和气道反应性的作用。方法:采用早致敏早激发(5周龄致敏9周龄激发),早致敏晚激发(5周龄致敏49周龄激发),晚致敏晚激发(45周龄致敏49周龄激发)的方法,观察不同致敏和激发时间对诱导小鼠气道反应性、肺部嗜酸粒细胞炎症和黏液分泌的作用。结果:早致敏早激发和早致敏晚激发两组均表现出气道反应性显著升高,嗜酸粒细胞浸润以及黏液分泌增多,与各自阴性对照比较差异显著,晚致敏晚激发的方法不能诱发气道高反应性和肺部炎症。此外,在两组早致敏模型组,经过不同时间间隔激发,早致敏早激发组嗜酸粒细胞浸润和黏液分泌较早致敏晚激发组明显。结论:早期致敏时间决定哮喘炎症的诱发,致敏和激发的时间间隔影响炎症的严重程度。早致敏晚激发的方法可能作为晚发型哮喘模型的建立方法。

对胸腹部膨胀体积法测量小鼠潮气量可行性的评价

目的：探讨利用双体描箱法对胸腹部膨胀体积测量小鼠潮气量的可行性。方法：选用6只呼吸频率在90～120h／min的小鼠，通过双体描箱法进行潮气量和胸腹部膨胀体积的同步测量。结果：小鼠胸腹部膨胀体积为（0.369±0.014）ml，潮气量为（0.356±0.012）ml，前者显著高于后者（P〈0.01）。结论：目前常用的以胸腹部膨胀体积代替潮气量的测量方法不能准确测定潮气量。

卵白蛋白致敏时减毒活菌卡介苗干预对哮喘小鼠气道炎性反应的影响

目的探讨分别在卵白蛋白致敏时和致敏前以不同剂量接种卡介苗对哮喘小鼠气道炎性反应及黏液分泌的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为模型组、阴性对照组、4组卡介苗接种组。10^5、10^6集落形成单位致敏前接种依次为A1组、A2组，致敏时接种依次为B1组、B2组。收集肺泡灌洗液和外周血，分别测定其中IL-5、IFN-γ浓度；病理观察肺组织炎性反应及气道黏液分泌情况，测算杯状细胞化生指数、上皮黏液储备指数。结果卡介苗接种后，只有B1组、B2组能抑制化生指数（P〈0．05）；B2组较A1组、A2组明显地降低了储备指数（P〈0．05），降低了肺泡灌洗液中IL-5／IFN-γ比值（P〈0．01）。结论致敏时接种卡介苗较致敏前接种能更有效抑制哮喘小鼠气道炎性反应、减少黏液分泌，并且存在一定量效关系，可能与纠正Th1／Th2失衡有关。

CD69的表达在小鼠嗜酸细胞的活化与凋亡中的作用

目的:观察在体内、体外不同条件下小鼠嗜酸细胞(EOS)表面CD69的表达与细胞存活率,探讨CD69的表达在小鼠EOS的活化、凋亡中的作用。方法:提纯IL-5高分泌转基因小鼠外周血中的EOS,测定其表面CD69的表达,体外以PMA+MA刺激EOS,在1 h、12 h、18 h、24 h测定细胞表面CD69的表达与细胞存活率;分别以1μg/L的IL-4、IL-5、IL-12、IL-13、IFN-γ、GM-CSF培养EOS18 h后测定细胞的存活率与表面CD69的表达。制备小鼠哮喘模型,观察CD69在小鼠BALF、外周血EOS中的表达。结果:新鲜提纯的小鼠外周血EOS不表达CD69,PMA+MA刺激的EOS在1 h后即有CD69的表达,12 h表达至高峰,至少持续24 h以上;但细胞的存活率快速下降。不同细胞因子对EOS的培养均可诱导CD69的表达,其中IL-13、IFN-γ、GM-CSF对此影响明显,且GM-CSF可显著抑制EOS的凋亡;哮喘小鼠外周血EOS无CD69的表达,而BALF中EOS可有CD69的表达。结论:静止小鼠EOS表面不表达CD69,但在体内、体外不同条件下激活的EOS表面均有CD69的表达;同时,体外实验显示CD69的表达与细胞凋亡密切相关。结果提示CD69既可作为EOS激活的表面标记物,同时又可诱导EOS的凋亡,这为哮喘治疗提供新的思路。

犬肺血栓栓塞症模型改进及血流动力学指标的动态观察

目的:改进犬急性肺血栓栓塞症的模型,动态监测肺血栓栓塞后血流动力学指标的变化,探讨该模型改进方法对血流动力学指标的变化是否有影响。方法:实验于2001-07/12在南通大学医学院中心实验室完成。健康成年杂种犬18只,体质量8～13kg,随机分为实验组(自体血+凝血酶+人纤维蛋白原)、对照Ⅰ组(自体血+凝血酶)、对照Ⅱ组(生理盐水+人纤维蛋白原),每组6只。①模型制备:实验组采犬自体静脉血10mL加入事先已加入人纤维原20mg的消毒平皿内,并加入凝血酶200u,静置2h后切成5mm×5mm×5mm的凝血块,备用。将犬麻醉后,经股静脉注入血栓,并予10mL生理盐水快速注入,建立急性肺栓塞模型。对照Ⅰ组犬自体血栓中不加人纤维蛋白原,余同实验组。对照Ⅱ组注入20mL已加入人纤维蛋白原20mg的生理盐水。②病理检查:分别于栓塞后第1,5和第10天每组处死2只犬,取肺组织,观察大体标本有无肺梗死灶;沿肺动脉垂直方向取材,观察肺动脉断面可否见到栓子。③肺动脉造影和血流动力学监测:于栓塞前、栓塞后立即做肺动脉造影并记录肺动脉收缩压、肺动脉舒张压、肺动脉平均压、肺动脉楔压,栓塞后30min,1h复测上述指标。④D-二聚体水平检测:于栓塞前、栓塞后30min,1h,2h,4h,24h,48h,3d,4d,5d,7d,10d分别采股静脉血约2.7mL置于已加0.19mmol/L枸橼酸钠0.3mL抗凝的试管中,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法进行测定。结果:每组各有6只犬纳入结果分析。①各组实验犬栓塞后肺动脉造影表现:实验组和对照Ⅰ组肺动脉造影见肺动脉截断征象,对照Ⅱ组均未见异常改变。②各组实验犬大体病理表现:对照Ⅱ组肺组织和血管壁未见异常,实验组和对照Ⅰ组在肺外周见到底部与胸膜相接、顶部指向肺门的楔形梗死灶。切面上各例均见肺动脉栓塞。③各组实验犬栓塞前后血流动力学变化:实验组于栓塞后即刻肺动脉收缩压、肺动脉舒张压明显上升,1h后开始下降,自身前后比较及与对照Ⅱ组比较,差异有显著性(P<0.05);与对照Ⅰ组各相应时点比较,差异无显著性。肺动脉楔压栓塞前后变化不明显(P>0.05)。④各组实验犬栓塞前后D-二聚体水平的变化:实验组于栓塞后30min明显上升,一两小时达高峰,24h后明显下降,自身前后比较及与对照Ⅰ、Ⅱ组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:犬肺血栓栓塞症模型改进成功。该模型改进方法不影响血流动力学指标的变化。血浆D-二聚体在急性肺血栓栓塞症的早期有一个相对特征性的动态变化过程,动态检测血浆D-二聚体有助于急性肺血栓栓塞症的早期评估。

临床及动物实验中气道反应性测定现状及进展

气道反应性（Airway responsiveness）是支气管对于乙酰胆碱或组织胺等刺激物的刺激的反应。气道高反应性（Airway hyperresponsiveness，AHR）、气道炎症以及可逆性气流阻塞是支气管哮喘的标志。AHR的测量，对于诊断哮喘，以及哮喘治疗反应的监测均至为重要。而且，AHR的测量还可以预测哮喘治疗吸入激素减量阶段可能的病情加重情况。

趋化性细胞因子与支气管哮喘气道内嗜酸粒细胞的募集与活化

支气管哮喘是一种以气道嗜酸粒细胞等炎症细胞浸润和气道高反应性为特征的慢性炎症性疾病,气道嗜酸粒细胞浸润是支气管哮喘最主要的病理特征。趋化性细胞因子具有对中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞的趋化和激活活性。本文就趋化性细胞因子的生物学特性及其在支气管哮喘气道内嗜酸粒细胞募集与活化中的作用作简单综述。

CD69与支气管哮喘

CD69是一种细胞早期活化标记物，以磷酸化的形式在细胞表面表达。CD69基因属于NK细胞信号传导基因复合体家族。哮喘患者气道中T细胞有CD69的表达，它在T细胞激活中起着共刺激作用，可促进T细胞分泌细胞因子而进一步活化与增殖；在细胞激活后，CD69通过对TGF-β生成与分泌的调节来激发T细胞的凋亡。嗜酸粒细胞（EOS）向气道迁移过程中在各种细胞及细胞因子作用下表达CD69，而应用抗CD69单抗进行抗体交联可诱导EOS的凋亡。CD69的诱导活化细胞凋亡功能为哮喘的治疗提供了新的思路。

Flt3／Flt3-配体与支气管哮喘

Flt3（fms-like tyrosine kinase-3）是Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族的成员之一，其配体Fit3-L是近年来日益受到重视的早期造血生长因子。近年来，越来越多的研究开始关注Fit3-L与支气管哮喘（简称哮喘）的关系，目前多数研究认为，Flt3-L可以抑制及逆转哮喘气道过敏性炎症及气道高反应性的发生，其作用的产生可能是通过树突状细胞及调节性T细胞介导。基于Flt3-L可能在哮喘治疗中起重大作用，现就Flt3／Flt3-L对哮喘的作用及相关机制作一综述。

Flt3/Flt3-配体与支气管哮喘

Flt3(fms-like tyrosine kinase-3)是Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族的成员之一,其配体Flt3-L是近年来日益受到重视的早期造血生长因子。近年来,越来越多的研究开始关注Flt3-L与支气管哮喘(简称哮喘)的关系,目前多数研究认为,Flt3-L可以抑制及逆转哮喘气道过敏性炎症及气道高反应性的发生,其作用的产生可能是通过树突状细胞及调节性T细胞介导。基于Flt3-L可能在哮喘治疗中起重大作用,现就Flt3/Flt3-L对哮喘的作用及相关机制作一综述。