高校实验动物伦理管理系统的开发与应用——以浙江大学为例

目前在实验动物领域开发应用的多数系统尚较少涉及实验动物使用过程中的伦理和福利管理,且大部分系统并不能完全满足当下高校实验动物伦理管理的要求。因此,基于高校实验动物伦理管理中实验项目种类庞杂、专业性要求高,基金申报量大、时效性要求强,以及动物伦理委员会组织构架庞杂、统筹工作难度大的特殊性,以浙江大学为实例,通过分析服务对象的环境和需求,聚焦高校实验动物伦理审批程序、批准后动物伦理监督和项目终结等环节,构建以数字化全流程监控为核心的动物伦理管理系统(AEMS系统)。AEMS系统包括对申请者开放功能的前台,对秘书、评审者与监督者开放功能的后台,以及链接上游实验人员培训系统与下游实验动物饲养管理系统的两个信息接口。通过随机发放调查问卷,从申报环节、审批环节、系统界面、系统稳定性、技术支持、运行效果6个维度,调查用户对AEMS系统自2020年运行至今的使用满意度,结果显示用户的总体满意度为94.31%,总体评分为4.48分。最后提出随着我国动物伦理学的不断发展,AEMS系统今后需要不断提升功能性与用户体验感,包括提高申请者提交申请效率和评委与申请者之间的沟通效率,加强伦理委员会内部交流,以及建立伦理审核标准和知识库等建议。

高校实验动物管理流程信息化探索:以浙江大学为例

实验动物饲养管理、生物安全风险评估和实验动物福利伦理审查是高校实验动物中心的核心工作。浙江大学实验动物中心在信息化管理体系框架的基础上,结合自身运行特点,对实验动物管理流程进行了信息化改革,实现了动物实验从项目审查、项目实施到项目终审的全流程信息化监管,提高了实验动物饲养管理效率,加强了生物安全和实验动物福利伦理监管力度,为高校实验动物的管理模式提供了新思路。

基因修饰小鼠实验室生物安全管理体系建设

随着《中华人民共和国生物安全法》的实施,实验室生物安全问题越来越受到关注。基因修饰小鼠实验室属于复杂、综合性实验室,在生物安全管理方面难度较大。现结合基因修饰小鼠实验室,分析基因修饰小鼠实验室在建设使用中存在的生物安全风险,介绍了实验室在生物安全管理体系建设中的实践经验,包括管理组织构架、制度建设、监督机制、人员培训等方面的内容,为高校同类型实验室安全管理提供借鉴和参考。

实验用比格犬腹壁脓肿引起的动物福利思考

比格犬是医学与生命科学研究工作中常用的实验动物之一。本文阐述一例比格犬异物导致腹壁脓肿的发生发展,引起的“关于实验结束后动物妥善安置和动物福利保障问题”的思考,以期给科研教学中应用实验动物的科研人员或学生以启发。

化学实验教材编写标准的探索

对化学实验教材编写标准进行了探索。编写化学实验教材应考虑两个问题:1注意全面提高学生的化学素质。提供学生丰富的化学实验知识,训练学生熟练的基本操作,培养学生良好的实验习惯和合乎逻辑的分析数据的能力。2突出实验教材的教学性。重视学生的认知和掌握技能规律,选择的基本技能训练要与实验内容很好地结合,基本操作和实验的方法要标准化,要考虑完成实验课程内容所需要的资源。

化学实验教学改革的探索与思考

文章对改革基础化学实验教学的必要性进行了分析，并结合基础化学实验教学实践，提出了改革基础化学实验教学的具体措施，通过对基础化学实验教学内容和教学方法改革，促进学生综合实验能力的提高，并对创新基础化学实验教学进行了深入思考。

适应药剂学发展 探索新的药剂学实验教学模式

文章介绍了药剂学实验教学模式的改革,从丰富实验教学内容,更新教学模式,建立有效的实验考核形式等方面介绍了具体的作法。

实验动物工作者中人兽共患病病原体感染的血清学检测

[目的 ]探讨实验动物饲养与应用人员人兽共患病病原体感染情况。 [方法 ] 2 0 0 0年、2 0 0 1年在杭州市 4家科研和教学单位 ,采集实验动物科学试验、饲养、行政后勤等人员血清 15 7份进行 4种人兽共患病病原抗体的检测。 [结果 ] 3份血清检出家鼠型肾综合征出血热病毒抗体 ,3份检出弓形虫抗体。 [结论 ]有必要对从事实验动物科研。

肝炎病毒感染导致肝细胞癌发生的免疫机制研究进展

肝炎病毒感染是肝细胞癌的主要致病因素之一。甲型肝炎病毒(HAV)通常引起急性感染,临床病理长期追踪结果显示HAV感染与肝细胞癌发生有一定联系。乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)的慢性感染可导致长期肝脏炎症和肝硬化,影响多条细胞凋亡和增殖相关信号通路,是病毒感染导致肝细胞癌的最常见诱因。HBV X蛋白(HBx)基因突变与肝细胞癌发病率密切相关,HCV核心蛋白的表达可导致肝细胞脂质积累,促进肿瘤发生。临床丁型肝炎病毒(HDV)感染常伴随HBV的共感染,从而增加慢性肝炎风险。戊型肝炎病毒(HEV)感染通常呈急性,近年HEV在器官移植和免疫缺陷患者中慢性感染增多。HEV慢性感染易导致肝硬化而增加肝细胞癌风险。本文概述了近年来肝炎病毒感染导致肝脏免疫应答异常和肝细胞癌发生的研究进展,以期有助于寻找病毒感染的早期检测、有效干预和疫苗接种的措施。

能耗监管体系在实验动物设施应用和节能措施评价

目的 监测实验动物设施能耗情况,评估节能措施的成效,为实验动物设施的能耗实时监测、管理以及节能措施提供参考.方法 应用节能监管体系对浙江大学实验动物设施的年度用电、用汽和供冷/热等能耗情况进行系统监测和分析.将实验动物设施单位面积能耗与同时期其他建筑进行比较分析,评定实验动物设施总体能耗水平.并对蒸汽系统改造由管道供汽改成自备电蒸汽锅炉供汽前后各6个月的能耗的情况进行比较分析.结果 实验动物设施年度用电、用汽和供冷/热等能耗分别为1.725 GWh、12244.90 GJ和1.497 GWh,分析总能耗可归结为用电和用汽两种,分别为2.783 GWh和12553.29 GJ.核算后监测期内实验动物设施单位面积能耗耗能量为其他建筑的8.52至21.88倍.蒸汽系统改造前后使用管道供汽和自备电蒸汽锅炉的能耗情况分别为9925.00 GJ和2651.57 GJ,节能效率高达73.3％.结论 节能监管体系能用于实时监测实验动物设施用电、用汽和供冷/热等能耗情况,可系统反映整体与局部的能耗情况,并可对节能改造措施进行成效分析.针对实验动物设施自备电蒸汽锅炉供汽方式从节能角度考虑明显优于管道集中供汽.

超疏水固体表面的制作及形成机理的探讨——介绍一个新实验

以三棕榈酸甘油酯为原料,采用熔融-凝结法制备超疏水表面,对其形成机理进行了研究。采用接触角测量、差示扫描量热和扫描电镜等技术,对超疏水表面的形成过程进行了跟踪、监测和分析。

高等院校实验动物的信息化管理体系建设及初步运行

针对高等院校实验动物管理的复杂现状,分析管理的关键要素,探索适合高校实验动物信息化管理体系,充分发挥信息化管理规范化、智能化等优势,为高校的教学和科研提供保障。

实验动物质量管理中的兽医监管

文章分析了实验动物使用过程中容易出现的问题,并结合兽医监管的实际工作,从实验动物现场接收、使用监督、饲养监管、“哨兵鼠”及环境检测方面对实验动物质量管理采取的措施进行阐述,以满足科研对实验动物质量的需求。

丹参多糖低分子量组分抗小鼠肝肾损伤及对其免疫保护作用机制的研究

为筛选体外抗氧化能力最强的丹参多糖组分,并研究其对小鼠抗肝肾损伤与免疫保护作用及机制,本研究通过分光光度法测定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-)·)、羟基自由基(·OH)清除能力及总还原力等评价丹参多糖不同分子量组分的体外抗氧化能力。结果显示相同的条件下,丹参多糖低分子量组分具有更强的体外抗氧化能力;将60只ICR小鼠分为对照组、模型组及丹参多糖低分子量组分低、中、高剂量给药组(75 mg/kg,150 mg/kg,300 mg/kg)共5组。除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)制备肝肾损伤及免疫抑制小鼠,给药组每日灌胃给药1次,共给药30 d。给药结束后称量小鼠体质量并剖杀各组小鼠,取肝脏、肾脏、脾脏及胸腺等脏器称重并计算脏器指数。利用血液生化仪测定小鼠肝肾功能主要生化指标(ALT、AST、TP、ALB、GLOB、T-BIL、UREA、CREA),采用分光光度法检测各组小鼠肝组织中抗氧化指标(SOD、MDA、CAT、GSH-Px)、采用流式细胞术检测小鼠血液中T细胞分型。结果显示,与对照组比,高剂量给药组小鼠能够抵抗CTX所致的体质量下降(P<0.05)。与模型组比,高剂量给药组小鼠肝脏和脾脏指数、血清AST及ALT、肝组织MDA含量极显著降低(P<0.01);血清CREA、肝组织SOD及GSH-Px活性、外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞亚群比例及CD4^(+)/CD8^(+)T细胞的比值极显著升高(P<0.01);胸腺指数、血清中TP、UREA及ALB含量、肝组织CAT活性显著升高(P<0.05);中剂量给药组小鼠肝脏指数及肝组织MDA含量极显著降低(P<0.01),ALT含量显著降低(P<0.05),血清TP含量显著升高(P<0.05);低剂量给药组小鼠肝脏指数显著降低(P<0.05)。以上结果表明丹参多糖低分子量组分(<10 ku)具有较高的体内外抗氧化能力,从而对CTX所致肝肾损伤及免疫抑制模型小鼠具有抗肝肾损伤及免疫保护作用。本研究为丹参水提醇沉药渣的资源化利用及丹参多糖在动物生产中的应用提供了参考依据。

小鼠生物净化技术平台的设计、运行及维护

利用小鼠生物净化技术将实验小鼠的微生物级别由低级别提升至高级别已成为实验动物研究机构必不可少的一项业务,同时也是保障实验小鼠质量的重要技术手段。目前国际通用的小鼠生物净化方案以体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transplantation,IVF-ET)技术为主。小鼠生物净化技术平台是一个综合性的实验室,涵盖了待净化小鼠饲养室、小鼠胚胎操作室、代孕小鼠饲养室、净化后小鼠饲养室等不同的功能区域。以浙江大学实验动物中心小鼠生物净化技术平台为例,分析小鼠生物净化技术平台的设计要点和运行模式,并从小鼠微生物质量控制、环境卫生控制和仪器设备维护方面讨论平台的维护,以期给同类型技术平台建设提供参考。

以18S rRNA为内参照的多重RT-PCR检测3种百合病毒

本研究对多重PCR体系各成分和循环参数进行了摸索和优化,建立了以18S rRNA为内参照的同时检测3种百合病毒的多重RT-PCR体系,所检测的3种病毒是黄瓜花叶病毒(CMV)、百合斑驳病毒(LMoV)和百合无症病毒(LSV)。它们为侵染我国百合的主要病毒。在RT反应体系中加入3种病毒和18S rRNA的特异性反向引物的混合物,使反应体系中各反向引物终浓度均为0.5μmol/L,反转录酶(AMV)反转录合成各病毒和18S rRNA的互补第一链cDNAs。多重RT-PCR条件实验显示:将标准RT-PCR体系中的TaqHS DNA聚合酶量改为0.100 U/μL,Mg2+浓度改为4.0 mmol/L,各引物浓度选择0.2μmol/L,那么25个循环反应以上就能在一个反应管中以18S rRNA为内参照同时检测百合中的3种常见病毒。用该体系检测了10个百合样品,同时与32P同位素标记膜杂交检测作对照,结果显示,该检测体系检测灵敏度更高。

野菊花提取物对KKAy糖尿病小鼠高血糖、高血脂和血醛糖还原酶的影响

目的观察野菊花提取物对糖尿病KKAy小鼠血糖和血脂水平的影响,及对醛糖还原酶(AR)的抑制作用。方法 8周龄雄性KKAy小鼠,根据初始空腹血糖随机分为模型组、野菊花提取物20和100 mg·kg^(-1)组及格列美脲0.4 mg·kg^(-1)组,以雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组,每天ig给药1次,连续7周。每周测量小鼠体质量和摄食量,实验结束前测定空腹血糖并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)。末次给药后禁食过夜,处死小鼠,取血清进行生化检测,ELISA测定血清中胰岛素、瘦素和AR水平,解剖取肝、肾、脾、睾周脂肪和肾周脂肪,测定脏器系数并进行常规病理组织学检查。实时PCR测定肾组织匀浆中AR m RNA表达。结果与模型组比较,野菊花提取物100 mg·kg^(-1)组小鼠摄食量明显减少(P<0.01),空腹血糖明显降低(P<0.05);OGTT结果表明野菊花提取物可显著抑制葡萄糖吸收(P<0.01),血清谷丙转氨酶、葡萄糖、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素、瘦素和AR水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。组织病理学观察显示,模型组小鼠肝、肾、脂肪、胰腺和脾组织出现不同程度病变,野菊花提取物可抑制糖尿病引起的组织病理变化;同时可降低肾组织AR m RNA表达。结论野菊花提取物对KKAy小鼠有降血糖和血脂的作用,并能保护因糖尿病引起的肾、肝、脂肪、胰腺和脾损伤,其对肾的保护作用与降低肾组织AR m RNA表达从而抑制AR作用有关。

两品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展和比较

目的了解断奶后Zmu-1：DHP和DHP两个品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展规律。方法首先进行3周龄两品系豚鼠屈光检测,然后选择Zmu-1：DHP品系豚鼠12只,DHP品系8只,按品系分成两组。在4~12周龄,每隔一周检测屈光度、眼轴长和角膜曲率等参数。结果 3周龄,327只Zmu-1：DHP品系豚鼠,屈光度为-5.19±3.92 D,近视率达85.1%;而117只DHP品系豚鼠屈光度为2.13±4.40 D,近视率仅为22.6%。4~12周龄,Zmu-1：DHP品系豚鼠近视不断加深,屈光参差〉1.5 D;DHP品系豚鼠屈光发育稳定。t-检验,Zmu-1：DHP品系豚鼠眼轴长度、玻璃体腔深度显著高于DHP品系,视力低于DHP品系。多因素方差分析,Zmu-1：DHP品系豚鼠散光随时间变化显著（P〈0.01）,而DHP品系不显著（P=0.07）。相关性分析,Zmu-1：DHP品系豚鼠屈光状态与眼轴长相关系数为-0.79（P〈0.01）、与玻璃体腔深度相关系数为-0.75（P〈0.01）;而DHP品系相应相关系数为-0.19（P=0.09）和-0.34（P〈0.01）。结论 Zmu-1：DHP品系豚鼠近视高发,正视化过程难以完成,其近视与眼轴长度和玻璃体腔深度高度相关。

全反式维A酸给药4周对大鼠的毒性作用

目的观察全反式维A酸(ATRA)重复给药4周对大鼠的毒性反应,初步确定其主要毒性靶器官及毒性反应性质和程度。方法 SD大鼠ig给予ATRA 10,50和250 mg.kg-1,每日1次,连续4周,每日观察大鼠的一般状况和死亡情况,每周记录体质量和摄食量。停药第1天和第15天分别处死部分大鼠,进行血常规、血液生化和凝血功能检测,测定主要脏器的脏器系数并进行常规病理组织学检查。结果 与溶剂对照组相比,ATRA 250 mg.kg-1组给药14 d后,大鼠出现竖毛、自主活动减少、四肢乏力、眼睑部脱毛出血和呼吸急促等症状,给药18 d后大鼠出现死亡,体质量在给药7 d后随给药时间延长逐渐减轻(P<0.01),同时摄食量随给药时间延长逐渐减少(P<0.05)。停药后第1天,与溶剂对照组比较,ATRA250 mg.kg-1组总蛋白、白蛋白、总胆红素和肌酐明显下降,球蛋白、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶和甘油三酯明显上升(P<0.01),同时血糖升高,肌酸肌酶显著降低(P<0.05);中性粒细胞、单核细胞和网织红细胞明显增加,嗜酸性粒细胞、红细胞、血红蛋白浓度、红细胞压积和血小板数明显降低(P<0.01);血浆凝血酶原时间和国际标准化比值明显延长,凝血酶时间明显减少(P<0.05);心、肝、脾、肺、肾和肾上腺系数较溶剂对照组明显升高,胸腺系数明显降低(P<0.01)。ATRA组组织病理改变主要为肝细胞水肿,十二指肠上皮变性、坏死,脾巨核细胞增多。停药后第15天,ATRA组的毒性反应症状有所恢复。结论 ATRA250 mg.kg-1能造成大鼠血小板减少和贫血,同时存在一定的粒系增生和骨髓抑制现象,对大鼠肝和生殖系统有损伤。

Zmu-1:DHP近交系豚鼠的培育及其分子遗传结构初步鉴定

目的培育近交系豚鼠品系,建立检测豚鼠遗传结构的微卫星分子标记。方法采取近交与回交、单线与优选繁育、选择与淘汰等方法,试图将Zmu-1:DHP远交系豚鼠培育成Zmu-1:DHP近交系豚鼠。用15对已筛选出的豚鼠多态性微卫星引物(另行报道),对该近交系及参照的Zmu-1:DHP远交系和Zmu-2:DHP近交系豚鼠DNA样本进行PCR,通过产物电泳条带分析相关品系的遗传结构,评价各品系遗传纯合性。同样方法研究Zmu-1:DHP近交系各支系豚鼠的遗传结构,评价各支系的遗传纯合性。结果经过13年培育,获得8个20代以上的近交豚鼠支系(窝),每个支系分别有1-3只。经鉴定,Zmu-1:DHP近交2系的基因频率达到86.7%,分别高于Zmu-1:DHP远交系的6.7%及Zmu-2:DHP近交系的66.7%;其位点平均基因数为1.13个,分别低于Zmu-1:DHP远交系的2.47个及Zmu-2:DHP近交系的1.33个;Zmu-1:DHP近交系基因型频率也高于其他品系。Zmu-1:DHP近交系的基因类型均包含在Zmu-1:DHP远交系的基因内,但缺少Zmu-2:DHP近交系所携带的2个特征基因。Zmu-1:DHP近交系8个支系的基因纯合率各不相等,第2、8支系基因纯合率较高。结论 Zmu-1:DHP近交系与Zmu-1:DHP远交系之间既有同源性,又有特异性,Zmu-1:DHP近交系第2支系基本培育成新的近交系豚鼠,多个近交支系的形成有利于筛选具优势性状的支系。Zmu-2:DHP黑色近交系携带白色品系未有的微卫星标记,可能携有与毛色性状关联的优越性状基因。