乙酰水杨酸对采后玉露桃果实成熟衰老进程和乙烯生物合成的影响

20℃下用1.0mmol/L(pH3.5)的乙酰水杨酸(ASA)处理玉露桃Prunuspersica(L.)Batsch果实,分析其对果实成熟衰老相关因子的影响。结果表明,随着果实成熟衰老,LOX活性、超氧自由基()生成速率、ACC合成酶、ACC氧化酶活性和乙烯释放均呈峰形变化,果实硬度迅速下降,组织电导率持续上升;ASA处理显著抑制了峰前相应的LOX、ACC合成酶和ACC氧化酶活性变化以及乙烯释放,维持了较高的果实硬度和细胞膜的完整性,延缓了果实的成熟衰老。

桃新品系‘北仑02-1’的主要生物学特征及其遗传鉴别

‘北仑02-1’是在浙江省宁波市北仑区白峰镇一桃园中发现的大果型早熟水蜜桃变异株系。为了鉴别这个株系,对它的主要物候期和果实品质特性进行研究,并用分子标记技术比较‘北仑02-1’与当地栽培品种‘早红宝石’、‘大团蜜露’、‘湖景蜜露’、‘玉露’、‘迟玉露’、‘大玉白凤’遗传特征的异同。结果表明:‘北仑02-1’在当地的成熟期为6月20日左右,果型较大,平均单果质量达196g,果顶红色鲜艳,品质优良。SSR标记分析结果发现‘北仑02-1’不同于‘湖景蜜露’、‘大团蜜露’和‘玉露’,位于桃第6连锁群的SSR标记pchcms5可用于区分‘北仑02-1’和‘湖景蜜露’。所用的24对AFLP引物组合中,有3对可以分辨‘北仑02-1’和‘湖景蜜露’。研究表明‘北仑02-1’与当地栽培品种存在遗传差异,可能是变异新株系。

改良CTAB法用于多年生植物组织基因组DNA的大量提取

根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中β 巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点:(1)获得的DNA质量良好,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰;(2)用获得的DNA进行Southern杂交,可得到理想的杂交信号,可满足相关的分子研究要求;(3)操作简便。

猕猴桃和桃果实脂氧合酶活性测定方法的建立

以猕猴桃、桃成熟果实为试材,建立了一个测定果实组织中的脂氧合酶(LOX)活性的分光光度法检测体系,以亚麻酸为底物的LOX活性测定反应体系的最适pH分别是5.0～5.5和6.0;应用该技术体系检测不同处理对成熟果实组织中的LOX活性影响,得到了满意的结果。

桃果实中花青苷的提取、检测及应用

采用0.05%盐酸-甲醇提取液4℃浸取组织24h,可以高效提取桃果实果皮中的花青苷,方法回收率可达94.37%;采用梯度洗脱HPLC法,可以对花青苷进行定性、定量分析,该体系检测限(S/N=3)为0.2μg/g,RSD(n=5)为2.94%,峰面积与浓度在0.0625～0.2500mg/mL范围内线性关系达到极显著水平(r=0.997)。方法简便易行,可用于桃果实等材料的花青苷水平变化分析。

枇杷果实采后质地的变化与调控

以枇杷果实为材料,通过1-甲基环丙烯(1-MCP)和温度处理,探索其对采后枇杷果实衰老过程质地的影响。结果表明,枇杷果实采后在20℃贮藏过程中,脂氧合酶(LOX)活性、超氧自由基(O·2)积累和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均呈峰型变化,果肉组织相对电导率持续增加,果实硬度趋于增大,果肉渐趋粗糙少汁,具有组织木质化的特征。1-MCP可以显著抑制PAL和LOX活性,减缓O·2生成,延缓组织衰老进程和硬度的增加。1℃低温贮藏可以有效延缓果实的衰老进程,但会导致果实出现冷害,其典型症状也表现出了组织木质化。采后枇杷果实衰老过程中的硬度增加与冷害胁迫下的果实组织木质化具有相似的基本特征,但其内在机制可能不同。

乙酰水杨酸调控猕猴桃果实后熟软化进程中的Ad-EXP1基因表达

以布鲁诺猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Bruno)成熟果实为材料,根据植物α-expansin(EXP)基因的氨基酸保守序列设计简并引物,利用RT-PCR方法结合3’RACE扩增得到1个长为957bp的cDNA片段(Ad-EXP1)。该基因片段编码211个氨基酸,与其它植物该基因核苷酸同源性为59%～85%,氨基酸同源性为73%～91%。Northern杂交结果表明,Ad-EXP1基因在采收当天的果实中表达很弱,随着果实成熟衰老进程加快趋于增强;乙酰水杨酸(ASA)处理延缓果实后熟软化和乙烯生成,也显著抑制Ad-EXP1基因表达。鉴于Ad-EXP1表达丰度与乙烯生成、果实软化程度的一致性,推测该基因在猕猴桃果实后熟软化进程中起着重要作用。

脂氧合酶基因家族成员与果实成熟衰老研究进展

综述了LOX在果实成熟衰老进程中的最新研究进展,主要包括LOX与乙烯合成、果实软化、香气物质合成以及LOX基因家族成员的表达和功能研究。

猕猴桃果实采后成熟过程中糖代谢及其调节

20℃下采后猕猴桃果实中淀粉酶活性快速上升于果实软化启动阶段,随着果实进入快速软化阶段,淀粉迅速水解,葡萄糖和果糖快速积累,SPS活性增加,酸性转化酶活性下降,蔗糖积累;至果实软化后期,SPS活性降低,蔗糖含量下降。AsA和低温可抑制淀粉酶活性、己糖积累、SPS活性上升和酸性转化酶活性下降,延缓蔗糖积累,相反,乙烯则可促进淀粉酶活性,加速淀粉降解和己糖积累进而直接或间接增加SPS活性,促使蔗糖积累。采后猕猴桃果实的SPS活性变化中有己糖激活效应和蔗糖反馈抑制效应。AsA、低温和乙烯等对糖代谢的调节主要是通过对SPS活性的影响而实现的。

用于多基因表达检测的猕猴桃macroarray阵列

基因阵列是开展高通量功能基因组学研究的有效手段之一。对适用于多年生果树猕猴桃的macroarray阵列进行了探索,构建了含有42个基因的macroarray阵列,与α-32P标记的cDNA探针杂交产生清晰信号,有效分辨了不同基因或基因家族不同成员的表达差异。DNase处理可去除基因组DNA污染,提高结果准确性。

乙烯信号转导与果实成熟衰老的研究进展

综述了乙烯信号转导途径各级别元件及其编码基因在果实成熟衰老中的研究进展,主要包括相关基因家族成员及其表达调控、成熟衰老相关乙烯信号转导途径元件的鉴别与功能分析、乙烯信号转导在果实成熟衰老进程中的调控机制等,并提出了乙烯信号转导的研究重点与方向。