浙江省农业植物检疫性有害生物的发生现状与对策

浙江省是我国农业植物检疫性有害生物入侵风险较高的省份之一,了解入侵物种的分布与扩散趋势,对于有效预防植物检疫性有害生物并制定合理的控制措施都有着非常重要的意义。本文基于农业农村部公布的2012-2023年全国特别是浙江省农业植物检疫性有害生物的分布行政区数据,聚焦浙江省现有的农业植物检疫性有害生物;根据不同时间的发生及其在全国的占比数据分析,总结了其变化趋势,探讨了其快速扩散的原因,并提出了相关的防控对策。

甘薯抗茎腐病鉴定技术的建立及种质资源抗性分析

为优化甘薯种质抗茎腐病鉴定技术,通过分析不同的接种方法和菌液浓度对甘薯种质抗性的影响,建立甘薯抗茎腐病鉴定标准,为甘薯抗病育种奠定基础。利用组培瓶蛭石薯苗擦伤接菌法和最佳接种菌液浓度(1.1×10^(7)CFU·mL^(-1)),对最具代表性的6个甘薯品种进行接种鉴定,并与田间抗性品种比较进行验证,室内接种抗性鉴定结果与田间抗性表现基本一致,表明新抗性鉴定技术的鉴定结果具有准确性、可靠性。进一步对65个甘薯材料进行抗病鉴定,发现绝大部分材料表现为感病或中感,7份种质(YD7002、DY7082-1、浙紫薯1号、TF1118、DY7032、南薯88和浙紫薯4号)对甘薯茎腐病具有稳定抗性。文章建立了甘薯抗茎腐病的新鉴定技术,鉴定和筛选出对甘薯茎腐病表现稳定抗性的种质,为甘薯抗茎腐病育种提供重要的种质资源,对于甘薯病害防控具有重要意义。

草莓茎基腐病病原菌鉴定、致病力分析及防治药剂筛选

浙江是中国草莓主要种植区。为明确引起浙江省建德市草莓茎基腐病的病原菌,筛选有效防治药剂,本研究从浙江省建德草莓基地采集具有草莓茎基腐病典型症状的样本,进行病原菌分离鉴定,并对病原物的生物学特性、寄主范围和防治药剂展开研究。结果显示,从茎基部病健交界处分离出形态一致的黄色、圆形、粘稠状、透明锃亮,散发刺激性气味的菌落,经形态学、分子生物学和生理生化特性鉴定,确定该病原菌为菠萝泛菌(Pantoea ananatis)。该病原菌适合在中性及偏碱性环境生长,最适生长pH值为8,最适生长盐浓度为1%~5%,最适生长温度为28℃。经寄主致病性测定发现,P.ananatis草莓致病菌株还能够侵染番茄、辣椒、西瓜和水稻,但对白菜、西兰花和豆角没有致病性,且与P.ananatis水稻致病菌株的致病性有明显差异。室内防治药剂筛选发现在20种供试药剂中有4种对P.ananatis具有抑菌效果,其中50%福美双可湿性粉剂抑菌效果最好,抑制中浓度(EC_(50))值为20.8057 mg·L^(-1),可作为防治草莓茎基腐病的主选药剂。研究结果为后续草莓茎基腐病有效防治提供了理论依据,同时为研究P.ananatis的致病机理提供了参考。

利用菊花B病毒外壳蛋白特异片段进行多克隆抗体的制备与分析

菊花B病毒(CVB)是乙型线状病毒科(Betaflexiviridae)麝香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)成员,在浙江杭白菊基地普遍存在。为了能够特异、快速、简便检测CVB,利用SWISS-MODEL分析CVB外壳蛋白(CP)的三维结构,选择暴露在CVB CP三维空间结构外部的片段,片段之间使用连接肽串联以提高柔性,重复4个片段,根据大肠杆菌密码子的偏爱性将其相应的DNA序列进行优化,将合成的特异DNA序列连接表达载体pET-28a(+),转化至Escherichia coli BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导和Ni-NTA重力柱层析获得了纯化后大小约为14 kDa的融合蛋白;将其作为抗原免疫家兔制备抗血清,纯化获得相应抗体;对获得的抗血清和抗体进行酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白免疫印迹(WB)检测。间接ELISA检测结果表明,512000倍稀释的抗血清可检测到1μg抗原。纯化后最终得到浓度为15 mg·mL的抗体,WB检测结果,1∶1000稀释后的抗体可检测500 pg抗原,且能够特异性结合CVB CP蛋白。本研究制备的多克隆抗体为检测CVB提供了便利,也为后续CVB检测试纸条的开发提供了技术支撑。