白藜芦醇抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖的实验研究

目的观察白藜芦醇对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠心脏成纤维细胞（cFs）增殖的影响及其机制。方法差速贴壁法培养新生大鼠cFs，在体外建立AngⅡ诱导的cFs增殖模型。采用MTT法检测细胞增殖，分别观察一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）、鸟苷酸环化酶抑制剂（ODQ）及白藜芦醇对AngⅡ诱导的cFs增殖的影响；采用心钠素（ANP）及脑钠素（BNP）mRNA表达检测细胞肥厚反应；放免法及ELISA法测细胞培养液中ANP及BNP水平；RT-PCR方法检测ANP、BNPmRNA表达；硝酸还原酶法测细胞培养液中一氧化氮（NO）水平；化学比色法测细胞上清液中一氧化氮合酶（NOS）水平；放免法测定细胞内环磷酸鸟苷（cGMP）水平。结果白藜芦醇25-100μmol／L呈时间及剂量依赖性抑制AngⅡ诱导的cFs增殖，但这种作用可被L-NAME及ODQ部分阻断。白藜芦醇作用细胞后NO、cGMP水平升高，ANP、BNP水平降低，ANP、BNPmRNA的表达下降。结论白藜芦醇在一定浓度范围对AngⅡ诱导的cFs增殖及细胞肥厚有抑制作用。上调NO-cGMP信号通路可能是其发挥作用的途径之一。

大黄素对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察大黄素对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及机制。方法：斑贴法培养大鼠主动脉VSMC,AngⅡ刺激VSMC建立细胞增殖模型。采用MTT法检测细胞增殖,观察大黄素（10,20,40,80μmol.L-1）、亚硝基-精氨酸甲酯（L-NAME,100μmol.L-1）对AngⅡ诱导VSMC增殖的影响。免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达;硝酸还原酶及化学比色法测细胞上清液中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平。半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测VSMC iNOS mRNA的表达。结果：大黄素在10~80μmol.L-1呈剂量及时间依赖性抑制VSMC增殖,但可被100μmol.L-1的L-NAME部分抵消;大黄素能减少PCNA阳性细胞表达,升高NO,NOS,iNOS水平,增加iNOS mRNA的表达。结论：大黄素对AngⅡ诱导的VSMC增殖有抑制作用,抑制VSMC PCNA的表达,上调iNOS基因表达,升高NO水平可能是其发挥作用的机制。