B细胞非霍奇金淋巴瘤IgH基因重排检测及凝胶扫描技术应用的初步研究

目的 采用凝胶扫描技术 ,力求对采用聚合酶链反应 (PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)抗原受体基因重排结果分析时建立量化标准 ,以利于临床医师应用时客观判断 ,并为其筛选随访病例提供依据。方法 用PCR对 96例B NHL分别采用IgHFR3A及FR2A检测IgH基因克隆性重排。 6 5例经IgHFR3APCR已证实为IgH基因克隆性重排B NHL及 8例良性病变淋巴组织和 5例正常人外周血单核细胞 ,IgHFR3APCR产物 8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染后图像行凝胶扫描 ,绘制曲线并计算h1/h2比值。结果 (1)采用FR3A引物 ,克隆性IgH基因重排在 96例B NHL中检测率为 6 8% ,采用FR2A引物 ,检测率为 6 1% ,结合FR3A、FR2A引物 ,总检测率为 83%。 (2 )凝胶扫描曲线示 6 5例B NHL的h1/h2均〉3,而 5例正常人外周血单核细胞曲线均表现为钟型 ,8例良性病变淋巴组织h1/h2比值均 <1 5。结论 非霍奇金淋巴瘤抗原受体基因重排检测的凝胶扫描分析曲线中 ,h1/h2峰高比值至少 >3可提示为IgH基因克隆性重排 ,<1 5可能提示IgH基因多克隆重排。比值介于 1 5和 3之间 ,提示有随访意义。联合FR3A ,FR2A引物 ,可提高B NHLIgH基因克隆性重排的检测率。