EB病毒血清学联合DNA定量检测在诊断婴儿传染性单核细胞增多症中的意义

目的评估EB病毒抗体VCA-IgM、VCA-IgG、EA-IgG、EBNA-IgG及EBV-DNA载量检测在婴儿传染性单核细胞增多症(IM)中的诊断意义。方法用ELISA法检测78例IM患儿血清中EBV四种抗体及PCR荧光定量法检测外周血单个核细胞EBV-DNA载量。结果在IM急性期VCA-IgM阳性率在<1岁患儿中为27.8%,而≥4岁组患儿中为83.3%。有近20%<1岁患儿所有EBV抗体均阴性,需重复做抗体测定。EBV-DNA载量检测总阳性率为70.5%,<1岁患儿中阳性率为61.1%,<1岁组患儿中有5例,在1岁组患儿中3例早期检测VCA-IgM抗体是阴性,而EBV-DNA载体是阳性的,但在后来的VCA-IgG检测均是阳性的。结论在婴儿期IM急性阶段,只用血清学方法来诊断不够灵敏,建议在VCA-IgM阴性的患儿中联合EBV-DNA载量检测,以提高婴幼儿IM临床诊断的敏感性。

血清糖皮质激素受体在难治性肺炎支原体肺炎患儿中的变化及临床意义

目的通过检测难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）患儿血清GRα及GRβ蛋白表达水平的变化，为临床合理应用糖皮质激素（GC）提供理论依据。方法2014年1月～2015年5月在笔者医院儿内科住院的226例年龄在3～12岁肺炎患儿，按临床症状和实验室检查分为肺炎组和肺炎支原体肺炎（MPP）组，采用ELISA法检测血清GRα及GRβ蛋白表达水平；同时对MPP组按照诊断标准分为普通MPP组和RMPP组，观察两组血清GRα及GRβ水平变化。结果MPP组血清GRα水平（19．73±5．05ng／ml）明显高于肺炎组（11．76±3．46ng／ml）和对照组（9．41±3．31ng／ml）（P〈0．01），后两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；GRβ水平在MPP组（9．40±2．37ng／ml）和肺炎组（9．67±2．13ng／ml）则明显高于对照组（7．71±1．98ng／ml）（P〈0．01），而前两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；MPP组GRα/GRβ比值（2．29±0．94）明显高于肺炎组（1．31±0．57）和对照组（1．36±0．73）（P〈0．01），而后两组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）；RMPP患儿中血清GRa水平和GRα/GRβ比值显著高于普通MPP组（24．49±3．16ng／mlvs16．49±3．17ng／ml，P〈0．01；9．58±2．49vs2．90±0．99，P〈0．01），GRβ水平（9．13±3．19ng／mlvs9．58±2．49ng／ml，P〉0．05）两组差异无统计学意义。结论在MPP和RMPP中存在着GRα的优势表达，GRα／GRβ比值增大，尤其在RMPP中表现更为明显。

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿血清糖皮质激素受体水平变化及意义

目的通过检测RSV毛细支气管炎患儿血清GRα、GRβ水平,探讨GR亚型表达对RSV毛细支气管炎严重程度的影响。方法采用ELISA法测定和比较不同程度RSV毛细支气管炎组(轻度42例,重度24例)和对照组(48例)患儿血清中GRα、GRβ水平变化,同时对RSV毛细支气管炎严重程度与GRα/GRβ比值之间进行相关性分析。结果与对照组比较,轻度和重度RSV毛细支气管炎组血清GRα、GRβ水平均显著升高(P <0. 01);与轻度组比较,重度RSV毛细支气管炎组血清GRα、GRβ水平显著升高(P <0. 01); GRα/GRβ比值在重度组显著低于轻度组和对照组(P均<0. 01),后两组比较差异无统计学意义。通过相关分析发现,RSV毛细支气管炎严重程度与GRα/GRβ比值之间呈显著负相关(r=-0. 588,t=5. 816,P <0. 05)。结论 RSV毛细支气管炎患儿表现为血清GRα、GRβ水平的高表达,在重度患儿中表现更为明显; GRα/GRβ比值则在重度RSV毛细支气管炎中明显降低,而且RSV毛细支气管炎严重程度与GRα/GRβ比值之间呈显著负相关。

血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体在儿童下呼吸道感染中的表达及临床意义

目的通过检测血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)表达水平变化,观察其对儿童下呼吸道感染(LTRIs)严重程度的评估价值。方法对162例LTRIs患儿(支气管肺炎84例,支气管炎78例)和88例对照组进行研究。研究对象入院后次日早晨空腹抽取静脉血4ml提取血清待测。采用ELISA法检测血清中suPAR水平,乳胶免疫比浊法检测血清CRP水平,循环增强荧光免疫法检测血清PCT水平。结果 LTRIs组血清suPAR、PCT、CRP水平明显高于对照组(P<0.01)。重度肺炎组患儿血清suPAR、CRP、PCT水平均高于轻度肺炎和支气管炎组患儿(P<0.01)。与支气管炎组比较,轻度肺炎组患儿血清suPAR水平显著升高(P<0.05),而血清CRP、PCT水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清su-PAR、PCT和CRP预测肺炎患儿严重度的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)分别为0.962、0.837和0.703。结论 suPAR可以有效地反映儿童LTRIs的炎性反应状态,对肺炎预测的敏感度和重度肺炎的预测作用优于CRP和PCT。

特应性体质对毛细支气管炎患儿血清糖皮质激素受体水平的影响

目的探讨特应性体质(简称特应质)对毛细支气管炎(简称毛支)患儿糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法采用ELISA法测定和比较毛支组(77例,包括34例特应质患儿)和肺炎组(68例)患儿血清中GRα、GRβ水平的变化。38例同期住院的非感染性小儿外科术前患儿,且无特应性及过敏性疾病家族史的患儿作为对照组。结果与对照组比较,毛支组和肺炎组中血清GRα、GRβ水平均明显升高(P<0.01);毛支组血清GRα、GRβ水平高于肺炎组(P<0.01)。毛支组GRα/GRβ比值较对照组和肺炎组明显升高(P<0.01)。毛支组特应质和非特应质患儿血清GRα、GRβ水平与对照组比较均明显升高(P<0.01);毛支组非特应质患儿GRβ水平明显高于特应质患儿(P<0.01);毛支组特应质患儿GRα/GRβ比值较对照组和毛支组非特应质患儿明显升高(P<0.01)。结论毛支患儿血清GRα、GRβ表达水平增强;特应质毛支患儿表现为GRα/GRβ比值增加,提示特应质毛支患儿对糖皮质激素有较高的敏感性。

毛细支气管炎患儿血清肺表面活性蛋白A和D的检测及临床意义

目的探讨血清肺表面活性蛋白A(SP-A)和D(SP-D)在不同程度毛细支气管炎患儿中的变化及其临床意义。方法将70例毛细支气管炎患儿依据临床症状分为毛细支气管炎急性期组(42例)和恢复期组(28例),另选取26例同期因非感染性疾病住院的小儿外科术前患儿为对照组;同时依据症状严重程度将急性期毛细支气管炎患儿分为重症组(12例)和轻症组(30例)。采用竞争性ELISA法定量测定各组血清SP-A和SP-D水平变化。结果毛细支气管炎急性期组患儿血清SP-A和SP-D水平显著高于恢复期组和对照组(均P<0.01),且恢复期组与对照组比较,血清SP-A和SP-D仍维持在较高水平(P<0.01);重症组患儿血清SP-A和SP-D水平明显高于轻症组(P<0.01)。结论毛细支气管炎患儿急性期血清SP-A和SP-D水平明显增高,且随病情加重而增高;临床症状缓解后,血清SP-A和SP-D水平仍然维持在较高水平。

鼻咽吸出物IL-4、IL-12和IFN-γ在婴幼儿喘息中的变化及意义

目的通过测定婴幼儿喘息患儿鼻咽吸出物中细胞因子IL-4、IL-12和IFN-γ的水平变化,探讨婴幼儿喘息与机体细胞因子反应类型的关系。方法应用固相夹心ELISA法测定和比较58例婴幼儿喘息和47例无喘息的婴幼儿肺炎鼻咽吸出物IL-4、IL-12和IFN-γ水平变化,同时对急性期和恢复期婴幼儿喘息鼻咽吸出物IL-4、IL-12和IFN-γ水平进行测定和比较。结果与婴幼儿肺炎组[(275.11±30.27)ng/L]、对照组[(253.76±39.9)ng/L]和婴幼儿喘息恢复期组[(260.88±28.07)ng/L]比较,鼻咽吸出物IFN-γ水平在婴幼儿喘息组急性期[(142.55±26.56)ng/L]明显下降(P<0.01),而IL-4水平[分别为(8.51±2.02)ng/L,(3.14±1.16)ng/L,(4.95±1.93)ng/L,(3.28±1.36)ng/L)]和IL-4/IFN-γ(分别为0.068±0.044,0.012±0.004,0.019±0.007,0.014±0.005)比值则明显升高(P<0.05);IL-12在婴幼儿喘息急性期组[(587.24±58.14)ng/L]明显低于肺炎组[(1 322.13±139.74)ng/L](P<0.01),与恢复期组[(580.77±64.32)]ng/L和对照组[(604.02±88.38)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论婴幼儿喘息急性期局部主要表现为Th2型细胞免疫反应,鼻咽吸出物IL-4产生明显增加,IFN-γ水平则明显下降,而IL-12在婴幼儿肺炎中产生增加。

糖皮质激素受体α、β mRNA在婴幼儿喘息患儿中的表达及临床意义

目的研究婴幼儿喘息患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)αmRNA和GRβmRNA表达水平的变化,为选择性应用糖皮质激素(glucocorticoid,GC)和早期干预提供实验依据。方法选取2015年9月-2018年1月绍兴市人民医院儿内科住院的50例婴幼儿喘息(重症19例)和25例对照组进行研究。研究对象入院后次日晨空腹抽取静脉血2 mL,采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PBMC中GRαmRNA和GRβmRNA表达量。结果婴幼儿喘息重度组GRαmRNA表达量显著高于对照组(中位数2.870×10^-2 vs. 0.266×10^-2,U=2.204,P=0.028),与轻度组(中位数0.865×10^-2)比较差异无统计学意义(U=0.650,P=0.516);重度组GRβmRNA表达量(中位数0.057×10^-2)显著高于轻度组和对照组(中位数0.003×10^-2、0.001×10^-2),差异有统计学意义(U=3.388,P<0.001;U=3.969,P<0.001);重度组GRα/β比值(中位数25.900×10^-2)显著低于轻度组和对照组(中位数780.800×10^-2,U=2.708,P=0.007;98.000×10^-2,U=2.192,P=0.028),恢复期GRα/β比值(中位数253.500×10^-2)较急性期(中位数51.100×10^-2)显著升高(U=2.084,P=0.037)。临床症状严重度评分与GRβmRNA之间存在显著正相关(r=0.762,P=0.029),与GRα/β比值之间存在显著负相关(r=-0.760,P=0.037)。结论重度婴幼儿喘息主要表现为GRβmRNA表达量增加,GRα/β比值降低。随着临床症状评分的升高,GRβmRNA表达量增加,GRα/β比值下降。

HLAⅡ基因多态性与肺炎支原体肺炎的易感性分析

目的：探讨肺炎支原体肺炎（ MPP）患儿与人类白细胞抗原（ HLA）Ⅱ类（ HLA-DQA1、HLA-DRB1）等位基因的相关性及连锁不平衡,寻找与MPP发病有关的易感基因/或保护基因,进一步研究MPP发病机制,从而为从基因水平治疗MPP的方法提供理论依据。方法利用序列特异性聚合酶链反应（ SSP-PCR）对本院60例确诊的MPP患儿和30例健康儿童进行HLA-DQA1、HLA-DRB1等位基因以及有关基因亚型分析,比较组间基因频率、单倍型频率、连锁不平衡及疾病相关性分析。结果 MPP患儿 HLA-DQA1＊0201/＊0301的频率分别增高到35.83%/30.00%,与正常儿童的16.67%/8.33%的频率相比,差异具有统计学意义（χ2=12.139,P〈0.05,OR=5.059；χ2=15.142,P〈0.05,OR=7.500）；MPP患儿HLA-DQA1＊0401的频率为12.50%,与正常儿童的40.00%的频率相比,差异具有统计学意义（χ2=24.638,P〈0.05,OR=0.083）；MPP患儿HLA-DRB1＊07/＊15的频率分别增高到38.33%/30.00%,与正常儿童的20.00%/16.67%的频率相比,差异具有统计学意义（χ2=11.735,P〈0.05,OR=4.929；χ2=5.692,P〈0.05,OR=3.000）；MPP患儿HLA-DRB1＊11的频率为15.00%,与正常儿童的43.33%的频率相比,差异具有统计学意义（χ2=19.448, P〈0.05, OR=0.087）。结论 HLA-DQA1＊0201/＊0301基因可能是儿童MPP患儿的易感因素；HLA-DQA1＊0401可能对儿童MPP的发病具有保护作用；HLA-DRB1＊07/＊15基因可能是 MPP 患儿的易感因素, HLA-DRB1＊11可能对儿童MPP的发病具有保护作用。 HLA-DQA1与HLA-DRB1等位基因之间不存在广泛的连锁不平衡。