免疫刺激影响人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物介导的孤独症谱系障碍的机制研究

目的探究免疫刺激促进人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)介导的孤独症谱系障碍(ASD)的分子机制。方法首先利用慢病毒感染构建稳定敲低PTEN的神经干细胞系和神经元细胞系,随后通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测免疫刺激对敲低PTEN的神经干细胞中Akt信号通路的影响。用稳定敲低PTEN的神经干细胞进行MTT实验和EdU掺入实验,检测免疫刺激对神经干细胞增殖能力的影响,通过RT-qPCR和流式细胞术检测免疫刺激对敲低PTEN的神经干细胞分化的影响。利用稳定敲低PTEN的神经元细胞系,检测免疫刺激对神经元突触形成的影响。结果在稳定敲低PTEN的神经干细胞中,免疫刺激能够促进Akt的磷酸化,并且影响下游如mTOR和GSK3的表达或活性,激活Akt信号通路。免疫刺激促进了神经干细胞的增殖能力,并且抑制了神经即干细胞向神经元细胞的分化过程。对稳定敲低PTEN的神经元细胞进行免疫刺激,神经元细胞突触的数量和最大长度均明显提高,促进了神经元细胞突触的形成。结论免疫刺激可以激活神经干细胞中的Akt信号通路,促进神经干细胞增殖,影响神经干细胞的分化方向,并且免疫刺激促进了神经元细胞突触形成,影响了PTEN介导的ASD。