青蒿琥酯抑制新生血管生成的作用

目的 为研究青蒿琥酯成为抗血管生成药物的可能性 ,观察其对新生血管的影响 ,并初步探讨其机制。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜、大鼠主动脉环无血清培养、人脐静脉内皮细胞损伤迁移等实验 ,检测青蒿琥酯对新生血管增殖与迁移的抑制作用。结果 鸡胚绒毛尿囊膜实验表明 ,青蒿琥酯有较强的血管增殖抑制作用 ,对微血管作用强于大血管 ;大鼠主动脉环无血清培养实验表明 ,青蒿琥酯能明显推迟血管新生 ,减少新生血管数量 ;人脐静脉内皮细胞损伤迁移实验表明青蒿琥酯对内皮细胞具有增殖和迁移抑制作用。在这些体内外实验中 ,青蒿琥酯抑制血管生成作用呈剂量依赖性。结论 青蒿琥酯具有抑制新生血管生成作用 ,此作用可能与抑制血管内皮细胞迁移有关。

6～8月龄Beagle犬的生理、生化参数检测

目的 测定 6～ 8月龄Beagle犬正常生理、生化等数据 ,为药理、毒理试验提供对照参考。方法 血液学、血液生化学、血清激素水平、血压、呼吸、心电图、骨髓象、脏器系数等指标均按现临床检测方法进行。结果 4 8头 6～ 8月龄Beagle犬 (雌雄各半 )的正常生理、生化参数 ,血清激素水平 ,骨髓象及主要脏器的系数均取得平均值及标准差范围。结论 6～ 8月龄正常Beaele犬生理、生化等参数的个体差异较小 ,本研究结果可作为新药Beagle犬长毒试验中各项测试的正常值参考。

鸡肝散总黄酮抗胸痹证的实验研究

目的:研究鸡肝散总黄酮(Total flavone from Elsholtzia blanda,TFEB)抗冠脉结扎诱发大鼠胸痹证之功效及其机制。方法:雄性SD大鼠ig TFEB5天,结扎冠脉左前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)造成大鼠胸痹模型,3 h后处死大鼠,取左心室,氯化硝基四氮唑蓝(nitrotetrazolium blue chloride,NBT)染色以区分梗死区和非梗死区,计算心肌梗死指数;另取心室肌心尖部分做组织切片,HE染色,光镜检查心肌的损伤程度,评价TFEB对胸痹证的作用。取血清测定一氧化氮(Nitric oxide,NO),探讨TFEB抗胸痹证的机理。结果:TFEB各剂量组均可著减少大鼠冠脉结扎后左室梗死区的心肌重量,心肌梗死指数明显减小(P<0.05～0.01),呈良好的剂量依赖关系。光镜检查结果显示,假手术组心肌形态学无明显改变,肌纤维完整,心肌细胞排列整齐;溶剂组心肌纤维大范围肿胀、断裂、坏死融合,并可见心肌细胞破裂;TFEB各组心肌病理性变化程度都较溶剂组减轻。TFEB100、150 mg/kg均可显著降低大鼠冠脉结扎后血清中NO含量(P<0.05～0.01)。结论:TFEB能对抗大鼠冠脉结扎诱发的心肌缺血,具有对抗胸痹证之功效,其机制可能与TFEB降低血清NO含量有关。

鸡肝散总黄酮提取物对大鼠实验性心肌缺血的保护作用

目的 研究鸡肝散总黄酮提取物 (totalflavoneextractofElsholtziablanda ,TFEEB)抗急性心肌缺血作用及其机制。方法 采用雄性大鼠iv垂体后叶素 (pituitrinum ,pit)引发急性心肌缺血模型 ,以Ⅱ导心电图、血清CK ,Ca2 + ,NO含量 ,心肌匀浆Ca2 + ,NO ,MDA含量等为指标 ,综合评价TFEEB连续ig给药 5d后 ,对 pit诱发大鼠急性心肌缺血的作用及其机制。 结果 TFEEB 2 0 0mg/kg可显著降低ivpit后心律失常的发生率、对抗心电图T波的抬高和心率的减慢 (P <0 .0 5 ) ,TFEEB 10 0 ,15 0和 2 0 0mg/kg均可显著降低血清CK和心肌匀浆MDA ,Ca2 + 的水平 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,升高血清NO ,Ca2 + 和心肌匀浆NO水平 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 TFEEB对大鼠心肌缺血有一定的保护作用 ,其机制与TFEEB防止心肌钙超载。

二氢青蒿素联合环氧化酶2抑制剂抗S180肉瘤作用机制研究

目的探讨二氢青蒿素联合环氧化酶2抑制剂对S180肉瘤的生长抑制作用及其可能的机制。方法采用ICR小鼠皮下移植瘤模型,观察二氢青蒿素联合环氧化酶2抑制剂对小鼠S180肉瘤生长抑制作用,以及对肿瘤COX-2、VEGF、CD31蛋白表达与白细胞数目的影响。结果二氢青蒿素分别以50、100、150mg·kg-1剂量与环氧化酶2抑制剂美洛昔康10mg·kg-1剂量合用能明显抑制S180肉瘤的生长,抑瘤率最高达55.38%,优于两药单用的效果;免疫组织化学检测表明,3个剂量的二氢青蒿素合用环氧化酶2抑制剂的肿瘤组织COX-2、VEGF及CD31蛋白的表达量均下降;Westernblot方法检测得在高剂量二氢青蒿素(150mg.kg-1.d-1)联合应用美洛昔康(10mg.kg-1.d-1)组VEGF和COX-2蛋白的表达量均有下降,与模型对照组差异有显著性(P<0.05);RT-PCR检测得各合用药物组的肿瘤组织VEGFmRNA表达量均减少(P<0.05)。结论二氢青蒿素联合环氧化酶2抑制剂能明显抑制S180肉瘤的生长,其机制可能与下调肿瘤组织中COX-2和VEGF的表达有关。

二氢青蒿素抑制K562细胞血管内皮生长因子的表达

目的通过观察二氢青蒿素抑制K562细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨青蒿素类药物在抑制血液肿瘤血管新生方面的作用。方法运用MTT法、免疫组化分析和Westernblotting分析等探讨了二氢青蒿素对K562细胞增殖以及VEGF表达方面的影响,并进一步对药物预处理后肿瘤细胞的条件培养基在促内皮细胞增殖以及促鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的作用进行评定。结果二氢青蒿素能有效抑制K562细胞的增殖,并显著下调K562细胞VEGF蛋白和mRNA的表达。同时,药物预处理细胞的条件培养基,其促内皮细胞增殖和促CAM血管新生的能力都有所下降,并呈药物浓度依赖性。结论二氢青蒿素能显著下调K562细胞VEGF的表达,并能抑制由其诱导的血管新生作用。

青蒿琥酯诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的 探讨青蒿琥酯对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的诱导凋亡作用 ,以及这种诱导作用与内皮细胞增殖及细胞内游离Ca2 + 的关系。方法 采用MTT比色法测定青蒿琥酯对HUVEC增殖的影响 ,Fura 2 /AM荧光标记法测定HUVEC胞内游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i) ,应用吖啶橙 /溴化乙啶荧光双染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术检测细胞凋亡。结果 青蒿琥酯可抑制HUVEC增殖 ,明显诱导HUVEC凋亡 ,并呈浓度依赖性和时间依赖性效应关系。在发生凋亡的同时伴有 [Ca2 + ]i 显著升高。结论 青蒿琥酯可诱导HUVEC凋亡 ,其机制可能与[Ca2 + ]i

硝普钠对组胺所致离体豚鼠回肠H_1效应的影响

目的 探讨一氧化氮 (NO)与组胺 (His)对离体豚鼠回肠生理活动的共同调节作用及其可能机理。方法 将离体回肠段固定于含 95 %O2 和 5 %CO2 台氏液恒温测试系统中 (37℃ ) ,分别给予硝普钠 (SNP ,15、15 0、15 0 0 μmol·L- 1)或SNP +硝苯地平(Nif ,2 5、5 0、10 0nmol·L- 1) ,作用 30min ,再累积加入不同浓度的His(0 .0 1～ 10 μmol·L- 1) ,以平衡生理记录仪描记肠段收缩曲线 ,观察SNP和Nif对His引起的回肠H1效应的影响。结果 ①SNP可增强低浓度His(0 .0 1～ 0 .1μmol·L- 1)引起的回肠H1效应 ,随His浓度增高 ,SNP的增强作用减弱 ;②去台氏液中外钙 ,有或无SNP存在时的HisH1效应均呈减弱作用 ,且两者间无显著差别 ;③Nif呈浓度依赖性地抑制His引起的H1效应 ,并浓度依赖性地抑制SNP增强H1效应的作用。结论 SNP可增强离体豚鼠回肠HisH1效应 ,该增强作用可能与回肠平滑肌细胞的外Ca2 + 内流有关。

鸡肝散总黄酮对大鼠实验性心律失常的作用研究

目的 :研究鸡肝散总黄酮 (TotalflavoneofElsholtziablanda ,TFEB)抗大鼠实验性心律失常的作用。方法 :大鼠采用结扎冠脉左前降支 (leftanteriordescendingcoronaryartery ,LAD)、iv垂体后叶素 (pituitrinum ,pit)、恒速iv乌头碱诱发大鼠心律失常的动物模型 ,记录Ⅱ导ECG ,分别观察大鼠心律失常发生的情况。结果 :TFEB 15 0、2 0 0mg/kg能显著减少结扎后 15min内室性早博(ventricularextrasystole ,VE)的发生次数 ,减少发生室性心动过速 (ventriculartachycardia ,VT)的动物数 ,降低ivpit所致心律失常发生的百分率 ;TFEB各剂量组均能极显著提高乌头碱致大鼠VE的阈值 ,TFEB 3 0 0mg/kg还能显著提高乌头碱诱发大鼠VT、VF和心脏停搏 (heartstop ,HS)的阈值。 结论 :TFEB具有抗实验性心律失常作用。

深部脑刺激在神经精神疾病治疗中的应用研究进展

近年来,深部脑刺激用于神经精神疾病的治疗越来越引起关注。与手术及其他电刺激方式相比,深部脑刺激具有靶点明确、选择性高、可逆、可调、无毁损等优点。多项临床试验结果显示,电刺激脑内不同结构,可缓解帕金森病、癫痫、慢性痛、抑郁症等多种神经精神疾病的临床症状,引起的副作用较少见。深部脑刺激正在逐渐成为治疗难治性神经精神疾病的一个非常有潜力的治疗手段。

星形胶质细胞在癫痫发病中的作用

目前临床上的抗癫痫药物都是通过调节神经元活动起作用的,但是仍有近三分之一的癫痫患者发展成为难治性癫痫。近年来随着对癫痫发生机制的深入研究,星形胶质细胞在癫痫中的作用得到了国内外研究者的关注。大量研究发现,癫痫的形成、发作过程常常伴随星形胶质细胞明显的功能改变,这提示星形胶质细胞在癫痫的发病机制中起着重要作用。因此,对星形胶质细胞在癫痫发病机制中的作用进行深入研究,有可能发现新的抗癫痫药物作用靶点,对癫痫治疗策略产生深刻影响。

微粒体谷胱甘肽S-转移酶与药物代谢

目的 阐明微粒体谷胱甘肽S 转移酶 (mGST)的研究新进展及其在药物代谢中的作用。方法 综述了近年来对mGST的生物学特性及在肝脏药物代谢中的研究进展。结果 膜结合型mGST超基因家族在药物经肝微粒体解毒代谢、防止脂质过氧化以及抗癌药物耐药性中起到重要的作用。结论 mGST具有重要的药理与毒理学意义 ,具有深入研究的广阔前景。

青蒿琥酯对假孕大鼠蜕膜瘤和骨髓血管生成的影响

目的观察青蒿琥酯对大鼠蜕膜瘤和骨髓血管生成的影响。方法采用大鼠假孕模型,将假孕大鼠随机分高、中、低剂量组给药(80、40、20mg·kg^(-1)·d^(-1))和溶剂对照组(3%NaHCO3),利用免疫组化的方法,检测青蒿琥酯对大鼠蜕膜瘤和骨髓的血管密度和血管内皮生长因子VEGF表达的影响。结果青蒿琥酯高、中剂量组给药时对血管密度的影响与溶剂对照组相比,差异有非常显著意义(P<0.01),低剂量组(20mg·kg^(-1)·d^(-1))与溶剂对照组相似(P>0.05);对VEGF表达的影响,高、中剂量组与溶剂对照组比较差异有显著意义(P<0.01)。结论青蒿琥酯对大鼠蜕膜瘤和骨髓血管生成具有抑制作用。

青蒿琥酯对孕体组织的损伤

为了探讨青蒿琥酯 (Art)对胚胎发育的影响 ,作者观察了Art对体外培养人蜕膜细胞存活率的影响 ,并选用SD大鼠用DTNB直接法和TBA法测定胚胎和胎盘组织中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)的活性及脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量 .结果表明 ,二氢青蒿素对体外培养的人蜕膜细胞有直接杀伤作用 ,其LC50 为 (2 5 .2± 3.5 )mg·L- 1.大鼠于妊娠d 6～ 10scArt ,末次给药后 2 4h ,胚胎中GSH Px活性显著降低 ,MDA含量显著升高 (P <0 .0 5 ) ,并使胎盘中GSH Px活性非常显著升高 (P <0 .0 1) .结果提示 ,Art能直接损伤蜕膜 ,破坏胚胎和胎盘的抗氧化系统的平衡状态 ,造成胚胎和胎盘组织的氧化损伤 ,最终导致胚胎吸收 .

对乙酰氨基酚致小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活机制

目的 探索大剂量对乙酰氨基酚 (Par)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S 转移酶(mGST)活性的影响及其可能的机制。方法 小鼠饮用 1 0 %乙醇 7d以诱导肝药酶 ,Par90 ,1 5 0 ,2 1 0mg·kg-1ip ,在 6h内测定肝mGST活性及谷胱甘肽 (GSH)含量 ,结合二硫苏糖醇(DTT)逆转与N 乙基马来酰亚胺 (NEM)激活效应来探讨mGST活性变化机制 ,并用SDS PAGE和负染凝胶法评价Par对mGST蛋白分子量及含量的影响。结果 ipPar90～ 2 1 0mg·kg-1,在短时间内引起小鼠mGST活性增加 ,GSH含量减少。mGST活性的改变与Par处理之间存在时效及量效关系。Par引起的mGST的激活效应不被二硫键断裂剂DTT逆转 ,NEM在Par激活的mGST半胱氨酸 49巯基 (Cys 49 SH)上总激活效应降低 ;激活的mGST未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论 大剂量Par引起小鼠体内mGST活性增加 ,其激活机制主要与Cys 49

苯丁酸氮芥及环磷酰胺对大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活

目的探索苯丁酸氮芥(CHB)和环磷酰胺(CP)在体外是否通过烷化激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶(mGST)。方法微粒体粗提物与CHB或CP体外共孵育,测定mGST催化动力学改变,结合N-乙基马来酰亚胺(NEM)再激活实验和结合二硫苏糖醇(DTT)逆转实验,研究酶激活机制。结果CHB或CP浓度(0～5mmol.L-1)与时间(0～5min)依赖性地激活mGTS。增强的mGST活性能被NEM进一步增强,不被二硫键断裂剂DTT逆转,NEM对CHB或CP活化后的mGST活性的增强效应与NEM单独的增强效应无差异。结论CHB或CP体外可激活大鼠肝mGST,激活机制可能与mGST的Cys49的巯基被CHB或CP修饰激活有关。

亚硝基谷胱甘肽对大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶的激活及机制

目的 探索一氧化氮供体亚硝基谷胱甘肽(GSNO)能否在体外通过S 亚硝酰化机制激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶 (mGST)。方法 微粒体粗提物与GSNO体外共孵育 ,测定mGST催化动力学改变 ,结合N 乙基马来酰亚胺 (NEM )再激活实验和二巯基苏醇 (DTT)逆转实验 ,以及酶蛋白游离巯基和酶S 亚硝酰化蛋白的改变 ,研究酶的激活机制。结果 GSNO在 0 .12 5～ 2mmol·L- 1浓度范围内呈浓度和时间 (3～ 15min)依赖性地激活mGST ,NEM对酶的再激活效应消失 ,DTT可以逆转上述激活作用 ,同时酶蛋白游离巯基浓度依赖性减少 ,而S 亚硝酰化蛋白浓度依赖性增多。结论 GSNO体外可激活大鼠肝mGST ,激活机制可能与mGST第 4 9位半胱氨酸 (Cys4 9)的巯基被亚硝酰化形成S 亚硝基硫醇结构有关。

二氢青蒿素诱导HL-60细胞凋亡

目的探讨二氢青蒿素对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的治疗作用。方法采用台盼蓝染色法和MTT法测定二氢青蒿素对HL-60细胞存活的影响,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染色、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹分析凋亡相关蛋白的表达。结果二氢青蒿素可抑制HL-60细胞存活,诱导HL-60细胞凋亡,同时降低HL-60细胞Bcl-2蛋白的表达,增加Bax蛋白和凋亡执行蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,并呈浓度依赖性。结论二氢青蒿素可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能是通过对线粒体凋亡通路中Bcl-2,Bax和caspase-3蛋白表达的调控而发挥作用。