小RNA干扰对高表达RegIα基因胃癌细胞株增殖的影响

目的:探讨小RNA干扰(small interfering RNA,RNAi)对胃癌细胞株RegIα基因表达的抑制作用及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:RT-PCR检测6株胃癌细胞的RegIα基因mRNA表达水平;体外构建RegIα基因小RNA干扰的重组质粒,分别稳定转染RegIα高表达细胞株MKN45和AGS,并设空载体作为对照组;应用RT-PCR和Western blot测定转染后细胞RegIα基因及其蛋白的表达水平;应用MTT法和流式细胞仪检测RegIα小RNA干扰对细胞增殖抑制率和凋亡的影响。结果:RT-PCR显示:与空载体组相比,转染RegIα小RNA干扰质粒后,MKN45和AGS细胞的RegIαmRNA明显被抑制;Western blot结果显示:MKN45和AGS细胞的RegIα蛋白表达水平分别降低至空载体组的(44±4)%和(25±4)%;MTT结果显示:RegIα小RNA干扰后MKN45和AGS细胞增殖均受到抑制,凋亡率分别为(12.96±0.50)%和(11.59±1.10)%,与空载体组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小RNA干扰可有效抑制胃癌细胞株中RegIα基因的表达,具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的重要作用。

胃液颈细胞分化增殖的调控

黏液颈细胞(MNC)被认为是胃黏膜中具有分化和增殖能力的细胞,研究显示再生基因RegI可促进MNC向壁细胞和主细胞分化,在胃黏膜细胞增生、移行、分化以及维持胃黏膜完整性中发挥重要作用。研究发现表皮生长因子(EGF)、胃泌素和促炎性因子CINC-2β可能都通过刺激RegI来调节MNC的细胞分化和胃腺体增殖。胃泌素促进ECL细胞中RegI的表达,胃黏膜MNC抗EGF抗体强染色,而其他胃黏膜细胞(主细胞、壁细胞等)均无阳性表达。在转基因大鼠实验中,转化生长因子表达后,MNC细胞和腺体黏液细胞数量明显增加。此文综述并提出了MNC分化和增殖对胃黏膜良恶性病变影响的机制。