人miR-152基因的慢病毒载体的构建及稳定株筛选

目的构建人miR-152基因重组慢病毒载体并筛选稳定表达株。方法 PCR扩增包括miR-152前体所在区域的基因组DNA,克隆到慢病毒载体表达质粒pGIPZ中,得到重组的pGIPZ-miR-152表达载体,通过与包装质粒共转染HEK-293T细胞,获得携带miR-152 minigene的重组慢病毒。用病毒感染HepG2细胞,72 h后用嘌呤霉素筛选。用real-time PCR法检测miR-152基因的表达。结果构建的重组质粒经双酶切验证和测序比对鉴定正确;该质粒转染293T细胞获取的慢病毒滴度达7.5×107TU/mL;用病毒感染HepG2细胞,感染效率达70%以上。药物筛选10 d后,获得的过表达株miR-152表达量比正常细胞高近10倍。结论成功构建人miR-152基因慢病毒载体质粒pGIPZ-miR-152,并筛选出miR-152过表达细胞株,为后续实验奠定基础。

肥胖儿童非酒精性脂肪肝病及代谢综合征发病情况分析

目的研究肥胖儿童中非酒精性脂肪肝病（NAFLD）与代谢综合征（MS）的发生情况，并探索两者之间的关系。方法对308例在本院内分泌科住院的9～14岁肥胖儿童进行腰围、体块指数、血脂、肝功能、肝脏B超、糖耐量试验及胰岛素释放试验等各项检查，根据诊断标准分别计算发生NAFLD[包括单纯性非酒精性脂肪肝（SNAFL）、非酒精性脂肪肝炎（NASH）]和MS的患病率，并将308例肥胖患儿分为无肝脏损害的肥胖儿童组（OCWLD组），SNAFL组和NASH组，比较各组胰岛素、胰岛素抵抗（IR）指标及MS的发病率和MS组成成分的发病率。结果（1）308例中发生NAFLD的达到203例（65．9％），其中发生SNAFL者140例（45．5％），发生NASH者63例（20．5％）。（2）308例中发生MS76例（24．7％），这76例中合并有NAFLD的64例（84．2％）。NAFLD组中MS64例（31．5％），高于OCWLD组的12例（11．4％），差异有统计学意义，但SNAFL组中MS41例（29．3％），与NASH组的23例（36．5％）比较差异无统计学意义。（3）就单个MS的组成成分来说，OCWLD组与SNALF组比较仪在高血压的发病率上差异有统计学意义，而OCWLD组与NASH组比较在高血压、高血脂、高血糖的发病率上差异均有统计学意义；SNALF组与NASH组比较在高血脂的发病率上差异有统计学意义。随OCWLD向SNAFL和NASH发展，空腹胰岛素水平逐渐上升，IR也越加明显。但NAFLD患儿与MS患儿比较各IR指标差异无统计学意义。结论肥胖儿童中NAFLD和MS的发生率均已相当高，MS患儿合并NAFLD的比例很高，IR是NAFLD和MS共同的发病基础，且随着NAFLD患儿病情的进展，MS成分指标越来越严重，IR也越来越严重。

肥胖儿童伴良性黑棘皮病与胰岛素抵抗19例分析

目的 探讨肥胖儿童伴良性黑棘皮病与胰岛素抵抗及 2型糖尿病的关系。方法2 0 0 3年 6月～ 2 0 0 3年 9月 ,在我院内分泌门诊及病房就诊的体重指数 (BMI)≥ 2 5的肥胖儿童共 76例 ,对其中伴黑棘皮病皮肤改变的 19例 ( 2 5 % )均行皮肤病理活检以明确诊断 ,同时对这些患儿行空腹血糖、空腹血胰岛素水平、空腹血糖 /胰岛素比值 (FGIR)及人体测量学参数 [腰围 /臀围比值(WHR) ,全身体脂含量 (FM)、体脂百分数 (BF % )、体重指数 (BMI) ]等的检测 ,并行葡萄糖耐量试验(OGTT试验 ) ,以探讨肥胖儿童伴良性黑棘皮病与胰岛素抵抗及 2型糖尿病的关系。结果 19例良性黑棘皮病患儿人体测量学参数包括腰围 /臀围比值 ,全身体脂含量 (FM)、体脂百分数 (BF % )、体重指数 (BMI)及空腹血胰岛素水平明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,空腹血糖 /胰岛素比值 (FGIR) ( 4 2 7± 0 5 3)小于 7,存在明显的胰岛素抵抗 ,其中 1例诊断为 2型糖尿病 ,10例有糖耐量异常。结论 儿童良性黑棘皮病与肥胖、高胰岛素血症 ,胰岛素抵抗及 2型糖尿病密切相关 。

睡眠剥夺对代谢的影响

肥胖和糖尿病正迅速地在全世界范围内增长，严重威胁人类健康，已引起全球广泛重视，但是广泛流行的原因尚未完全清楚。研究显示，慢性睡眠剥夺现象在过去的二三十年里逐渐增多，睡眠剥夺可能对糖尿病和肥胖发病率的增加起一定作用。该文就睡眠剥夺与糖代谢、摄食调节及能量利用展开讨论。睡眠剥夺、体质量增长和糖尿病危险因素增加至少通过糖代谢的改变、食欲增加及能量消耗减少三种机制进行。

生命早期活动与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）多起病于青春期，可能与早期生命活动有关。产前高雄激素可作用于胎儿宫内环境，参与成年后PCOS的发病。胎儿宫内生长受限，导致成年后胰岛素抵抗等病理生理改变，也是PCOS发生的潜在病因。该文就PCOS疾病胎源学说中的“产前雄激素过高”及“脂肪组织扩张受限学说”与PCOS的的关系进行综述。

对抵抗素在肥胖性胰岛素抵抗中作用及作用机制的争议

抵抗素是近年来发现的一种脂肪细胞分泌的多肽类信号分子,最初发现在肥胖小鼠中血清抵抗素水平上升,免疫中和血清抵抗素能改善胰岛素的敏感性,因此认为它可能是联系肥胖和胰岛素抵抗的关键因子。但是,后来有学者发现肥胖鼠白色脂肪组织中抵抗素mRNA水平下降,这与抵抗素主要来源于脂肪细胞相矛盾,而且大多数的人类实验都发现血清抵抗素水平上升与胰岛素抵抗并不相关。因此,目前对于抵抗素和胰岛素抵抗之间的关系尚存在很大争议。

Noonan综合征的临床实践指南

Noomm综合征是一种以特殊面容、身材矮小、先天性心脏病和胸廓畸形等为主要表现的常见遗传综合征,其发病主要与RAS-MAPK信号通路异常相关。现已明确PTTN11、S OS1、RAF1、KRAS等至少16种基因与Noonan综合征等发病相关。国内目前对于Noonan综合征的诊治仍缺乏经验。本文对Noonan综合征的临床表现、发病机制、诊断标准、治疗方案等进行了总结,旨在提高中国的医务工作者对Noonan综合征的诊断水平,并对患者的临床管理提供建议。

生物信息学分析miRNA-152在非酒精性脂肪肝病中的可能作用

【目的】总结miR-152已有研究结果,并预测其可能参与的生物学过程,为本研究小组深入研究miR-152在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成和相关的调控机制奠定基础。【方法】PubMed检索miR-152相关文献,生物信息学预测miR-152的靶基因,并对其进行功能富集分析和信号通路富集分析。【结果】miR-152已在多个类型肿瘤、先兆子痫等疾病中有报道,但尚无参与脂肪肝的研究,分析结果显示miR-152靶基因功能集中于器官发育、细胞分化、代谢等多种分子功能和生物学过程;信号通路主要富集于多种肿瘤和细胞骨架蛋白、脂肪细胞因子、胰岛素信号及wnt信号通路中。【结论】miR-152在非酒精性脂肪肝病中尚未见报道,其预测的靶基因集合富集于多个生物学过程,为研究miR-152在非酒精性脂肪肝病中的作用提供了研究思路。

MIN6细胞系的细胞学特性及其应用

MIN6细胞系是从表达类人猿病毒40大T抗原(受胰岛毒启动子控制)的转基因非肥胖糖尿病小鼠胰岛瘤中建立的,其内分泌功能与胰腺组织非常接近,是研究胰岛细胞功能的理想模型.MIN6细胞系可用于胰腺分泌的研究,β细胞的适宜刺激信号的探索;1型糖尿病发病机制的研究;氧化应激、自噬、游离脂肪酸对2型糖尿病发病的影响;在胰腺移植后发生排斥的机制研究.

学龄前反复呼吸道感染患儿微量元素与红细胞免疫的变化观察

目的探讨微量元素和红细胞免疫功能变化对学龄前反复呼吸道感染患儿临床诊治的意义,为反复呼吸道感染的相关研究提供参考借鉴。方法选取2010年12月-2013年12月收治的反复呼吸道感染患儿44例为研究组,同时选取同期体检的健康儿童44名为对照组,针对两组儿童的细胞免疫指标(CD_3^+、CD_4^+CD_(25)^+、CD_4^+)、红细胞免疫指标(ATER、FEER和DYER)和微量元素指标(Zn^+、Ca^+、和Cu^+)等水平进行观察和比较。结果研究组患儿CD_3^+、CD_4^+CD_(25)^+、CD_4^+指标水平分别为(56.54±4.56)%、(15.43±1.45)%和(35.45±4.32)%,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患儿ATER、FEER和DYER指标水平分别为(49.34±4.35)%、(60.43±6.09)%和(29.34±3.24)%,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患儿Zn^+和Ca^+指标水平分别为(33.87±4.30)μmol/L和(1.32±0.21)mmol/L,低于对照组,研究组患儿Cu^+水平为(15.32±2.19)mmol/L,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论反复呼吸道感染可导致儿童细胞免疫指标、红细胞免疫相关指标的降低和微量元素相关指标的异常,针对上述指标的监测有助于疾病的预防和诊治。

互联网医疗平台接受度和患者掌控感关系研究

目的了解患者家属对于互联网医疗平台的接受度、健康信息获取途径选择及影响因素,为互联网医疗平台建设提供更科学的参考依据。方法采用文献分析法、访谈法、问卷调查法及结构方程模型进行研究。于2019年1月12-15日,对某三级甲等儿童医院就诊的204位儿童患者家属进行问卷调查。使用AMOS 22.0软件完成结构方程模型的统计分析,利用单因素方差分析、相关性分析与回归分析等方法分析患者家属对互联网医疗平台的接受度及可用性评价、对健康信息获取途径的评价及其掌控感。结果常用于接受度评价研究的系统可用性量表(SUS)得分为(55.3554±17.4541)分,处于最低的F级;患者家属对于互联网医疗平台的简便性评价显著高于传统途径(P<0.01)。在信息充分性以及信任度评价方面,患者家属对互联网医疗平台的评价显著低于其他两种途径(P<0.01)。掌控感是患者家属对互联网医疗平台接受度以及健康信息获取途径选择的重要影响因素(P<0.001)。结论患者家属对互联网医疗平台接受度较低。医疗机构一方面应继续加强互联网医疗平台建设、采取多元宣传策略,提高患者家属对医疗平台健康信息的信任度;另一方面应提高患者家属对诊疗过程的掌控感。