2005—2014年CHINET肠球菌属细菌耐药性监测

目的总结2005—2014年中国主要地区临床分离肠球菌属对各类抗菌药物的耐药性变迁。方法 CHINET细菌耐药性监测网各医院按统一方案、采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准进行肠球菌属细菌的耐药性监测。结果2005—2014年共分离到42 185株非重复肠球菌属细菌,最常见菌种为粪肠球菌(47.3%)、屎肠球菌(43.5%)、鸟肠球菌(1.9%)、鹑鸡肠球菌(1.8%)、铅黄肠球菌(0.6%)。10年间,肠球菌属细菌的检出率呈下降波动趋势:2005年为9.1%,2014年为8.7%。肠球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁、替加环素仍高度敏感,耐药率<4%,万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌检出率分别为0.3%、3.2%。粪肠球菌对氨苄西林、高浓度庆大霉素耐药率分别为10.9%、38.0%,尿液标本分离株对呋喃妥因、磷霉素耐药率低,分别4.8%、6.2%,粪肠球菌耐药率有逐年下降趋势;屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌,对氨苄西林、环丙沙星、利福平耐药率>80%,对高浓度庆大霉素耐药率为60.8%,对氯霉素耐药率为7.0%,对万古霉素耐药率从2005年0.6%上升至2014年4.2%。结论肠球菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁、替加环素依然保持较好的敏感性,但屎肠球菌中万古霉素耐药率有逐年增加趋势,应引起重视。

问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组P。分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组P免疫杂交反应性。结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位。经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段。各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体P蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其WesternBlot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。

探讨新型冠状病毒肺炎重症患者的中医治疗原则和方剂

人体生命本质是伴随干细胞分裂分化过程的能量代谢过程。干细胞分裂分化过程是人体内抗损伤修复的核心过程。在新型冠状病毒感染的早期,病毒侵犯和炎性反应导致肺上皮细胞死亡增加,适度增强干细胞分裂分化过程就可以修复组织损伤,阻止炎性反应进展。但是,随着患者病情恶化,机体内干细胞分裂分化过程中会出现热化和寒化表现,即免疫细胞生成方向会强化(热化),成为炎症风暴形成的细胞基础;肺部上皮细胞生成受阻(寒化)。重症患者出现严重肺部炎性病变。患者康复过程也是肺部炎症消退的过程,治疗原则包括温肾阳,补脾气,化痰湿,祛血瘀、血热;同时注意温解太阳经上的寒气。避免过度劳作和不良作息也是治疗康复过程中需要注意的问题。

论能量物质在人体内存储异常为太阴病的病理基础

在中医学领域内,阴阳平衡和气机运行是人体生理病理基础.结合现代医学,人体内的阴阳可以分别定义为人体内的能量代谢过程和干细胞分裂分化过程,二者间的相互作用推动人体内能量转化,即人体内的气机运行.人体内的干细胞分裂分化过程是人体阴分形成的生理基础,这一过程需要能量物质作为物质基础,即能量物质进入人体后以脂肪、多糖、蛋白质等形式进行储备,为干细胞分裂分化过程提供物质基础,推动干细胞通过分裂分化生成体细胞,实现组织器管内细胞更新,维持组织器官结构稳定.能量物质被人体吸收后在人体内存储的生理过程就是太阴经的生理学基础.这一过程出现异常后就形成太阴病,并成为太阴病提纲证的病理生理基础.太阴病的主要治疗原则在于行气化湿,芳香温化.

基于响应面分析方法的钩端螺旋体三联属特异性蛋白抗原原核表达条件的优化

脂蛋白LipL32和LipL21及穿膜蛋白OMPL1是问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性表面抗原,可作为通用型钩体基因工程疫苗抗原。【目的】在我们的研究中,为了获得使得重组人工融合基因lipL32/1-lipL21-ompL1/2获得较高的表达水平,我们优化了重组宿主大肠杆菌的表达条件。【方法】我们采用了基于中心复合设计(CCD)的响应面分析方法(RSM)。影响重组大肠杆菌生长的主要因素包pH、诱导剂IPTG浓度、诱导前培养实践、诱导时间以及诱导温度。响应面分析方法可以从这些因素中找到适合目的蛋白表达的最优表达条件。【结果】我们的结果显示在pH7.9、0.20mmol/LIPTG、诱导前培养时间2.5h、诱导时间5.83h、诱导后温度31℃条件下,可获得目的重组蛋白37.78mg/L的最大表达量。【结论】实验结果表明采用基于中心复合设计的响应面分析方法能够较大地提高目的产物的产量。利用统计方法不但可以减少试验的次数,而且还能够从影响蛋白的因素中找出最重要的影响因素,因此该方法不仅对重组蛋白表达条件的优化有用,而且是一种很好的筛选方法。

不同血清群问号钩端螺旋体mce基因序列分析及表达模式的研究

目的:确定问号钩端螺旋体(简称钩体)株携带侵袭相关mce基因情况,原核表达mce基因并制备其抗血清,了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法:采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段,T-A克隆后测序。采用基因工程技术构建mce基因原核表达系统,SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图象分析系统检查目的重组蛋白rMce表达情况,采用Western Blot对表达的rMce进行鉴定。采用皮内免疫法制备兔抗rMce血清,免疫双扩散试验测定其效价。采用实时荧光定量RT-PCR,检测问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染J774A.1细胞前后mce基因转录水平的变化。结果:我国13株问号钩体株均携带mce基因,双曲钩体三宝垄群patoc型Patoc株则否。与报道的序列(GenBank accession No.:NP_712236)比较,所克隆的mce基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.02%～100%和97.91%～100%。所构建的mce基因原核表达系统能表达rMce,其产量为细菌总蛋白的5%。问号钩体56601株全菌抗血清能有效识别rMce。问号钩体56601株感染细胞后mce基因转录水平明显上调。结论:mce基因仅存在于致病性的问号钩体中,且其转录水平呈细胞接触上调模式,表明该基因与问号钩体致病性密切相关。mce基因产物是序列保守的外膜蛋白。所构建的mce基因原核表达系统及所制备的rMce抗血清为深入研究该基因功能提供了有效的手段。

泛素结合酶E2 A在顺铂诱导的HeLa细胞应激反应中的作用

目的:探讨泛素结合酶E2A(UBE2A)基因在顺铂(cisplatin)诱导的HeLa细胞应激反应中的作用。方法:RT-PCR检测顺铂作用后UBE2AmRNA在HeLa细胞中的表达水平;利用针对UBE2A的特异性siRNA转染细胞后,采用qPCR检测UBE2AmRNA在HeLa细胞中的表达情况,并应用CCK-8法检测细胞在顺铂作用下的存活率。结果:UBE2A基因在HeLa细胞中表达两种转录本:U-1和U-2,U-2相比U-1缺少了外显子4的部分序列,并且顺铂作用后二者表达水平均升高。针对UBE2A的特异性siRNA可分别降低其对应转录本的表达水平,表达量分别为对照组的27.43%、15.85%。UBE2A表达受到抑制的HeLa细胞在顺铂作用后细胞存活率降低,相比对照组分别下降了14.46%和19.20%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:UBE2A可能参与了顺铂诱导的细胞应激反应,抑制其表达可以明显提高HeLa细胞对顺铂细胞毒性的敏感性。

深度水解蛋白的无乳糖奶粉在无菌大鼠培育中的应用研究

目的无菌大鼠的培育中,出生后饲喂的人工配制乳对于无菌大鼠的培养至关重要。深度水解蛋白的无乳糖奶粉,便于婴幼儿吸收,减少了各种消化不良和过敏反应,那么在无菌大鼠使用的奶中加入这种奶粉是否会对无菌大鼠的培育有积极的作用,并且检测饲养成功的无菌大鼠的生化指标。方法使用清洁级的SD大鼠,确定临产期,摘除子宫后,在隔离器内剥离大鼠幼崽,使用人工方法哺乳至22 d离乳,记录体重和生存率。使用的配方奶中,加入深度水解蛋白无乳糖奶粉的为实验组,对照组中加入全价配方奶粉。对培育成功的无菌大鼠在第8周时检测血生化指标。结果在人工喂养的前14天,实验组与对照组在体重和生存率上都无差别,从第14天开始实验组的体重和生存率开始高于对照组,直至第22天实验组的生存率与对照组相比极显著提高(37.18%vs17.78%),第22天的体重也显著高于对照组(9.96±0.49) vs(13.36±0.59)。无菌大鼠的血生化指标显示AST(天门冬氨酸氨基转移酶)降低,GLU(葡萄糖)升高。结论在培育无菌大鼠幼鼠阶段的过程中,深度水解蛋白的无乳糖奶粉可以作为配方奶成分的重要的成分进行添加,可以有效的增加幼鼠体重,减少死亡率。雌性无菌大鼠的血生化指标变动较大。

FIB-4指数联合天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值对HBV患者治疗后病情转归的预测价值

目的评价FIB-4指数和天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值对于慢性乙型肝炎治疗后患者不良预后的预测价值。方法选取我科确诊为慢性乙型肝炎并治疗的患者112例,入院后记录其基线资料并随访1年,根据随访结局分为不良预后组及预后良好组,单因素分析及Cox比例风险模型分析影响慢性乙型肝炎治疗后患者预后的因素;运用ROC曲线评价其对患者预后风险的预测能力。结果单因素、多因素Cox比例风险模型结果显示患者天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值(RR=1.567)和FIB-4指数(RR=1.334)对患者的预后有显著影响;ROC曲线下FIB-4指数和天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值联合诊断的曲线下面积为0.809,其敏感性和特异性分别为79.3%、70.2%。结论 FIB-4指数和天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值联合诊断对慢性乙型肝炎治疗后患者预后有较好的预测能力,有望作为慢性乙型肝炎治疗后患者的常规检查指标之一。

TAM受体在肝脏疾病中的免疫调节作用

TAM酪氨酸激酶受体(TYRO3/AXL/MERTK receptor tyrosine kinase,TAM receptor tyrosine kinase)是蛋白酪氨酸激酶受体亚家族的成员之一,近年来研究发现,该受体及其配体生长停滞特异性基因6(growth arrest-specific gene 6,Gas6)和蛋白S(protein S,Pro S)在调控固有免疫应答、抑制炎性反应失衡等过程中起着重要的作用。肝脏是人体重要的免疫器官,在各种原因引起的肝组织损伤中,免疫功能紊乱及炎性反应失调是肝脏相关疾病发展甚至最终导致肝衰竭的重要原因。近来研究发现酪氨酸激酶受体通过调控细胞因子的释放及其信号通路活动等来实现对肝固有免疫的调节。同时关于TAM酪氨酸激酶的抑制剂卡博替尼的临床试验中提示它可延长肝癌患者的总生存期及无进展生存期,肝癌中TAM酪氨酸激酶受体相关免疫调节研究成为新的焦点。现就TAM酪氨酸激酶受体及其配体GAS6及Pro S对各种免疫细胞的调节及其在肝脏相关疾病中的作用进行综述,旨在为肝脏疾病的诊治提供新的免疫学指标和临床治疗靶点。

2010至2018年国家自然科学基金对检验医学领域肿瘤标志物项目资助情况分析及展望

本文对国家自然科学基金委员会2010至2018年检验医学领域有关肿瘤标志物项目的资助情况进行分析总结。对肿瘤标志物项目涉及的常见肿瘤种类、标志物生化性质进行了分类统计分析,并分析总结了9年来"肿瘤标志物"项目特点,指出了今后本领域研究的发展趋势。

不同检测系统HBVDNA测定结果的不确定度评定与溯源性研究

目的对不同检测系统HBVDNA测定结果进行不确定度评定和量值溯源，探讨不同检测系统HBVDNA测定结果的可比性，为实验室检验结果互认和实验室认可提供实验数据。方法以国家标准物质作为“正确性质控物质”，参考NATA颁布的“化学测量结果不确定度评定与报告导则”，对不同检测系统HBVDNA测定结果的不确定度进行评定，并将结果溯源至国家标准物质；根据CLSI的EP9-A2文件要求，对不同检测系统HBVDNA测定结果进行比对分析和偏差评估，以检测系统偏倚的不确定度（u。）作为判断依据，将t（0.05,v）√ub1^2＋ub2^2作为临床可接受的判断标准，评价不同检测系统HBVDNA测定结果的可比性。结果3个检测系统测定HBVDNA国家标准物质所得的均值（Y）不同，分别为6．15、5．88、6．31，除检测系统A的偏倚无统计学意义（P〉0．05）外，检测系统B、C的偏倚均具有统计学意义（P均〈0．05）；3个检测系统HBVDNA测定结果的扩展不确定度（U）也不同，但均在卫生部临床检验中心室间质量评价中规定的最大允许范围（±0．5）之内。经溯源至国家标准物质后，3个检测系统测定患者样本HBVDNA结果分别为：（5．45±1．23）、（5．55±1．32）、（5．42±1．25）lg（kIU／L），差异具有统计学意义（F=5．63，P〈0．05）。3个检测系统测定结果两两比较显示，检测系统A与C比较，测定结果差异无统计学意义（q=1．85，P〉0．05）；检测系统A与B比较，测定结果差异有统计学意义（q=5．12，P〈0．05）；检测系统B与C比较，测定结果差异有统计学意义（q=6．85，P〈0．05）。3个检测系统中，任意两个检测系统间HBVDNA测定结果的偏差均无统计学意义（P均〉0．05），表明检测系统间测定结果的偏差临床可以接受，测定结果具有可比性。结论当不同实验室HBVDNA检验结果进行比较与互认时，应对各检测系统进行不确定度评定和量值溯源，并对不同检测系统间测定结果进行偏差评估，判断其临床可接受性，以保证检验结果的准确性和可比性。

早产胎膜早破病原检测分析

目的分析早产胎膜早破与支原体及病毒感染的关系。方法选取2011年6月-2012年6月在宁波市妇女儿童医院住院的≤孕34周早产胎膜早破(PPROM)孕妇37例,取宫颈分泌物行支原体培养,采用液态悬浮式基因芯片法检测母血病毒基因。足月胎膜未破孕妇30例作为对照组。结果 PPROM组支原体培养阳性率32.43%,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。PPROM组支原体与病毒共同感染6例(16.22%),高于对照组(2/30,6.67%)。PPROM组检出乙型肝炎病毒11例,单纯疱疹病毒Ⅱ型7例、风疹病毒6例、巨细胞病毒5例;对照组乙型肝炎病毒12例,余种病毒均未检出。PPROM组非HBV病毒阳性18例,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结论≤孕34周早产胎膜早破与支原体感染及病毒感染可能有密切关系,故加强孕前检查及早期治疗对预防早产胎膜早破、提高早产儿生存质量有重要的临床意义。

人工肝用肝细胞的培养及相关技术研究现状

近年来人工肝技术在临床上得到了快速发展，明显降低了肝衰竭的病死率。生物型人工肝（Bioartificialliver，BAL）可以较好的替代肝脏解毒、生物合成和分泌代谢等功能，是国内外研究的热点。肝细胞是生物型人工肝发展的关键因素，如何得到满意的生物人工肝用肝细胞、实现肝细胞的体外大规模培养和冻存，使其快速、稳定增殖，而且能在数天或数周内保持良好的分化状态，

顺铂对HepG2细胞增殖、细胞周期及肝癌干细胞标志物的影响

目的:研究顺铂对HepG2细胞增、细胞周期及肝癌干细胞标志物(CD133、ICAM-1和ABCG2)的影响。方法:选取HepG2作为研究对象,分别采用MMT比色法、PI染色法及免疫荧光法检测不同浓度顺铂对其增殖、细胞周期、CD133、ICAM-1和ABCG2表达的影响。结果:每个浓度顺铂作用后均可以显著抑制HepG2细胞增殖力(F=12.23,P=0.004);顺铂对HepG2细胞增殖力的抑制作用和浓度可能与时间成正比。0 mg/L组静息期(G0/G1期)细胞比例为(50.25±0.79)%、2 mg/L组G0/G1期细胞比例为(89.24±0.41)%、4 mg/L组G0/G1期细胞比例为(29.54±3.02)%,2 mg/L组和4 mg/L组分别比0 mg/L组显著上升和下降,差异明显有统计学意义(t=6.53、-3.65,均P<0.05)。0 mg/L组DNA合成期(S期)细胞比例为(47.13±0.74)%、2 mg/L组S期细胞比例为(5.65±0.42)%、4 mg/L组S期细胞比例为(67.46±3.24)%,2 mg/L组和4 mg/L组分别比0 mg/L组显著下降和上升,差异明显有统计学意义(t=-7.35、3.79,均P<0.05)。结果提示2 mg/L组和4 mg/L组顺铂可让HepG2在G0/G1期与S期显著阻滞,差异有统计学意义(P<0.01);顺铂处理后,剩余的HepG2细胞的CD133、ICAM-1和ABCG2呈现高表达水平。结论:HepG2细胞系中会有很少部分肝癌干细胞避开了顺铂的杀灭作用,是造成临床上肝癌反复发作的重要因素之一,临床上应予以重视。

慢性乙型肝炎患者抗病毒中调节性T细胞、辅助性T细胞17表达特点及与疾病进展关系

目的 了解慢性乙型肝炎（CHB）患者抗病毒中调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞（Th）17的表达水平,分析Treg/Th 17与疾病进展的相关性,并探讨其在CHB发病中的作用.方法 选择53例CHB患者（CHB组）和21例健康体检者（健康对照组）,CHB轻度18例,中度16例,重度19例,采用流式细胞术检测Treg和Th17表达水平,并比较;采用全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、胆碱酯酶、白蛋白,并进行相关性分析.结果 CHB组治疗前、治疗24周后及健康对照组Th17、Treg、Treg/Th 17分别为（2.13±0.65）％,（2.99±0.68）％,（3.59±0.75）％和（6.07±1.18）％,（5.14±0.96）％,（4.02±0.77）％和2.86±0.67,1.73±0.45,1.04±0.34,三者比较差异均有统计学意义（F=14.78,10.12,17.19;P＜ 0.01）.Th17表达水平在CHB轻度、中度和重度患者逐渐下降,但差异无统计学意义（F=1.10,P=0.337）.Treg表达水平在CHB轻度、中度和重度患者逐渐上升,但差异也无统计学意义（F=0.54,P=0.585）.Treg/Th 17随疾病的加重而升高（2.58±0.59,2.76±0.63,3.21±0.71）,差异有统计学意义（F=3.15,P＜0.01）,重度与轻度、中度比较差异有统计学意义（P＜0.05）,且Treg/Th 17与ALT、TBIL水平呈正相关（r=0.272,P=0.000;r=0.226,P=0.000）.结论 Treg/Th 17平衡不仅与CHB致病机制相关,而且还与肝组织免疫炎性反应相关.

四种SSB蛋白的表达纯化及其对HCVRNA的绑定分析

目的表达和纯化四种单链DNA结合（SSB）蛋白，并探讨其对HCVRNA的绑定。方法构建四种SSB蛋白的表达质粒，各简写为TTH，SSOB，KOD和BL21。TTH转化BL21（DE3）感受态细胞，SSOB，KOD和BL21分别转化Transetta（DE3），IPTG诱导表达。镍柱亲和层析纯化，经SDS—PAGE检测表达纯化后的SSB蛋白。并通过TAE电泳检测其对HCVRNA的绑定情况。结果四种SSB蛋白表达质粒转入合适的感受态细胞，IPTG诱导，纯化后经SDS—PAGE电泳，分别发现单一预期大小的蛋白条带，说明我们成功表达纯化出较高纯度的SSB蛋白。并与HCVRNA孵育后，经TAE电泳后发现四种SSB蛋白均能绑定HCVRNA。结论我们表达和纯化了四种SSB蛋白，并首次发现SSB蛋白绑定HCVRNA，为未来研究SSB蛋白在RNA上的应用提供一个重要基础。

神经外科患者入院时产毒性艰难梭菌定植率及其危险因素研究

目的研究神经外科患者入院时艰难梭菌携带情况与艰难梭菌定植的危险因素。方法采集2018年11月-2019年4月徐州医科大学附属医院神经外科病房新入院患者的粪便标本进行产毒艰难梭菌培养与A/B毒素检测,结合患者一般资料及病历资料等信息,分析产毒艰难梭菌定植的危险因素。结果 161例粪便标本共培养分离出艰难梭菌菌株26(16.15%)株,其中非产毒艰难梭菌菌株4株,产毒性艰难梭菌22株,产毒性艰难梭菌定植率13.66%。Logistic回归分析显示,3个月内抗菌药物使用史、3个月内住院史和糖尿病史为患者艰难梭菌定植的独立危险因素,OR值分别为3.55(95%CI:1.1~11.47)、3.80(95%CI:1.13~12.76)和4.60(95%CI:1.06~19.95)。结论神经外科患者入院时产毒艰难梭菌定植率介于其他医院的比例之间。既往抗菌药物使用、住院史及糖尿病史可以增加艰难梭菌定植风险,应加强对相关患者的监测和筛查,是否需要制定相应措施进行防控,仍需进一步的研究证实。

神经外科住院患者定植及感染产毒艰难梭菌的分子流行病学特征

目的 研究神经外科住院患者定植及感染产毒艰难梭菌的分子流行病学特征。方法 采用前瞻性研究方法,选取2018年11月-2019年4月所有徐州医科大学附属医院神经外科新入院的成年患者161例为研究对象。在入院后48 h内、入院后每周及发生腹泻时分别采集粪便标本,本研究的主要临床结局是发生艰难梭菌感染(CDI),未发生CDI的患者随访至出院或死亡。对采集的粪便标本进行艰难梭菌培养及毒素基因检测,对所有的产毒艰难梭菌进行多位点序列分型。结果 从41名患者的粪便中培养分离出产毒艰难梭菌共计50株,其中,30株菌株tcdA及tcdB阳性,占60.00%;17株菌株仅tcdB阳性,占34.00%;3株菌株tcdA、tcdB及cdtA-cdtB均阳性,占6.00%。7名患者发生CDI,CDI发病率为4.35%,其中6名患者在入院时定植产毒艰难梭菌。将分离的50株产毒艰难梭菌进行多位点序列分型,共分析出14个ST分型,其中3株二元毒素阳性菌株均为ST5型。研究期间,患者4与患者31、患者13与患者19检测到相同的ST型,且居住过同一病房或床位。结论 本研究未分离到高毒力菌株ST1/RT027型或ST11/RT078型。研究期间存在产毒艰难梭菌定植患者传播艰难梭菌的可能,但有待进一步采用全基因组测序分型进行验证。