活血止痛汤对硬膜外瘢痕中TGF-β_1和TGF-β_2基因表达的影响

目的:研究中药活血止痛汤对硬膜外瘢痕增生、粘连的预防作用,探讨其与硬膜外瘢痕形成过程中转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)和TGF-β2表达的关系,阐明其作用机制。方法:雄性SD大鼠90只随机分为空白对照组(A组)、透明质酸钠组(B组)、活血止痛汤组(C组),每组30只。手术切除L4,5腰椎椎板,造成0.25cm×1cm硬脊膜裸露区,B组于硬膜囊外均匀地涂上一层透明质酸钠(约0.3ml),其余2组以等量生量盐水处理。术后第1天开始,C组予活血止痛汤2.5ml.kg-1.d-1灌胃;A、B组予以等量生理盐水,连用14d。术后第2、4、8周末处死动物,逆转录酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)测定其硬膜外瘢痕组织中TGF-β1和TGF-β2的表达水平,按Rydell法评定粘连程度,透射电镜观察其超微结构。结果:第2、4、8周时,B、C组TGF-β1和TGF-β2的表达水平均明显低于A组(P<0.05),尤其在第8周时,C组TGF-β1和TGF-β2的表达水平与B组比较亦有统计学意义(P<0.05)。大体观察发现B、C组粘连程度明显减轻(P<0.05)。各时相B、C组瘢痕中成纤维细胞以及细胞内的细胞器的数量均减少,胶原纤维的合成受到抑制。结论:活血止痛汤能通过下调TGF-β1和TGF-β2的表达,减少成纤维细胞增殖和胶原等细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的沉积,达到预防硬膜外瘢痕增生、粘连的效果。

不同来源黑色素瘤BRAF V600E基因突变分析

目的:探讨BRAF V600E基因突变与黑色素瘤源于非色素痣或色素痣的相关性。方法:应用PCR和DNA测序法对62例非色素痣来源和22例色素痣来源的黑色素瘤标本中BRAF V600E位点是否突变进行检测。结果:非色素痣来源黑色素瘤突变率为45.2%;先天性小痣来源黑色素瘤突变率为11.1%;后天痣来源黑色素瘤突变率为15.4%,组间比较差异有统计学意义(χ~2=6.972,P<0.05)。不同来源的黑色素瘤患者的不同性别及发病部位(肢端、非肢端、黏膜)基因突变率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BRAF V600E基因突变与黑色素瘤来源于非色素痣或先天痣或后天痣关系密切,而与性别、发病部位无明显相关性。

活血止痛汤对硬膜外瘢痕Smad2、Smad3和Smad4 mRNA表达的影响

目的:探讨透明质酸钠和中药活血止痛汤预防硬膜外瘢痕形成时对Smad2、Smad3和Smad4表达水平的影响。方法:雄性SD大鼠90只随机分成空白对照组(A)、透明质酸钠组(B)、活血止痛汤组(C),每组30只。手术切除第4、5腰椎椎板,造成0.25cm×1cm硬脊膜裸露区,B组于硬膜囊外均匀地涂上一层透明质酸钠约0.3ml,其余两组以等量生理盐水处理。术后2周内C组予活血止痛汤2.5ml/kg灌胃;A组和B组予等量生理盐水。术后第2、4、8周末处死动物,逆转录酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)测定其硬膜外瘢痕组织中Smad2、Smad3和Smad4的表达水平,碱水解法测定其硬膜外瘢痕组织中羟脯氨酸(Hydroxy proline,Hyp)的含量,按Rydell法评定粘连程度,透射电镜观察其超微结构。结果:①第2、4、8周时,B组和C组Smad2、Smad3和Smad4的表达水平均明显低于A组(P<0.05),尤其在第8周时,C组Smad3的表达水平与B组亦有统计学意义(P<0.05)。②第2周时,B组Hyp含量明显低于A组(P<0.05),而C组与A组差异无统计学意义;第4周时,与A组相比,B组和C组Hyp含量均较低(P<0.05)。第8周时,C组Hyp含量不仅低于A组(P<0.05),而且其与B组亦有显著性差异(P<0.05)。③大体观察也发现B组和C组粘连程度明显降低(P<0.05)。结论:透明质酸钠和活血止痛汤均可通过下调Smad2、Smad3和Smad4的表达,减少了成纤维细胞增殖和胶原等细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)的沉积,达到了预防硬膜外瘢痕增生、粘连的效果。