猪乳铁蛋白肽的分子改良及改良肽的生物学活性研究

本研究采用化学合成的方法获得了猪源乳铁蛋白肽LFP-20及其改良肽，旨在通过研究该抗菌肽一级结构与抗菌活性的关系，获得抗菌活性更高的改良肽。微量肉汤稀释法测定的最小抑菌浓度（MIC）及溶血性分析结果表明，猪乳铁蛋白肽LFP-20及其改良肽LF2A、LF-1和LF-3对大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌均具有抗菌活性；LFP-20对5种试验菌株的MIC为64~128 μg/mL，改良肽LF-1和LF-3的MIC降低了2~4倍；改良肽LF2A对5种试验菌株的抗菌活性没有提高，但溶血性降低；改良肽LF-1的抗菌活性有所提高，但在4、32、64、128和256 μg/mL时的溶血性也显著提高（P〈0.05）。WST-1和LDH法检测4种抗菌肽对人外周血单核细胞（PBMC）增殖的影响及细胞毒性结果表明，LF2A、LF-1和LF-3对PBMC增殖的影响具有剂量依赖性；与LFP-20相比，25~200 μg/mL的LF-1显著提高了PBMC的增殖（P〈0.05），但在400 μg/mL浓度下却抑制了PBMC的增殖（P〈0.05）；200和400 μg/mL LF-1使得PBMC的乳酸脱氢酶（LDH）释放百分率显著提高（P〈0.05），在25~50 μg/mL浓度下却对LDH释放具有降低作用（P〈0.05）。对细胞膜去极化作用研究结果表明，4 μg/mL的改良肽LF-3对大肠杆菌细胞膜的去极化作用明显增强，而抗菌活性较低的LFP-20和LF2A对细菌细胞膜的去极化作用低于LF-3。由此可知，改良肽LF-3的抗菌活性比猪乳铁蛋白肽LFP-20提高了2~4倍，且溶血作用和细胞毒性均没有显著增强；LF-3可通过对细胞膜的去极化作用破坏大肠杆菌细胞膜电势梯度平衡，推测对细胞膜的破坏作用是其发挥抗菌作用的途径之一。

利用有机废水开发蛋白饲料资源的研究

目前,饲料蛋白资源缺乏,工业废水、废渣严重地污染着周围环境。高浓度有机废水特别是食品工业废水可以开发成为蛋白饲料资源,论述了国内外利用有机废水生产蛋白饲料的研究。

不同日龄猪腹脂中脂肪酸合成酶(FAS)基因表达规律的研究

从猪腹脂中提取总RNA，用RT-PCR扩增脂肪酸合成酶基因（FAS），获得一条206bp的片段，以pGEM-TEasyvector为载体，将该基因片段克隆到大肠杆菌E.coli DH5α，筛选阳性克隆并测序。测序结果表明，得到的片段为FAS基因的部分序列，与GenBank中登录的猪FAS基因（AY183428）494～699之间序列同源性达到100％。以FAS基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量RT-PCR法，以18S rRNA为内标，研究从1日龄到28周龄杜长大腹脂中FAS基因表达的规律。结果显示，从1日龄到28周龄，FAS基因在腹脂mRNA水平呈逐渐升高的趋势；统计分析发现，1日龄与28周龄FAS在腹脂中mRNA水平存在显著性差异（P〈0．05）。

γ-氨基丁酸对夏季高温期蛋鸡产蛋性能、蛋品质的影响及其机理研究

试验选取480只320日龄罗曼蛋鸡,随机分为5组,每组3个重复,每个重复32只鸡,分别饲喂添加0(对照组)、25、50、75、100 mg/kgγ-氨基丁酸(GABA)的试验饲粮,试验期60 d,研究GABA对夏季高温期蛋鸡产蛋性能、蛋品质的影响,并从内分泌、抗氧化性能、免疫性能等方面探讨其作用机理。结果表明:1)饲粮添加GABA对采食量无显著影响(P>0.05),对产蛋性能有显著的提高作用(P<0.05),其中50 mg/kg水平添加效果较佳,与对照组相比,产蛋率、平均蛋重显著提高(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05)。2)50 mg/kg GABA显著提高了蛋壳强度(P<0.05),降低了蛋黄中胆固醇含量的作用较明显(P>0.05),对蛋白高度、哈氏单位也有一定的改善作用(P>0.05)。3)50 mg/kg GABA显著提高了血清谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性(P<0.05),显著降低了血清丙二醛含量(P<0.05);显著提高了血清中促卵泡激素、雌二醇、三碘甲腺原氨酸、游离三碘甲腺原氨酸含量及免疫球蛋白G、免疫球蛋白A和补体C3含量(P<0.05)。上述结果提示:夏季高温期饲粮中添加GABA可显著提高蛋鸡的抗氧化性能及免疫性能,促进性腺激素及甲状腺激素的分泌,维持内分泌稳定,从而缓解夏季高温对蛋鸡的热应激危害,起到提高产蛋性能和一定程度上改善蛋品质的作用。GABA添加量以50 mg/kg为宜。

抗菌肽与抗生素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的体外协同抗菌效果研究

本试验旨在研究抗菌肽与抗生素联合使用对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的作用效果。通过最小抑菌浓度(mini muminhibitory concentration,MIC)测定,联合药敏试验,研究牛乳铁蛋白肽(Lactoferricin B,LFcin B)、天蚕素A(Cecropin A)及金霉素、新霉素对大肠杆菌(Escherichia coliATCC25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylo-coccus aureus ATCC25923)、猪霍乱沙门氏菌(Sal monella choleraesuis CMCC50013)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa CMCC10014)的体外协同抗菌效应。结果表明:Cecropin A与LFcin B联合使用对所试革兰氏阴性菌均表现为协同作用,两者联用时的MIC分别是单用时的1/4和1/8～1/4;金霉素与LFcin B联合使用对革兰氏阴性菌和阳性菌表现为协同作用,两者联用时的MIC是单用时的1/8～1/4;另外,Cecropin A与金霉素联合使用对革兰氏阴性菌也表现为协同作用。4种药物的两两合用对受试菌株均不表现拮抗作用。结果提示,LFcin B、Cecropin A及金霉素联合使用对革兰氏阴性菌及阳性菌具有协同作用。

饲料中镉对产蛋鸡生产性能、抗氧化功能及其体内残留的影响

为研究日粮中低剂量镉对蛋鸡生产性能、抗氧化功能以及其在体内沉积的影响,将192羽巴布考克B300蛋鸡随机分为4组,每组3个重复,每重复16羽。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组日粮为基础日粮中分别添加5、10和20mg.kg-1的镉(氯化镉形式,CdCl2.2.5H2O),试验期9周。结果表明:1)在1～3、4～6和7～9周,试验组的产蛋率和日采食量均低于对照组,但差异不显著(P>0.05);各组在第7～9周时的采食量显著低于1～3周,分别下降了5.89%(P<0.05)、6.77%(P<0.05)、9.61%(P<0.05)和12.71%(P<0.05);从整个试验期(1～9周)来看,产蛋率变化相对明显,试验组产蛋率比对照组分别下降了1.86%、2.27%和2.68%,但其差异不显著(P>0.05),平均蛋质量、日采食量和料蛋比也无显著差异(P>0.05);2)镉添加量越高,鸡蛋中镉含量越高,各组差异显著(P<0.05),但均低于30μg.kg-1,且蛋黄中镉含量高于蛋清;3)饲料中加镉后,各组间肾脏、肝脏及卵巢中镉含量差异显著,肾脏中镉含量最高,肝脏次之,卵巢中含镉较少,20mg.kg-1组的肾镉含量可达0.261mg.kg-1;4)血清MDA含量试验组显著高于对照组,分别比对照组高出1.47、2.24和2.68倍(P<0.05);试验组的总SOD和CuZn-SOD活力均低于对照组,分别比对照组下降了8.30%(P>0.05)、7.29%(P>0.05)、16.92%(P<0.05)和11.61%(P<0.05)、14.94%(P<0.05)和16.37%(P<0.05);血清NO含量试验组比对照组分别升高了11.19%(P>0.05)、26.72%(P<0.05)和46.68%(P<0.05)。试验结果证实了镉可逐渐蓄积在体内,并通过氧化损伤等途径来影响蛋鸡健康,导致其生产性能下降。

β-防御素在金华猪和长白猪肠道中表达规律的研究

本试验旨在研究金华猪和长白猪从初生到60日龄不同肠段中3种β-防御素[β-防御素-1(pBD-1)、β-防御素-2(pBD-2)和β-防御素-3(pBD-3)]基因表达规律,并比较β-防御素基因在2个品种之间的表达差异。选取初生、20、40和60日龄的金华猪和长白猪各3头,屠宰后取十二指肠、空肠、回肠和结肠组织,实时定量PCR法检测各肠段pBD-1、pBD-2和pBD-3基因的表达量。结果表明:1)从初生到60日龄,随日龄的增加pBD-1和pBD-3基因在猪肠道中的表达量升高,pBD-2基因在十二指肠和空肠中的表达量升高,而在猪结肠和回肠中的表达量先下降后上升。2)在20、40和60日龄时,金华猪各肠段中3种β-防御素基因的表达量均高于长白猪。3)初生和20日龄,金华猪十二指肠pBD-1基因表达量极显著高于长白猪(P<0.01);60日龄pBD-1基因在空肠、回肠和结肠中的表达量,金华猪显著高于长白猪(P<0.05),pBD-2基因在十二指肠、回肠和结肠的表达量,金华猪显著高于长白猪(P<0.05),金华猪pBD-3基因在十二指肠、空肠和回肠的表达量显著高于长白猪(P<0.05),结肠中的表达量极显著高于长白猪(P<0.01)。结果显示,初生到60日龄,pBD-1和pBD-3基因在猪肠道中的表达呈上升趋势,金华猪肠道中3种β-防御素的表达水平在20、40和60日龄均高于长白猪。

饲料铅污染对蛋鸡生产性能、蛋品质以及抗氧化性能的影响

本试验旨在研究不同剂量铅对蛋鸡生产性能、蛋品质以及血清、肝脏和肾脏中与抗氧化性能相关指标的影响。选用40周龄生产性能相近的海兰褐蛋鸡576羽,随机分为4组:对照组、试验1组(T1组)、试验2组(T2组)、试验3组(T3组),每组4个重复,每个重复36羽。对照组饲喂基础饲粮,T1、T2、T3组分别饲喂在基础饲粮中添加15、30、60 mg/kg铅的试验饲粮。试验期8周。结果表明:1)各组间产蛋率和料蛋比均无显著差异(P>0.05),1～8周T3组平均蛋重显著低于对照组(P<0.05),1～8周T1、T2、T3组平均日采食量分别较对照组降低了3.72%(P<0.05)、1.93%(P>0.05)、3.63%(P<0.05)。2)与对照组相比,试验组蛋白高度和哈夫单位均有降低趋势,除T3组蛋白高度(P<0.05)外均差异不显著(P>0.05);T3组蛋壳强度和蛋壳厚度最低,第4周和第8周时T3组蛋壳强度分别比对照组降低了21.89%、16.84%(P<0.05);蛋壳厚度的变化趋势与蛋壳强度一致,均随着铅添加量的增加而降低,呈现一定的剂量-效应关系。3)与对照组相比,各试验组血清、肝脏和肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著降低(P<0.05);丙二醛(MDA)含量均在一定程度上升高,T3组血清和肝脏中MDA含量均较对照组显著上升(P<0.05),各试验组肾脏中MDA含量均显著高于对照组(P<0.05);血清、肝脏和肾脏中还原型谷胱甘肽含量和总抗氧化能力以及总超氧化物歧化酶活性均呈现降低趋势。综上所述,饲料中铅污染可以导致蛋品质降低,诱导脂质过氧化作用,降低蛋鸡抗氧化能力。

饲料中加镉对猪生长性能及内脏器官的影响

体重27kg左右杜长大生长猪96头,随机分为2组,每组设3个重复,分别饲喂添加0、10. 0mg/kg镉的玉米豆粕型饲粮,在体重约90kg时结束饲养试验,并对猪的生长性能、内脏器官的相对重量、血清相关激素指标进行分析。结果显示,添加10. 0mg/kg镉可显著影响猪的生长性能及内分泌水平,试验猪日增重降低18. 6% (P<0. 05),料重比升高15. 1% (P<0. 05);血清生长激素水平降低36. 5% (P<0. 05),而对T3、T4 水平无显著影响(P>0. 05);使肝重率、脾重率、胸腺重率、肠系膜淋巴结重率分别提高15. 1% (P<0. 05)、19.7% (P<0. 05)、30. 7% (P<0. 05)、33. 3% (P<0. 05),而对肾、心、胰、胆囊的相对重量无显著影响(P>0.05)。提示较低剂量镉(10. 0mg/kg)能影响猪的生长性能并可能由镉致生长激素水平降低所致。

衰变加速因子结构及其功能研究进展

衰变加速因子为体内补体调控蛋白家族中的一种重要的同源限制因子,它对于防止同源补体对自身组织细胞的溶破有重要意义,并参与机体多种病理生理过程,如肿瘤免疫、生殖免疫、微生物感染等。本文综述了DAF的结构及其功能研究进展,并指出了其在免疫学,尤其在异种器官移植方面的应用前景及存在的问题。

补体膜辅蛋白的研究进展

补体膜辅蛋白是分子质量为 4 5 0 0 0～ 70 0 0 0u的单链穿膜糖蛋白 ,为补体活化调节基因家族的成员之一。补体膜辅蛋白的细胞分布广泛 ,但不同类型的细胞表达的数量有所不同。现已用探针从cDNA文库中获得其cDNA克隆片断并测序 ,基因组结构已确定。补体膜辅蛋白的主要功能是辅助Ⅰ因子降解C3b和C4b ,它和其它补体成员一起有效控制补体活化 ,保护宿主细胞免受补体介导的杀伤。此外 ,补体膜辅蛋白还可作为麻疹病毒受体 ,在生殖免疫。

天然食品防腐剂作用机理研究进展

食品防腐一直是食品和畜产品加工业所面临的难题 ,在化学防腐剂和传统的物理除菌方法受到种种限制的同时 ,天然食品防腐剂的研究和应用进入了一个新领域 ,也逐渐显示其优势。本文从天然食品防腐剂的作用模式及其微生物对这些防腐剂的抗性机制出发 。

植酸酶在水产养殖中的应用研究

解决饲料磷污染的最佳途径是在饲料中添加植酸酶,植酸酶在饲料中应用,不仅能提高植酸磷的消化率,减少配方中无机磷的添加量和磷排泄污染,还可改善和提高蛋白质、能量、氨基酸和微量元素的利用率。

植酸酶对畜禽矿物元素的利用研究

植物性饲粮中含有大量的植酸,能与Zn2+、Cu2+和Fe2+等矿物质元素形成难溶性植酸络合物,不利于动物的吸收利用。大量的矿物元素排出体外,对环境造成污染。添加植酸酶可缓解植酸的抗营养作用,提高饲料中Ca、P和Zn等的利用率,促进畜禽生长,减少矿物质的添加量,减少对环境的污染。

锌的生物学功能及有机锌的应用研究

锌是动物的必需元素,在动物机体代谢过程中起着重要的作用。本文综述了锌的生物学功能及有机锌的应用研究,包括有机锌的种类及在动物营养中的应用,并预测了今后有机锌的研究方向。

抗菌肽PMAP-23的研究进展

抗菌肽广泛存在于自然界,是动物先天免疫的重要组成成分。PMAP-23是其中一类由23个氨基酸残基构成的多肽,本文着重论述了抗菌肽PMAP-23在结构、基因表达和调控、作用机理及生物学活性等方面的研究进展,并对其应用前景进行了展望。

酪蛋白磷酸肽的生理功能及在饲料业上的应用前景

酪蛋白磷酸肽 (CPPs)是从牛奶的酪蛋白中提取的一种生物活性肽 ,在中性和偏碱性环境下可提高钙的溶解度和钙溶液的稳定性 ,从而促进肠道对钙的吸收 ,还可有效促进锌、铁等其他矿物元素的吸收。本文综述了国内外酪蛋白磷酸肽的研究动态及其生理功能、作用机理、制备方法等 。