麦冬须根的综合开发利用研究

对麦冬须根的成分、毒理、生物活性及其应用进行了研究。其须根和块根的成分基本相同。根据对100名老龄患者的临床研究表明,对老龄综合症有明显的疗效,无副作用。

m-bcr/abl融合基因型慢性粒细胞性白血病临床和实验室研究

目的研究2例表达m型(e1a2)bcr/abl融合基因慢性期慢性粒细胞性白血病(CML-CP)患者的临床及实验室特征。方法患者骨髓细胞分别用R带技术进行染色体核型分析,流式细胞术进行免疫分型,RT-PCR进行bcr/abl融合基因检测,治疗采用羟基脲、阿糖胞苷或羟基脲、HA(高三尖杉酯硷,阿糖胞苷)及干扰素方案。结果2例患者染色体核型均为:46,XY,t(9;22)(q34;q11);免疫分型:CD13、CD15、CD33阳性,其中例2同时表达CD10抗原(34.35%);RT-PCR分析例1初诊时M型bcr/abl融合基因阳性(b3a2),治疗后M型bcr/abl转阴而m型bcr/abl(e1a2)阳性,例2初诊时即为M型bcr/abl融合基因阴性而m型bcr/abl(e1a2)阳性;两例患者骨髓像及临床均表现为慢性期,但例2外周血白细胞计数增高不显著(15～47×109/L),脾脏不肿大。结论m-bcr/ablCML是罕见的CML分子亚型,具独特的临床和实验室特征,其发现对于临床诊断和生物学研究具有重要的意义。

GPR30在子宫肌瘤组织中的表达

目的探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)在子宫肌瘤组织中的表达。方法收集30对子宫肌瘤及瘤旁正常子宫平滑肌组织标本。采用免疫组织化学方法、荧光定量PCR及免疫印迹分析方法对GPR30的mRNA和蛋白水平进行检测。结果免疫组织化学染色显示GPR30在子宫肌瘤细胞中(高)表达,且以胞浆中为主,瘤旁正常子宫平滑肌细胞中仅有少部分表达。GPR30mRNA和蛋白水平在子宫肌瘤组织中的表达均高于瘤旁正常子宫平滑肌组织[mRNA:子宫肌瘤组:(1.05±0.24);瘤旁肌层组织:(0.25±0.09)。Western blot:子宫肌瘤组:(2.69±1.06);瘤旁肌层组:(1.76±0.85)],有统计学意义(P<0.05)。结论GPR30在子宫肌瘤细胞中高表达,可能与子宫肌瘤的发生和增殖有关。并或许可作为潜在的治疗靶点应用于临床。

余姚市农村儿童遗传病的调查分析

1990年，对9129名0-14岁儿童遗传病值况做了调查．发现遗传病及先天畸形共22种81例，患病率为8．87‰，山区及平原患病率分别为8．66‰和8．98‰。，二者无明显差异（P＞0．05），而近亲组及非近亲组儿童道传病患病率分别为102.85‰和7．04‰，有非常显著差异（P＜0．01），年龄越大者发病率越高．

广东地区16336例地中海贫血初筛阳性样本基因型分析

目的了解广东地区育龄人群中α、β地中海贫血(简称"地贫")基因型的分布情况。方法收集广东省各区县育龄夫妇血样,以平均红细胞体积(MCV)≤82 f L和/或平均红细胞血红蛋白含量(MCH)≤27 pg作为阳性指标进行地贫初筛,夫妇双方均为阳性时,进行α及β地贫基因检测。应用聚合酶链式反应(PCR)结合膜杂交法进行地贫基因检测,异常病例经测序确证。结果共收集地贫可疑样本16 336例,其中,地贫基因携带者13 068例,基因诊断阳性率为80%。检出α-地贫8627例,其中,标准型6852例(41.94%),静止型1529例(9.36%),Hb H病241例(1.48%)和香港型5例(0.03%)。β-地贫3788例(23.19%),α复合β地贫基因携带者653例(4.00%)。α地贫基因型以--SEA/αα(76.15%)最常见,其次为-α^(3.7)/αα(10.13%)和-α^(4.2)/αα(4.63%)。共发现23种β地贫基因突变型,以β^(41-42_/β(39.59%)最常见,其次为β^(654)/β(25.08%)及β^(-28)/β(16.89%)。结论 MCV联合MCH作为地贫初筛指标操作简单,便于在基层应用。PCR结合膜杂交法检测地贫基因的灵敏度和特异性较好。对育龄夫妇进行地贫筛查并结合基因检测,将有助于提高出生人口素质。

液精煎治疗精液不液化致不育症72例

精液不液化及液化迟缓可影响精子的活动而导致不育。作者从1989年1月～1992年1月用自拟方液精煎治疗精液不液化症72例,并对部分病例进行了血液流变学等指标检测,现报道如下:1 临床资料本组72例中24～30岁38例,30～35岁26例,≥35岁8例。婚龄最长10年,最短1年半。本组病例均为婚后1年以上未采取避孕措施,女方检查正常,排除性功能障碍及其它器质性疾患致不育者。

男性不育症患者细胞遗传学分析

目的应用细胞遗传技术探讨染色体异常对男性不育的影响。方法选择2002年5月至2007年7月到宁波市医学科学研究所遗传室进行遗传咨询的男性不育症者127例行外周血淋巴细胞培养,制片,染色体核型分析。结果127例男性不育患者中发现37例染色体异常,异常率29.13%。结论染色体异常是导致男性不育的重要原因之一。可为遗传性疾病的诊断,治疗和预防提供依据,是优生优育的重要举措。

遗传性声带肥大2例报告

本文调查了2个声带肥大的家系,在86人中查有患者16人,拟诊断为遗传性声带肥大。该病的主要临床特点为:(1)终生声音沙哑;(2)局部粘膜、声带肥厚、声门闭合不良,但声带活动尚可;(3)其中5例血常规、免疫功能检查正常,2例染色体核型检查正常。 黄氏家系提示常染色体显性遗传,陈氏家系的遗传方式是概率还是其它,有待于积累更多的资料来证实。

泌尿生殖道人型支原体药敏试验及用药建议

目的了解和分析本地区人型支原体感染和耐药情况,指导临床合理用药。方法采用法国生物一梅里埃生产的Mycoplasma IST支原体培养鉴定及药敏试剂盒进行检测。结果从502例泌尿生殖道感染患者标本中检出人型支原体126株,并对其进行药敏试验,其中原始霉素(99.21%)和交沙霉素(94.44%)敏感性最高;其次为强力霉素(88.89%)、四环素(84.92%);氧氟沙星(30.95%)、克拉霉素(30.16%)、环丙沙星(29.36%)、阿奇霉素(24.60%)、红霉素(12.70%)敏感性较差。结论综合各方面因素,建议治疗人型支原体感染首选交沙霉素,次选强力霉素。

P450arom PON1 PRL联合RDW早期诊断子宫内膜异位症的应用价值

目的探讨细胞色素P450芳香化酶(P450arom)、对氧碎酶-1(PON1)、催乳素(PRL)结合红细胞分布宽度(RDW)检测对子宫内膜异位症的早期诊断临床意义。方法2018年1月至2019年5月子宫内膜异位症患者168例,轻度患者(Ⅰ~Ⅱ)87例,重度患者(Ⅲ)81例,另选取健康体检患者168例作为对照组,比较两组不同严重程度患者RDW、P450arom、PON1、PRL水平,分析疾病严重程度与RDW、P450arom、PON1、PRL水平的相关性,比较单独检测和联合检测间的差异。结果观察组患者RDW、P450arom、PRL水平高于对照组,PON1低于对照组;重度组患者RDW、p450arom、PRL水平高于对照组,PON1低于对照组,患者疾病严重程度与RDW、P450arom、PRL水平呈正相关,与PON1呈负相关,通过ROC曲线分析,联合检测灵敏度高于单独检测,且轻度患者RDW、P450arom、PON1、PRL水平的临界值分别为33.26μg/L,0.44U,72.01 KU/L,20.09%,重度患者RDW、P450arom、PON1、PRL水平的临界值分别为52.09 ng/ml,0.61 U,42.01 KU/L,26.66%。结论RDW.P450arom、PON1、PRL水平的联合检测可显著提升子宫内膜异位症患者的诊断效能,建议临床推广。

临床分离铜绿假单胞菌的分布特征及耐药性研究

目的研究医院分离铜绿假单胞菌感染分布及其耐药性变迁,为临床合理用药提供依据。方法采用标本分离培养与鉴定方法以及药敏试验,对某医院临床患者送检标本进行检验和分析。结果该医院在2010-2012年期间从临床送检标本中共检出铜绿假单胞菌1 261株,逐年呈上升趋势。铜绿假单胞菌感染部位以呼吸道为主,有79.38%菌株检自痰标本;另有10.94%的菌株分离自脓液和分泌物。临床分离铜绿假单胞菌对复方新诺明全部耐药,对米诺环素和氨曲南耐药率达到60%以上。近3年来,铜绿假单胞菌耐药率无明显变化。结论该医院临床标本铜绿假单胞菌的分离率较高,对部分抗菌药物耐药率较高,应加强监测与药敏试验。

中药芷辛方对骨癌痛大鼠胶质细胞蛋白表达以及TLRs和NF-κB的影响

目的通过建立癌痛动物模型,探讨芷辛方的镇痛作用及对骨癌痛大鼠模型中脊髓胶质细胞蛋白[胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、CD11b]表达以及Toll受体（Toll-like receptors,TLRs）和核因子κB（NF-κB）的影响。方法将20只SD雄性大鼠随机分为空白组（10只）、骨癌痛模型组（10只）,通过左胫骨内接种含有3×10~3个Walker256嫁接的腹水瘤细胞液造模,并对这两组的大鼠进行行为学检测、X光片检测及HE染色的检测证实造模成功。依照此法将70只雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。空白组（10只）、骨癌痛模型组（简称模型组,10只）、西药盐酸曲马多对照组（简称西药对照组,10只）、芷辛方高、中、低剂量组（每组各10只）、中药五灵止痛胶囊对照组（简称中药对照组,10只）。造模14天后开始灌胃,芷辛方高、中、低剂量组分别给予芷辛方水煎浓缩制剂（9、4.5、2.25 g/kg生药）。每天灌胃1次,连续7天。第21天取脊髓L4~L5段背角,分别应用免疫组化、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白质印迹法（Western blot）的方法,分别检验星形胶质细胞的标志性蛋白GFAP的变化,小胶质细胞的标志性蛋白CD11b表达变化以及髓内TLRs（TLR2、TLR4）和NF-κB的影响。结果与空白组比较,模型组大鼠体重增加迟缓甚至呈下降趋势（P〈0.01）;自发性运动疼痛评分（SAPS）明显上升（P〈0.01）;触诱发痛阈值（PWT）明显下降（P〈0.05,P〈0.01）;手术侧胫骨X线影像以及HE染色示：骨结构发生明显改变和破坏。免疫组化检测髓内星形胶质细胞的标记蛋白GFAP明显升高;NF-κB蛋白水平升高（P〈0.01）。与模型组比较,CD11b、TLR2、TLR4及NF-κB水平芷辛方中、高剂量组均明显下降（P〈0.05,P〈0.01）。结论芷辛方可抑制脊髓水平胶质细胞的增殖活化和TLRs（TLR2、TLR4）、NF-κB蛋白的激活,这可能是其镇痛机制之一。

一种基于HRM技术的快速DNA甲基化检测方法

目的:建立经济可靠的基于MS-HRM技术的检测DNA甲基化的方法。方法:采用简单的沉淀法纯化回收Bis-DNA(重亚硫酸钠处理后的DNA),首次采用picogreen为MS-HRM分析染料,并用新建立的方法检测结直肠癌患者组织SEPT9启动子甲基化水平。结果:新方法的回收率在63%以上,纯度、得率都显著优于经典方法中的Promega Wizard DNA Clean-up System,Picogreen染料可检测到低至0.5%甲基化。共检测34例结直肠癌组织,其中SEPT9异常甲基化的组织33例,占97%,检出率高于文献报导。结论:本文建立的方法简单快速、灵敏度高、重复性好、经济、可操作性强的优点。

女性泌尿生殖道感染的3种病原微生物检测分析

目的:分析、了解女性泌尿生殖道3种病原微生物感染情况。方法:采用培养法和免疫层析法对256例女性泌尿生殖道感染患者进行解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)、沙眼衣原体(CT)检测。结果:UU、MH、CT的阳性率分别为24.61%、18.36%、15.23%,另有33例患者出现混合感染。结论:女性泌尿生殖道感染与UU、MH、CT密切相关。

非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测HBV P区rt204位点耐药突变

目的 建立一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线技术(HRM)检测HBV P区rt204位点耐药突变的方法.方法 构建野生株rt204M、突变株rt204I和rt204V的质粒,设计、优化探针.利用质粒作为标准品建立HRM特征性解链图谱.收集2010年5月至2012年5月宁波大学附属医院诊治的185例慢性乙型肝炎患者外周血样本共185份,用HRM技术检测所有样本,并与特征性解链图谱比对,筛选出rt204位点的突变,再经基因测序验证.采用配对x2检验比较两种方法的变异检出率.结果 突变株rt204I、rt204V和野生株rt204M的熔解温度(Tm)分别为58.0℃、60.6℃和62.5℃；185份样本中,HRM技术成功分析168份(90.8％),基因测序成功分析155份(83.8％),二者差异有统计学意义(P＜0.01)；同时被两种方法检出的155份临床样本中,非标记探针HRM技术检测到野生株75份(rt204M),变异株80份(55份rt204I、25份rt204V),变异检出率为51.6％(80/155)；基因测序法检测到野生株110份(rt204M),变异株45份(30份rt204I、15份rt204V),变异检出率为29.0％ (45/155),两种方法差异有统计学意义(P＜0.01).结论 非标记探针HRM技术是一种简单、灵敏、快速、特异的HBV P区rt204位点耐药突变检测方法.

模板纯化对HBV拉米呋啶耐药突变检测的检出率影响

目的:研究模板纯化与否对HBV拉米呋啶耐药突变检测的检出率影响。方法:采用离心柱纯化法及直接煮沸裂解法分别处理HBV DNA定量小于104IU/ml的60例患者血清标本,用同一HBV拉米呋啶耐药突变检测荧光PCR试剂盒检测,比较其检出率。结果:HBV DNA定量小于104IU/ml的60例患者血清标本,离心柱纯化组和煮沸裂解组的检出率分别为68.3%和38.3%。结论:低病毒载量的HBV血清样品经离心柱纯化模板后可以明显提高HBV拉米呋啶耐药突变检测的检出率。