农产品全产业链运行模式研究——以浙江寿仙谷为例

农产品全产业链运作模式是一种农业产业化创新经营模式,其运作关键是纵向一体化和紧密型多元化经营的有效协同,要实现农产品从种养源头到餐桌的全程质量安全,关键在于技术主导型和资源驱动型全产业链治理的有效整合。对浙江寿仙谷案例的研究表明,全产业链运作模式为解释当前农产品质量安全问题产生的深层次原因提供了新的视角,也为有效治理农产品质量安全问题提供了新的理论依据。

基于食品安全的涉农全产业链运行模式研究——以浙江寿仙谷为例

国际涉农跨国企业为解决食品安全问题普遍采用全产业链运行模式。对浙江寿仙谷全产业链运行模式的案例研究表明,实施全产业链运行模式能有效消除农产品质量安全隐患,在整合农业及其他产业资源的同时有效地推动农业产业化纵深发展。

浙江省中药材生产现状及特色道地药材发展趋势

目的:分析2021年浙江省中药材种植面积、产量等数据,对浙江省中药资源种类多样性进行研究,为相关政策规划的制定提供参考依据。方法:采用Microsoft Excel 2010和Origin 2021软件,从全省中药材种植情况、县域中药材种植情况及道地药材等多个角度对2021年度浙江省中药材生产情况进行统计分析。结果:2021年浙江省中药材种植面积为5.74万hm^(2),其中多年生草本类、藤本类和乔木类中药材占比较高;“浙八味”生产总体保持稳定,新“浙八味”在种植面积、产量和产值上分别同比2020年增长3.60%、6.20%、4.11%。此外,黄精种植发展较快。结论:浙江省中药材产业整体呈现良好的发展态势,逐步形成了一批特色、优势道地品种,但部分道地药材种植出现一定萎缩,应综合考虑当地社会经济发展需求与临床用药需求,通过制定政策等形式给予引导和支持。

寿仙谷牌铁皮石斛含片增强免疫力功能的药效学研究

通过小鼠淋巴细胞转化试验、SRBC诱导小鼠DTH实验、抗体生成细胞检测、小鼠血清溶血素的测定、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬CRBC试验、NK细胞活性测定、脏器/体重比值,研究寿仙谷牌铁皮石斛含片对实验小鼠免疫力的影响.结果发现:与阴性对照组比较,中、高剂量组小鼠左后足部24h与0h厚度差值均增加、空斑数增多、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均增加.有此得出结论:寿仙谷牌铁皮石斛含片具有增强实验小鼠免疫力功能.

绞股蓝总皂苷激活Atgl诱导结肠癌细胞凋亡的作用研究

目的分析绞股蓝总皂苷(gypenosides,Gyp)对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用,并阐明其机制。方法采用Cell counting kit-8(CCK-8)法和流式细胞术检测细胞活力、细胞周期分布及凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印记(Western blot)分别检测mRNA和蛋白质表达水平;采用Bodipy染色检测脂滴数量。结果Gyp呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HCT116细胞增殖;Gyp显著增加G_(0)/G_(1)期HCT116细胞的比例,下调周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs,包括CDK2、CDK4和CDK6)蛋白的表达水平并上调p21和p27蛋白的表达水平;Gyp显著增加凋亡的HCT116细胞的比例,上调活化型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、活化型聚(ADP-核糖基)转移酶1[Cleaved Poly(ADP-ribose)polymerase 1,Cleaved PARP1]和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达水平并下调B淋巴细胞瘤-xl(B cell lymphoma-xl,Bcl-xl)蛋白的表达水平;Gyp显著降低HCT116细胞中脂滴的数量,下调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,Fasn)mRNA的表达水平并上调甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)mRNA及蛋白的表达水平;与Gyp单独处理相比,Gyp与阿格列他汀(Atgl inhibitor,Atgl抑制剂,简称Atgli)合用显著增加HCT116细胞中的脂滴数量、显著下调HCT116细胞的凋亡率,并降低Cleaved caspase-3的表达水平。结论Gyp通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制HCT116细胞增殖,其机制与Atgl介导的脂代谢有关。

不同药物诱导小鼠胸腺萎缩模型的对比研究

目的:对比研究地塞米松、氢化可的松、聚肌胞苷酸以及苯甲酸雌二醇分别诱导的小鼠胸腺萎缩模型。方法:将55只雌性ICR小鼠分为5组,除对照组外分别给予地塞米松磷酸钠、氢化可的松、聚肌胞苷酸与苯甲酸雌二醇建立模型。观察其胸腺指数、脾脏指数、血细胞变化、血浆中MDA与GST水平、胸腺病理学检测、胸腺细胞凋亡以及相关蛋白的表达情况。结果:各模型组小鼠胸腺指数较对照组均显著降低(P<0.01)。血细胞分析结果中聚肌胞苷酸组白细胞计数低于对照组(P<0.01),雌二醇组高于对照组(P<0.05);雌二醇组淋巴细胞百分率较对照组降低(P<0.01)。地塞米松组、氢化可的松组血浆中MDA含量较对照组显著性降低,雌二醇组较对照组显著性升高(P<0.01)。胸腺HE病理学染色结果表明地塞米松与氢化可的松诱导的胸腺皮质细胞大量坏死,组织萎缩严重,而聚肌胞苷酸与苯甲酸雌二醇所诱导的模型则较轻。胸腺TUNEL检测结果发现对照组小鼠胸腺仅存在极少数细胞出现凋亡,其余组别胸腺皮质均出现大量的细胞凋亡,其中雌二醇组皮质髓质均出现较为明显的凋亡。蛋白电泳结果中地塞米松组与氢化可的松组小鼠胸腺中所测凋亡及炎症蛋白的表达量均显著低于对照组;聚肌胞苷酸组caspase-3、NF-κB激活水平与对照组无显著性差异,但其caspase-3、NF-κB蛋白的表达总量均高于对照组(P<0.05);雌二醇组NF-κB蛋白磷酸化水平以及TNF-α蛋白的表达低于对照组(P<0.05),而IL-6的表达量高于对照组(P<0.05)。结论:4种药物均能够成功诱导胸腺的萎缩,但胸腺萎缩程度存在较大差异,故药效评价时应注意模型的选择。

基于网络药理学的灵芝作用机制研究

通过TCMSP数据库,结合化合物含量信息,从灵芝中筛选出类药性好且含量较高的化合物;通过TCMSP、TCMIP、Swiss Target Prediction、SuperPred等数据库,预测化合物相应靶点;采用STRING数据库,构建靶点蛋白质互作(PPI)网络,并筛选出核心靶点;通过Enrichr数据库,预测核心靶点对应疾病;通过Cytoscape的ClueGo模块,对核心靶点进行基因本体分析(GO)及通路富集分析(KEGG),最终建立化合物-靶点、化合物-靶点-疾病-通路网络。根据试验结果,共筛选出60种化合物的22个核心靶点;核心靶点对应的疾病集中在肿瘤、自身免疫性疾病等;GO分析发现,核心靶点参与了88个生物过程,主要分为8个类别;KEGG分析发现,核心靶点参与了5个代谢通路,分为4个类别;化合物-靶点-疾病-通路网络显示了化合物、靶点、疾病、通路间的相互作用,如Lucialdehyde C、Ganoderic aldehyde A可通过DRD2靶点及22个相关生物功能通路,对30种疾病发挥作用。

基于UPLC-QTOF-MS和多元统计分析的赤芝道地性研究

目的:研究不同产地、不同栽培方式对赤芝中三萜类成分的影响,为赤芝的道地性研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS)对120批赤芝样品进行化学成分分析。将赤芝样品按照浙产/非浙产、浙产段木/非浙产段木、浙产段木/浙产野生、不同发育时期进行模式分类,应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对赤芝样品进行多元统计分析,用变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果:从供试样品中鉴定出13种响应高、分离度好的灵芝酸类成分。筛选发现,浙产赤芝中灵芝酸D、灵芝烯酸D显著高于非浙产赤芝,可作为浙产赤芝的标志性成分;浙产段木赤芝中灵芝酸D、灵芝酸B、灵芝酸C1、灵芝酸G的含量显著高于非浙产段木赤芝;段木赤芝中灵芝酸A等6个成分均显著高于野生赤芝;随着赤芝子实体逐渐成熟(现蕾期→开伞期→成熟期→采摘期),多数灵芝酸含量呈现下降趋势,但部分样品采摘期(喷孢后)灵芝酸含量较成熟期(喷孢前)高,值得进一步研究。结论:浙产与非浙产赤芝成分差异较明显,且浙产段木赤芝与非浙产段木赤芝成分也存在明显差异,可能与生态环境、种植方式有关。

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的杭白菊道地性研究

目的:鉴定不同产区胎菊、朵菊的主要差异化学成分,为杭白菊的道地性研究提供依据。方法:收集不同产区的杭白菊胎菊和朵菊样品,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行化学成分分析,综合运用数据非依赖扫描(DIA)与数据依赖扫描(DDA),结合本地及在线数据库,鉴定主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,对胎菊与朵菊、不同产区胎菊与朵菊、道地产区(桐乡)与非道地产区胎菊与朵菊进行模式分类,以分析过程中变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出主要的差异化合物。结果:从供试样品中共鉴定出33个化合物。胎菊与朵菊化学轮廓差异明显,D-甘露糖、羟基芫花素、槲皮素等为主要的差异化合物;不同产区胎菊化学轮廓差异较明显,其中桐乡胎菊中鸟苷、姜糖酯B等成分含量显著高于其他产区,可作为鉴定道地产区的标志性成分;不同产区朵菊的差异相对较小,但浙江和其他省份(江苏、河南)产朵菊有一定差别,红车轴草素-7-O-β-D-葡萄糖苷为主要的差异化合物。结论:不同产区胎菊的差异较大,而朵菊的差异较小,可能的原因为杭白菊成熟后,化学成分的含量趋于稳定。

基于网络药理学的铁皮石斛免疫调节作用机制

研究表明,铁皮石斛在增强人体免疫力方面具有良好作用。为了明确铁皮石斛潜在的免疫活性成分及其作用机制,本研究从PubChem、SciFinder数据库中收集铁皮石斛小分子化合物及其化学结构相关的研究,然后通过Swiss ADME筛选优效目标化合物。通过Swiss Target Prediction预测优效化合物的靶点集,并通过Genecards数据库获取免疫调节相关靶点集,两者取交集得到铁皮石斛免疫调节相关靶点集,进一步通过Cytoscape软件建立化合物-靶点网络图,将交集靶点导入STRING构建蛋白互作网络(PPI),筛选出核心靶点。通过R的Cluster Profiler包对核心靶点进行功能富集分析,包括基因本体分析(GO)及通路富集分析(KEGG),最终建立化合物-靶点-生物功能网络。最终,共筛选出优效化合物124个,对应靶点421个;与免疫调节相关化合物58个,对应靶点60个;其中黄酮类化合物对应的免疫靶点较多,可能为主要的免疫活性成分。得到9个免疫调节相关核心靶点,GO分析发现这些核心靶点共参与了2059个条目,KEGG分析获得153个代谢通路。本研究通过化合物-靶点-生物功能网络展示了铁皮石斛多成分、多靶点、多通路的作用特点,为后续作用机制的深入研究和验证提供了可行方向。

荷叶水提取物的急性毒性及辅助降血脂功效研究

目的:评价荷叶水提取物的急性毒性及辅助降血脂功效,为荷叶水提取物在功能食品及药品中的开发利用提供依据。方法:通过大鼠急性经口毒性试验考察其安全性;通过考察荷叶水提取物对高脂血症模型大鼠体重、血脂、体脂、肝脏,以及肝脂肪变性HepG2细胞脂质代谢的影响,评价其辅助降血脂功效。结果:雄性大鼠LD50为7.5 g·kg^(-1) BW,雌性大鼠LD50为6.1 g·kg^(-1) BW,平均LD50为6.7 g·kg^(-1) BW,安全性良好。与模型对照组相比,各剂量荷叶水提取物大鼠的血清甘油三酯(TG)水平明显降低,高、低剂量组大鼠的血清总胆固醇(TC)水平均明显降低。此外,中、低剂量组大鼠1~4周体重、空腹体重降低,中剂量组大鼠肝脏重量降低。荷叶水提取物对肝脂肪变性HepG2细胞内脂质含量影响不显著。结论:荷叶水提取物安全性较高,为实际无毒级,具有较好的辅助降血脂功效,可以广泛应用于降脂产品中。

去壁灵芝孢子粉改善乳腺癌患者辅助化疗期间癌因性疲乏研究

目的观察去壁灵芝孢子粉对乳腺癌术后辅助化疗患者癌因性疲乏的防治效果,为使用现代工艺加工的传统中药有效改善肿瘤患者生活质量提供依据。方法采用随机数字表法将浙江省肿瘤医院2021年11月—2023年3月收治的74例接受乳腺癌术后辅助化疗的女性患者分为治疗组(37例)和对照组(37例)。2组均给予4周期表柔比星(或多柔比星脂质体)联合环磷酰胺辅助化疗及相应的对症治疗;治疗组化疗同时口服去壁灵芝孢子粉2 g·d^(-1)治疗,对照组口服安慰剂对照。对比分析2组治疗前后癌因性疲乏发生率及疲乏严重程度、T淋巴细胞亚群、血清炎症因子、肠道菌群变化,以及药物对血常规、肝肾功能的影响。结果治疗组化疗后癌因性疲乏发生率及Piper疲乏修正量表评分显著低于对照组(P<0.05);CD3^(+)、CD4^(+)、CD3-CD56^(+)比例较对照组显著升高(P<0.05),而CD8^(+)比值较对照组显著降低(P<0.05);IL-2、IL-10计数高于对照组(P<0.05),而IL-6、IL-8、C反应蛋白计数低于对照组(P<0.05);白细胞、中性粒细胞及血小板计数显著高于对照组(P<0.05);肠道菌群在属水平普拉梭菌丰度高于对照组;2组肝肾功能指标无明显差异。结论去壁灵芝孢子粉能显著降低乳腺癌患者辅助化疗期间癌因性疲乏的发生率及疲乏程度,抑制炎症因子,调节肠道菌群及机体免疫。

基于精益理念的中药制药工业数据挖掘及生产工艺持续改进策略研究:以去壁灵芝孢子粉制药过程为例

在中药工业数字化转型进程中,如何高效治理和分析工业数据,科学挖掘并利用其中蕴藏的有价值信息来指导中药生产制造,一直是中药制药领域的研究热点和应用难点。该研究针对中药制药工艺较为粗放、产品质量一致性有待提高等现状,将贝叶斯网络、卷积神经网络、帕累托多目标优化算法等先进计算工具与Shewhart控制图、过程性能指数等精益六西格玛分析工具相结合,提出一种可深入挖掘历史工业数据,指导制药工艺持续改进的策略,并以去壁灵芝孢子粉生产制造过程为研究载体进行验证。通过该策略优化,获得了可使去壁灵芝孢子粉水分、细度、粗多糖和总三萜等关键质量属性的过程性能指数Ppk均不小于1.33的关键参数可行区间组合。结果表明,该方法具有较高的工业应用价值,为中药生产工艺的持续改进提供了实用方法。

基于UPLC-Q-TOF-MS的不同月份铁皮石斛次生代谢物动态变化规律研究

目的 探究铁皮石斛中次生代谢产物在不同月份的变化规律,为铁皮石斛资源的精细化开发提供依据。方法 利用UPLC-Q-TOF-MS结合分子网络技术快速鉴定铁皮石斛中的次生代谢产物,并对连续12个月的铁皮石斛样品中酚类、黄酮等化合物的相对含量进行比较分析。结果 共鉴定出9类56种次生代谢产物,其中酚类、黄酮及萜类的相对含量均在11月达到最高。结论 11月可作为铁皮石斛的最佳采收期,该研究有助于铁皮石斛资源的精准利用。

基于高光谱技术的灵芝孢子粉破壁率快速检测方法研究

目的 利用高光谱技术结合化学计量学建立灵芝孢子粉破壁率快速无损的检测方法。方法 采集不同破壁率灵芝孢子粉样品的高光谱图像,选定感兴趣区域后计算获得各样品可见-短波近红外波段(397~1 004 nm)内的光谱数据;比较运用标准正态变量变换、多元散射矫正、Savitsky-Golay(SG)平滑、小波变换、SG平滑+标准正态变量变换及SG平滑+多元散射矫正6种光谱预处理方法,竞争性自适应重加权、连续投影算法、无信息变量选择、最小角回归、遗传算法5种特征波段提取方法以及偏最小二乘法、支持向量回归、极限学习机回归、多层感知机回归及LightGBM回归5种算法所建立的定量校正模型预测性能。结果 获得最优预测性能的算法组合为SG平滑+竞争性自适应重加权特征波段选择+偏最小二乘;基于该算法组合建立的定量校正模型在破壁率区间为90%~100%的灵芝孢子粉样品预测集决定系数为0.868 2,均方根误差为0.011 7;将选定的最优算法组合应用于构建样品破壁率区间为0~100%的定量校正模型,计算测试集决定系数为0.973 1,均方根误差为0.049 3,表现出良好的泛化能力。结论 所建立的定量检测模型可以实现对灵芝孢子粉破壁率的快速、无损检测,为破壁灵芝孢子粉及其产品的质量控制提供技术支撑。

去壁灵芝孢子粉片的含量测定与免疫调节及心脏保护功能研究

目的 研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法 首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心肌及内皮细胞氧化应激模型、脂多糖诱导的小胶质细胞炎症模型的影响,通过巨噬细胞形成能力、巨噬细胞吞噬能力、抗神经炎症能力、心脏收缩舒张改善能力、抗心肌及内皮细胞氧化应激损伤能力等多个指标评估其免疫调节及心脏保护作用。结果 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片可以提高巨噬细胞形成及吞噬能力,改善心脏收缩舒张功能,减少神经炎症并缓解心肌及内皮细胞因氧化应激而造成的损伤,从而起到免疫调节和心脏保护作用。结论 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片有望用于免疫功能调节及心脏功能保护。

基于非酒精性脂肪肝细胞模型的荷叶水提物降脂作用机制研究

目的研究荷叶水提物、荷叶碱、原荷叶碱及脱氢荷叶碱对脂代谢通路AMPK/SREBP1/ACC1的影响。方法采用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)对荷叶水提物进行化学成分分析,并用FFA诱导的非酒精性脂肪肝HepG2细胞模型和BODIPY染色进行胞内脂质蓄积情况检测,用Western Blotting分析AMPK、SREBP1及ACC1等蛋白的表达水平。结果从荷叶水提物中共鉴定出15种化合物,主要为生物碱类和黄酮类化合物。FFA诱导后,荷叶碱、原荷叶碱均能降低HepG2细胞内脂质含量,下调升脂蛋白SREBP1及p-ACC1,并上调降脂蛋白p-AMPK的表达水平。此外,荷叶碱、原荷叶碱与荷叶水提物联合可增强降脂效果。结论荷叶碱及原荷叶碱可能为荷叶水提物中的主要降脂成分,其作用机制与调控AMPK/SREBP1/ACC1通路有关。

灵芝新品种‘仙芝3号’的选育

通过种质资源收集,结合全基因组测序辅助分析,并进行分离初筛、小区品比、两年三地区域实验和示范推广,选育出灵芝新品种‘仙芝3号’。与对照(‘仙芝1号’和‘仙芝2号’)相比,‘仙芝3号’菌丝束粗,菌丝密度小于‘仙芝1号’、大于‘仙芝2号’,在不同温度(10、20、30℃)条件下的生长速度显著降低(P<0.05);三者之间存在明显的拮抗现象;菌盖厚度显著增加,菌盖横径显著变小,菌柄长度显著变短(P<0.05);区域实验时,现蕾早5、6 d,成熟孢子弹射早12、14 d;污染率显著降低(P<0.05);子实体多糖、三萜及甾醇含量(以齐墩果酸计)分别提高7.64%、5.71%和15.76%、11.53%,孢子粉多糖和甘油三油酸酯分别提高25.79%、24.80%和35.68%、36.07%,差异均显著(P<0.05);示范推广时,子实体、孢子粉的产量及有效成分含量稳定。结果表明,‘仙芝3号’是一个综合性状较为优良的灵芝新品种。

基于简易雾化设备脂多糖吸入诱导小鼠急性肺炎模型研究

目的评价简易雾化设备构建的脂多糖吸入诱导小鼠急性肺炎模型。方法脂多糖雾化吸入造模后,不同时间点观察小鼠体质量与肺灌洗液中总蛋白、一氧化氮(nitric oxide,NO)、白细胞水平的变化,同时对其肺组织进行HE、Masson以及TUNEL染色病理学检测,观察模型构建后动物的恢复情况。结果与对照组比较,造模后模型小鼠体质量显著下降(P<0.01),肺灌洗液中总蛋白水平与白细胞数显著上升(P<0.01),NO水平显著降低(P<0.01)。肺部病理学检查结果表明,模型组小鼠肺组织损伤严重,并出现纤维化,且存在大量细胞凋亡,与对照组有显著差异。结论利用简易雾化设备可成功构建脂多糖诱导的小鼠急性肺炎模型,模型较为稳定,可用于急性肺炎药效的筛选。

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的白术道地性研究

目的对不同产地白术药材的化学成分进行系统分析,为白术的道地性研究提供依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS),结合质谱分子网络技术,快速鉴定白术的主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对安徽、河北、浙江的25批白术进行多元统计分析,用VIP值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果不同产地的白术化学差异较为明显,共鉴定出10个差异化合物,其中浙江白术的姜黄烯、AtractylmacrolD、白术内酯Ⅲ、3β-羟基苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、β-Vatirenene和苍术酮等成分显著高于安徽或河北样品,可作为潜在的道地性标志物。结论本研究为全面评价白术药材的质量和道地性提供了依据,并发现不同产地白术的化学成分差异较大,可能与环境、品种和种植方式等有较大关系。