东海乌参重金属脱除工艺的研究

东海乌参是众多海参品种中的重要一类,资源丰富,营养价值高,但其体壁重金属含量高,不能被充分开发利用。为探索东海乌参体表重金属的脱除方法,研究了各种重金属在东海乌参体壁上的分布状况,并分别采用化学法和酶-化学法脱除东海乌参体表重金属,对浸泡试剂和温度、酶类型和用量、处理时间等工艺条件进行优化,结果发现,采用酶-化学法脱除重金属,从外观品质和脱除效果上,都优于化学法。最优的脱除条件是采用0.10%(w/w)的木瓜蛋白酶,在37℃酶解1h,再用2.0%(w/v)食品级柠檬酸浸泡48h。经过酶-化学法处理后的东海乌参重金属脱除率可达90%以上。

重组大肠杆菌产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶分批补料发酵工艺

为了获得低成本的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL),在5L发酵罐发酵中对工程菌E.coliBL21(DE3)/pET28b-TLL的分批补料发酵工艺进行研究。结果表明:以葡萄糖为碳源的补料培养基,采用溶氧(DO)反馈补料策略进行补料,当OD600=60时降温至28℃,分2次加入终质量浓度为30g/L乳糖进行诱导表达。优化后TLL的表达量提高到798.5U/L,是优化前的2.4倍。本研究为规模化发酵重组菌生产TLL奠定了基础。

重组青霉素G酰化酶拆分制备(S)-邻氯苯甘氨酸

对产青霉素G酰化酶的重组枯草芽胞杆菌发酵产酶条件进行优化,确定优化后的发酵条件:可溶性淀粉10g/L、蛋白胨12 g/L、酵母粉3 g/L、NaCl 10 g/L;pH 7.5、培养温度37℃、装液量80 mL(500 mL三角瓶)、培养28 h,青霉素G酰化酶的表达水平由最初的7.34 U/mL提高至18.23 U/mL。以表达青霉素G酰化酶的枯草芽胞杆菌发酵液为酶源,在水相中对映选择性催化N-苯乙酰-(R,S)-邻氯苯甘氨酸制备(S)-邻氯苯甘氨酸,当底物浓度为100mol/L时转化4 h,转化率达44.2%。对底物浓度为80 mmol/L反应液中的(S)-邻氯苯甘氨酸进行分离,达到理论收率的94.29%(以N-苯乙酰-(R,S)-邻氯苯甘氨酸的0.5倍摩尔量为理论产率),e.e.值大于99.9%。170℃条件下,N-苯乙酰-(R)-邻氯苯甘氨酸与苯乙酸共熔消旋为N-苯乙酰-(R,S)-邻氯苯甘氨酸可用于循环拆分。