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阴沟肠杆菌B8拮抗活性基因‘admA’及上游调控序列的克隆与功能鉴定
被引量:
1
1
作者
朱军莉
李德葆
余旭平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期495-502,共8页
为了阐明水稻白叶枯病拮抗菌阴沟肠杆菌B8的作用机理,文章采用转座子标签法和染色体步移技术克隆到突变株B8B中Tn5插入位点周边拮抗活性相关片段,并通过基因敲除验证了获得的拮抗相关片段admA’上游调控序列的功能。以转座子中Kan抗性...
为了阐明水稻白叶枯病拮抗菌阴沟肠杆菌B8的作用机理,文章采用转座子标签法和染色体步移技术克隆到突变株B8B中Tn5插入位点周边拮抗活性相关片段,并通过基因敲除验证了获得的拮抗相关片段admA’上游调控序列的功能。以转座子中Kan抗性基因为标签,克隆了B8B菌株中Tn5插入位点左侧2 608 bp序列,经两次染色体步移得到Tn5插入位点右侧的2 354 bp序列。序列拼接后获得B8菌株拮抗相关序列4 611 bp的Bcontig。生物信息学分析显示该序列含有7个ORF,分别对应于3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)基因的部分编码区、2个LysR家族转录调控因子、弧菌假设蛋白VSWAT3-20465及成团泛菌(Pantoea agglomerans)andrimid生物合成基因簇的admA、admB和部分admC基因序列。B8B菌株Tn5插入分别位于同源于弧菌假设蛋白的anrPORF及‘admA’基因上游200 bp和894 bp处。通过同源重组技术,借助敲除质粒pMB-BG,获得拮抗活性消失的突变株B-1和B-3。结果表明B8B突变株中Tn5的插入可能影响了anrP蛋白的转录和表达,进而调控拮抗物质编码基因簇的生物合成。B8菌株中拮抗物质相关基因是类似于andrimid生物合成基因簇的基因家族,其上游调控区对该抗生素的生物合成具有重要的作用。
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关键词
阴沟肠杆菌B8
拮抗机理
Andrimid
染色体步移
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职称材料
响应面分析法优化雷丸多糖提取工艺的研究
被引量:
9
2
作者
毕春慧
沈莲清
《食品科技》
CAS
北大核心
2010年第8期217-221,共5页
采用响应面分析法优化雷丸多糖的提取工艺。采用单因素实验选取实验因素与水平。根据Central Composites实验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析法。在分析各因素显著性及其交互作用的基础上,得出雷丸多糖的最佳提取工艺条件,即提取温...
采用响应面分析法优化雷丸多糖的提取工艺。采用单因素实验选取实验因素与水平。根据Central Composites实验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析法。在分析各因素显著性及其交互作用的基础上,得出雷丸多糖的最佳提取工艺条件,即提取温度100℃,料液比1∶21,提取时间93min,提取2次,测得的雷丸多糖得率为23.12%。
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关键词
雷丸
多糖
提取
响应面分析
原文传递
题名
阴沟肠杆菌B8拮抗活性基因‘admA’及上游调控序列的克隆与功能鉴定
被引量:
1
1
作者
朱军莉
李德葆
余旭平
机构
浙江
大学
动物科学
学院
浙江工商大学食品与生物环境工程学院
浙江
大学
生物
技术研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期495-502,共8页
基金
国家高技术研究发展规划项目("863"计划)(编号:104-04-01-01)资助
文摘
为了阐明水稻白叶枯病拮抗菌阴沟肠杆菌B8的作用机理,文章采用转座子标签法和染色体步移技术克隆到突变株B8B中Tn5插入位点周边拮抗活性相关片段,并通过基因敲除验证了获得的拮抗相关片段admA’上游调控序列的功能。以转座子中Kan抗性基因为标签,克隆了B8B菌株中Tn5插入位点左侧2 608 bp序列,经两次染色体步移得到Tn5插入位点右侧的2 354 bp序列。序列拼接后获得B8菌株拮抗相关序列4 611 bp的Bcontig。生物信息学分析显示该序列含有7个ORF,分别对应于3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)基因的部分编码区、2个LysR家族转录调控因子、弧菌假设蛋白VSWAT3-20465及成团泛菌(Pantoea agglomerans)andrimid生物合成基因簇的admA、admB和部分admC基因序列。B8B菌株Tn5插入分别位于同源于弧菌假设蛋白的anrPORF及‘admA’基因上游200 bp和894 bp处。通过同源重组技术,借助敲除质粒pMB-BG,获得拮抗活性消失的突变株B-1和B-3。结果表明B8B突变株中Tn5的插入可能影响了anrP蛋白的转录和表达,进而调控拮抗物质编码基因簇的生物合成。B8菌株中拮抗物质相关基因是类似于andrimid生物合成基因簇的基因家族,其上游调控区对该抗生素的生物合成具有重要的作用。
关键词
阴沟肠杆菌B8
拮抗机理
Andrimid
染色体步移
Keywords
Enterobactor cloacae B8
antagonistic mechanism
andrimid
chromosome walking
分类号
S476.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
响应面分析法优化雷丸多糖提取工艺的研究
被引量:
9
2
作者
毕春慧
沈莲清
机构
浙江工商大学食品与生物环境工程学院
出处
《食品科技》
CAS
北大核心
2010年第8期217-221,共5页
基金
浙江省教育厅项目(YK2008063)
文摘
采用响应面分析法优化雷丸多糖的提取工艺。采用单因素实验选取实验因素与水平。根据Central Composites实验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析法。在分析各因素显著性及其交互作用的基础上,得出雷丸多糖的最佳提取工艺条件,即提取温度100℃,料液比1∶21,提取时间93min,提取2次,测得的雷丸多糖得率为23.12%。
关键词
雷丸
多糖
提取
响应面分析
Keywords
Omphalia
polysaccharides
extraction
response surface method
分类号
R284.2 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
阴沟肠杆菌B8拮抗活性基因‘admA’及上游调控序列的克隆与功能鉴定
朱军莉
李德葆
余旭平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
2
响应面分析法优化雷丸多糖提取工艺的研究
毕春慧
沈莲清
《食品科技》
CAS
北大核心
2010
9
原文传递
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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