蝉花虫草酒延寿及抗氧化作用的研究

通过果蝇寿命实验及果蝇体内SOD活性、MDA含量的测定,研究蝉花虫草酒的延寿及抗氧化作用。结果显示,白酒对果蝇寿命及抗氧化有负面作用,而蝉花的加入能抵消白酒的负面影响,并能一定程度上提高雌雄果蝇的平均寿命,半数死亡时间及最高寿命,提高果蝇体内的SOD活性,降低其MDA含量。综合所有实验结果,发现1.0%剂量的蝉花虫草酒延寿及抗氧化效果最为显著(p < 0.05)。

蝉花虫草酒免疫功能研究

本研究通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和二硝基氟苯诱导小鼠DTH实验、抗体生成细胞实验和血清溶血素实验、小鼠碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验及NK细胞活性测定实验分别研究了蝉花虫草酒对小鼠细胞免疫、体液免疫、单核巨噬细胞功能和NK细胞活性的影响作用。结果表明,蝉花虫草酒低、高剂量组均无明显细胞免疫增强功能;高剂量组能提高小鼠的溶血空斑数和小鼠抗体积数,具有增强体液免疫功能;与阴性对照组比较,高剂量组能够明显提高小鼠的碳廓清吞噬指数和巨噬细胞吞噬鸡红细胞指数,具有增强单核巨噬细胞的功能;高、低剂量组无明显提高小鼠NK细胞活性的作用。根据上述实验结果和2003版《保健食品检验与评价技术规范》的规定判定蝉花虫草酒有增强机体免疫力的作用。

桦褐孔菌抗肿瘤活性部位的筛选及化学成分研究

目的研究桦褐孔菌抗肿瘤活性部位及化学成分。方法将桦褐孔菌乙醇提取物(FT)、石油醚萃取物(FA)、乙酸乙酯萃取物(FB)、正丁醇萃取物(FC)以及水层萃余物(FD)作用于人肝癌Hep G2、胃癌SGC-7901及肺癌A549细胞,检测各提取部位对肿瘤细胞的生长抑制活性,并进一步对活性部分进行化学成分研究。结果活性数据分析表明FT、FA及FB均有抑制肿瘤活性,IC50值分别为56、28、47mg/L。从活性部位FA及FB分离得到10个化合物,分别鉴定为羊毛甾醇(1)、3β-羟基8,24-羊毛甾二烯-21-醛(2)、桦褐孔菌醇(3)、白桦脂醇(4)、5α,8α-表二氧-6,22-麦角甾二烯-3-醇(5)、4,6,8(14),22-麦角甾四烯-3-酮(6)、豆甾-4-烯-3-酮(7)、Inonotsuoxides B(8)、Inonotsutriols A(9)、胡萝卜苷(10)。结论 FA及FB是桦褐孔菌的抗肿瘤活性部位,从活性部位分离鉴定10个化合物,其中6、7、10首次在桦褐孔菌中发现。

桦褐孔菌乙酸乙酯部位化学成分及体外抗肿瘤活性研究

目的研究桦褐孔菌乙酸乙酯部位化学成分,初步筛选出具有抗肿瘤活性的单体化合物。方法用制备型高效液相、大孔树脂HPD100、Sephadex LH-20凝胶、小孔树脂MCI、硅胶等柱层析方法对桦褐孔菌乙酸乙酯部位进行分离纯化,综合应用光谱法(1HNMR、13CNMR、HRMS)鉴定结构。体外培养人胃癌SGC-7901、肝癌HepG2及神经胶质瘤U-87细胞,不同浓度(12. 5、25、50、100、200μmol/L)单体化合物刺激后,MTT法观察各单体化合物对肿瘤细胞增殖的影响。结果从乙酸乙酯部位分离鉴定12个成分(酚类、羊毛脂烷型三萜和甾醇),分别为:原儿茶醛(1)、4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮(2)、大黄酚(3)、Coelarthenol(4)、1,2-Benzenedicarboxylic acid dibuty ester(5)、栓菌酸(6)、柠檬酸三乙酯(7)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(8)、Aquilarin A(9)、1,4-benzenedicarboxylic acid 1-butyl-4-(2-methylpropyl) ester(10)、3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯(11)、(24S)-Ergost-7-en-3-ol (12)。结论化合物2、6、8具有较强的抗肿瘤作用,其中化合物2、9首次从桦褐孔菌中分离得到。

培育蝉花改善小鼠睡眠功能的试验研究

观察不同剂量的人工培养蝉花子实体及菌丝体对小鼠睡眠的改善作用,健康昆明小鼠,随机分成8组,每组10只.每天经口灌胃给予不同剂量的人工培养蝉花子实体及蝉花菌丝体,连续给予受试物30 d后进行直接睡眠作用试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏实验测定小鼠直接睡眠时间、戊巴比妥钠诱导的睡眠时间及阈下剂量的睡眠发生率、巴比妥钠诱导的睡眠潜伏时间.结果表明,与空白对照组比较人工培养蝉花子实体300 mg/kg、900mg/kg及菌丝体900 mg/kg对阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠一定的促进作用(P<0.05),且没有明显的剂量依赖关系;与空白对照比较,300 mg/kg人工培养蝉花子实体和900 mg/kg蝉花菌丝体对戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间有明显的延长作用,但不同剂量的两种受试药物对巴比妥钠睡眠潜伏期基本无影响,且均无直接至眠作用.人工培养蝉花子实体和蝉花菌丝体对小鼠睡眠有一定的改善作用.

蝉花和蝙蝠蛾拟青霉复合浸泡虫草酒免疫活性研究

本文通过0.45 g/kg∙BW/d (低剂量)和0.9 g/kg∙BW/d (高剂量)两个剂量组的复合虫草酒经口给予小鼠饲喂1个月实验,进行小鼠免疫器官系数、体液免疫功能和单核巨噬细胞活性的测定,研究复合虫草酒的免疫调节作用。结果表明,高剂量组复合虫草酒能够显著提高小鼠抗体积数,较空白对照组提高了62.94%;高、低剂量组均能明显提高小鼠的鸡红细胞吞噬指数,较对照组分别提高了44%和40%,吞噬百分率分别较对照组分别提高了21.57%和19.61%。高剂量组复合虫草酒具有提高小鼠抗体积数和增强小鼠单核巨噬细胞吞噬活性的作用。

乌岩岭自然保护区的虫草研究

该文对乌岩岭自然保护区的7种虫草类真菌(蝉花、细脚棒束孢、鲜红虫草、发丝线虫草、长座线虫草、小蝉草、蜂头线虫草)进行调查,并对几种虫草及其无性型进行讨论,为乌岩岭自然保护区虫草的进一步开发利用提供依据。

广东虫草研究进展

广东虫草在自然界十分稀有,是我国独有的虫草资源,其子实体可以进行人工培育。广东虫草具有较高的食用和药用价值,其体内含有的活性成分具有重要的药理活性。本文就近几年的研究成果,对广东虫草的药理作用、有效成分、人工栽培、安全性4个方面的研究展开论述,为广东虫草进一步研究和社会推广提供参考。

蝉花宝牌蝉花片免疫功能评价

将蝉花宝牌蝉花片(商品名)设低、中、高3个剂量组,分别相当人体推荐量的5、10、30倍,同时设阴性对照组(1%羧甲基纤维素钠),连续1个月经口给予小鼠不同剂量的样品,进行迟发型超敏反应(DTH)、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、抗体生成细胞检测、自然杀伤(NK)细胞杀伤活性和脾淋巴细胞转化等实验,以评估其免疫功能。结果表明,与阴性对照组比较,受试3个剂量组足跖肿胀度极显著增加(P<0.01);中、高剂量组溶血空斑数和血清溶血素抗体积数值均极显著增加(P<0.01),腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数显著增加(P<0.05,P<0.01);高剂量组NK细胞活性显著升高(P<0.05)。蝉花宝牌蝉花片(商品名)具有显著的免疫调节功能。

野外繁育蝉花菌株的筛选及分子标记分析

【目的】拟通过蝉花野外繁育菌株的子实体培养筛选和分子标记分析,建立蝉花野外繁育菌株鉴别体系,获得可用于生产的优质菌株。【方法】以蝉花A17-7-1菌株野外繁育获得的7个蝉花菌株进行子实体培养筛选,并用A17-7-1菌株特异的SCAR分子标记对菌株进行分析。经SCAR标记确认的繁育菌株再以ISSR分子标记分析判定繁育菌株遗传性状。【结果】经子实体培养筛选,2个菌株子实体产量高于A17-7-1;SCAR分子标记分析显示,从这2个子实体产量提高的菌株基因组NDA中扩增出A17-7-1菌株特有的DNA片段;ISSR分子标记分析表明,一株子实体产量明显提高的菌株与A17-7-1具有完全相同的条带,另一个子实体产量提高不显著的菌株有2个条带缺失。【结论】野外繁育蝉花可提高子实体产量,SCAR标记可快速鉴别菌株是否为繁育菌株,ISSR标记能够初步判断菌株遗传特性。

添加蝉花菌质饲料对鮰鱼养殖的效果评价分析

通过在鮰鱼养殖饲料中添加1%的人工培养采收蝉花子实体后的蝉花菌质,对鮰鱼死亡率、增重率、饲料系数、免疫功能及营养成分等进行分析。结果显示,与对照组相比,在鮰鱼养殖饲料中添加1%蝉花菌质对鮰鱼的死亡率、平均增重率、总产量等均无显著影响,对饲料系数及营养成分不会产生明显损失。但在提高鮰鱼机体免疫力方面效果明显,与对照组相比,试验组各项免疫指标升高有极显著差异(P < 0.01)。

蝉花菌质的改良和营养成分分析

通过米曲霉和酵母对蝉花菌质进行发酵改良以提高其蛋白质含量,采用国际通用的蛋白质评价方法对菌质改良前后蛋白质营养价值进行分析。结果显示,经过改良,蛋白质含量从14.60%增至26.16%,除半胱氨酸、谷氨酸、脯氨酸外的其余氨基酸含量均有所上升,单位蛋白质的质量有所下降,第一限制氨基酸从赖氨酸变为含硫氨基酸,综合来看,改良后菌质营养价值和氨基酸平衡性均高于改良前,是一种高蛋白、低胆固醇、低钠,富含膳食纤维、维生素和矿物质的优质原料。

蝉花子实体对几种微量营养素的富集筛选

本实验通过固体发酵,比较锌、锰、叶黄素、维生素D3、β-胡萝卜素、叶酸等几种微量营养素在蝉花子实体中的富集效果及其对生长的影响。在罐头瓶的小麦培养基中直接添加锌、锰、铬、叶黄素、维生素D3、β-胡萝卜素、叶酸等原料,发现最后培养所得蝉花子实体中,锌、锰、叶酸均有较好的富集效果,在0.25%添加量下,蝉花子实体中的锌含量由3.44 mg/100g升高至13.2 mg/100g,锰含量由0.91 mg/100g升高至10.3 mg/100g,叶酸含量由107 μg/100g升高至493 μg/100g,但锰原料组蝉花子实体生物量显著降低。进一步将固体培养扩大至培养盒,对锌、叶酸的添加浓度进行筛选,随着浓度上升,锌添加量0.9%时,在蝉花子实体中的富集量增加最快,超过0.9%,富集量的增速减缓,添加量达到1.5%,子实体生物量显著降低;叶酸添加量1.2%时,在蝉花子实体中富集量增加最快,而添加量达到1.5%,子实体生物量同样显著降低。

中国蜘蛛病原真菌物种多样性

蜘蛛是节肢动物门蛛形纲蜘蛛目一类动物的总称,蜘蛛病原真菌是以蜘蛛为寄主的一类病原体。蜘蛛病原真菌不仅在持续控制蜘蛛种群和维护生态平衡上具有不可代替的作用,而且一些种类富含多种生物活性,具有重要的经济价值。本研究以蜘蛛病原真菌为研究对象,结合经典形态学和分子系统学分类方法,依据虫生真菌新的分类系统对标本及分离菌株进行物种鉴定,确定蜘蛛病原真菌的物种多样性。研究发现,从全国各地采集到蜘蛛病原真菌标本80份,共发现有2科8属21种,其中新种3个(已发表),未知种7个,新记录种1个。其中,紫孢菌属是优势属,相对多度达26.25%;其次是球束梗孢属,相对多度为20.00%;而刺束梗孢属仅1种1株。本研究将部分类棒束孢重新修订为刺束梗孢和鳞翅虫草属,并重点描述了中国新记录种—灰绿孢菌。此外,本研究收集了全球已发表的蜘蛛病原真菌相关文献,统计所有已发表的菌种,共计18属119种,均分布在子囊菌门Ascomycota,肉座菌目Hypocreales。多数种类分布在虫草科Cordycipitaceae,约12属106种;少数分布在线虫草科Ophiocordycipitaceae,4属11种;生赤壳科Bionectriaceae有1属1种,分类地位介于线虫草科与麦角菌科之间的未确定属绿孢菌属Chlorocillium v1种。麦角菌科Clavicipitaceae尚未发现。

蝉花水提物及蝉花复方对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的阐明蝉花水提物及蝉花子实体复方对小鼠免疫功能的影响,探讨其调节免疫的作用机制。方法 BALB/c小鼠70只随机分为7组(n=10):对照组,蝉花水提物高、中、低剂量(0.300、0.150、0.075 g/kg)组,蝉花复方高、中、低剂量(1.2、0.6、0.3 g/kg)组,ig给药15 d后检测小鼠胸腺指数、脾脏指数,通过脾淋巴细胞转化实验、溶血空斑实验以及碳廓清实验,观察淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬功能和血清溶血素形成情况,评价蝉花水提物及蝉花子实体复方的免疫调节作用。结果与对照组比较,低、中剂量蝉花水提物,中剂量蝉花子实体复方均能明显增加小鼠免疫器官脾脏、胸腺指数(P<0.05);低剂量蝉花水提物,低、中、高剂量蝉花子实体复方均能促进淋巴细胞增殖反应(P<0.05);低剂量蝉花水提物,低、中剂量蝉花子实体复方均能提高巨噬细胞吞噬功能(P<0.05)。结论蝉花水提物及蝉花子实体复方均可明显提高机体免疫力,且复方在调节免疫功能强度方面较单用蝉花水提物有一定优势,说明蝉花预防和治疗免疫功能失调相关疾病有较好的应用前景。

与蝉花有关的虫草菌生物多样性的研究Ⅱ:重要药用真菌蝉花有性型的发现及命名

我国重要药用真菌蝉花的分类地位和学名在国内外长期混乱,因其有性型未被发现,长期以来误作为根据巴西标本命名的Isaria (Paecilomyces) cicadae。作者最近在井冈山发现了其有性型,研究了标本及分离物的形态特征及多位点系统发育特征,并与GenBank中相关种类的序列进行了对比,证明I.cicadae是物种复合群,确定蝉花是虫草科虫草属中的新种,使用传统药用真菌蝉花的古老名称将其命名为Cordycepschanhua。蝉花子座淡橙色到淡桔黄色,子囊壳半埋生,475–602×222–319μm,子囊孢子246–360×1.5–1.8μm,分孢子圆筒形,6.4–13.8×2.1–3.1μm。孢梗束淡黄色至淡黄褐色,分生孢子长椭圆形或圆筒形,3.5–10.5×1.5–4.5μm。

与蝉花有关的虫草菌生物多样性的研究Ⅰ:文献考证

蝉花是我国重要药用真菌,但长期以来其名称特别是学名的使用一直混乱。本文从古代医药典籍记载确认,"蝉花"是历史最久、使用最广的中名,对于其他中名具有优先权。其学名Isariacicadae系Miquel(1838)根据巴西标本命名,但模式标本已失,原描述文字及插图均极其简单,与蝉花形态差异较大。其有性型迄今未发现,曾先后被认为是小蝉草Ophiocordyceps sobolifera和大蝉草Tolypocladium dujiaolongae(=Cordyceps cicadae Shing)。本文根据文献考证澄清了国内外关于小蝉草和大蝉草的误用,分析了长期以来大量日本文献中的命名混乱对我国认知蝉花的影响,并质疑Ⅰ.cicadae在中国及其他地区的分布,提出它是一复合种,因此蝉花的分类地位及学名需要进一步研究。

蝉花子实体抗疲劳作用研究

目的研究蝉花子实体的抗疲劳、增强运动耐力作用。方法 ICR雄性小鼠随机分为对照组、人参乙醇提取物(阳性药,2.5 g/kg)组以及蝉花子实体低、中、高剂量(0.075、0.150、0.300 g/kg)组,连续ig给药15 d后,测定小鼠负重游泳力竭时间,试剂盒法检测小鼠经游泳运动后肝糖原、肌糖原、全血乳酸(LD)、血清尿素氮(BUN)、超氧化歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)等与疲劳相关联的生化指标变化。结果与对照组比较,蝉花子实体低、中剂量对小鼠力竭游泳时间有显著延长作用(P<0.05),低剂量组LD水平显著下降(P<0.05),高剂量LDH含量显著升高(P<0.05),低剂量组SOD含量显著升高(P<0.05);中、高剂量组BUN含量显著降低(P<0.05),低剂量组肝糖原水平显著升高(P<0.05);中剂量组肌糖原水平显著升高(P<0.05)。结论蝉花子实体对运动后的小鼠有抗疲劳作用。

虫草文化及科学史

根据考古和史料证据推断,人们对虫草的认识有着5000多年的历史,涉及文化、艺术、历史、哲学、宗教、习俗、医药及生物科学等方面。根据各阶段的特点可分为崇拜时代、本草时代、描述时代和分子时代。(1)崇拜时代(红山文化-神农本草经问世):中国考古发掘出众多玉蚕和玉琀蝉,反映在远古时期对虫草的蒙昧认识以原始的轮回崇拜为特点。至今中外仍遗留着一些古代虫草崇拜的习俗。(2)本草时代(《神农本草经》问世-1818年虫草属建立):古代苏美尔人可能使用过一种虫草入药;而中国人2000年来一直使用白僵蚕、蝉花和冬虫夏草等入药。此时期物化观念对东西方都有较大影响,对于虫草东西方均有“动物化植物”“竹根化蝉”“虫草互变”等认知,反映了物化论的深刻影响。(3)描述时代(1818年-20世纪末):1818年Fries建立虫草属,揭开虫草菌科学发展300年的篇章。物化论逐渐被近代科学取代;庞大的虫草家族逐渐形成。欧洲和日本流行虫草绘画,加快了虫草知识的普及。19世纪后期兴起利用虫草菌防治害虫,并在20世纪中期形成规模较大的真菌杀虫剂产业。中国将虫草用于食品和药品的古老传统得以传承并发展,在20世纪后期形成较大产业;但欧美各国发展较慢。(4)分子时代(21世纪初以来):在现代生物科学和技术的带动和支撑下,虫草研究从上世纪末开始进入分子时代。生物药物素研究缓慢进展,而虫草的多基因系统发育、虫草侵染昆虫的分子致病机制以及以基因组学引领的组学研究则快速进展。国际和国内学术交流活跃,对于弘扬虫草文化起到有力的促进作用。

蝉花孢梗束的毒性研究

目的对人工培植的蝉花孢梗束进行毒理学研究,评价其口服安全性。方法利用急性毒性试验、体外中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验和孕鼠致畸试验进行毒理学评价。结果急性毒性试验结果表明蝉花孢梗束对雌、雄大鼠急性经口最大耐受量(MTD)均>10 g/kg,属于无毒级;中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验以及3项遗传毒性试验的结果皆为阴性,未显示致突变性;蝉花孢梗束各剂量组在大鼠孕期体质量、死胎率、吸收胎率与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),各剂量组胎鼠质量、胎鼠身长、前囟宽度与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05);各剂量组在胎鼠外观、内脏发育、骨骼发育检查上与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论在本研究条件下,未见蝉花孢梗束有急性毒性、遗传毒性,对孕鼠无致畸作用,具有良好的安全性。