绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)鱼头酸溶性与酶溶性胶原蛋白的分离纯化及理化性质研究

利用酸溶法和酶溶法制备马面鲀鱼头酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对所制备的ASC和PSC的氨基酸组成、SDS-PAGE、红外光谱、黏度和热变性温度,以及溶解度等性质进行分析。结果表明:马面鲀鱼头中ASC和PSC的提取率分别为0.94%±0.07%和3.91%±0.14%。Gly(265.0和251.8残基/1000残基)、Ala(111.0和107.6残基/1000残基)和Pro(87.0和83.1残基/1000残基)含量较高,而His和Tyr的含量较少,且未检测到Cys。ASC和PSC中亚氨基酸(Pro和Hyp)含量为169.3和160.6残基/1000残基。氨基酸组成分析、SDS-PAGE和红外光谱(FTIR)证实ASC和PSC均属于I型胶原蛋白,热变性温度分别为17.6°C和16.5°C。在酸性p H值范围内,ASC和PSC的溶解度较高;当Na Cl溶液浓度高于2%,ASC和PSC的溶解度会显著降低。综上,相对于哺乳动物类胶原蛋白,马面鲀鱼头ASC和PSC的亚氨基酸含量和热变性温度较低,结构稳定性差,易于降解,可作为胶原蛋白肽的制备原料进行开发。

金枪鱼(Katsuwonus pelamis)碎肉蛋白降压肽的酶解制备及活性研究

以血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标,通过正交试验L9(34)确定碱性蛋白酶(Alcalase)对金枪鱼(Katsuwonus pelamis)碎肉蛋白的最佳酶解条件,利用D101大孔树脂建立了酶解物的脱盐工艺,利用超滤、葡聚糖凝胶(G-25)色谱和反相-高效液相色谱(RP-HPLC)分离降压肽,并确定其纯度,利用氨基酸序列分析和ESI-MS鉴定纯化多肽的结构。结果表明,碱性蛋白酶酶解金枪鱼碎肉蛋白制备降压肽的最佳酶解条件是:pH 9.5,酶用量1.5%,酶解温度50°C,酶解时间5h;D101大孔吸附树脂脱盐工艺条件为:上样浓度10 mg/mL、上样流速1.5 BV/h、解吸剂为75%乙醇;酶解物经超滤和Sephadex G-25分离获得一个纯度较高的四肽,经氨基酸序列分析和ESI-MS鉴定结构为Phe-GlyGly-Val(FGGV),ESI-MS检测给出分子离子峰m/z 379.50([M+H]+)。利用碱性蛋白酶酶解并经超滤和色谱技术制备的金枪鱼碎肉蛋白降压肽具有良好的ACE抑制活性,可作为降压药物、保健食品或添加剂进行开发。

青蛤酶解多肽体外抗氧化活性的研究

以青蛤内脏为原料,应用碱性蛋白酶对其进行酶解,以DPPH清除率为指标,采用正交实验确定碱性蛋白酶酶解的最佳条件,测定酶解多肽对DPPH清除率、超氧自由基清除率、螯合力和还原铁的能力;使用琼脂糖凝胶电泳检测多肽对羟自由基诱导损伤的pBR322 DNA的保护作用,使用SDS-PAGE电泳测定青蛤多肽的分子量。结果表明青蛤内脏碱性蛋白酶酶解的最佳条件为温度50℃、时间4 h、酶添加量2 000μ/g、pH 9。得到的青蛤多肽在浓度为5 mg/mL时,DPPH的清除率为91.24%,羟自由基的清除率为62.83%,Fe^(2+)的螯合力为61.13%,还原力为0.331。青蛤多肽对羟自由基诱导损伤的pBR322 DNA有一定的保护作用;该多肽的分子量范围为15~25 kDa。因此青蛤内脏经碱性蛋白酶酶解得到的多肽具有较好的抗氧化活性。

海葵毒素的药理活性研究进展

海葵是一种海洋中比较原始的动物,属于腔肠科,广泛分布于我国沿海海域。近年来,研究发现多种具有生物学活性的物质富含于海葵中,所以它成为海洋药物的研究焦点之一。对海葵神经毒素、溶细胞毒素、抗肿瘤毒素等物质的药理学生物活性进行了综述。

对第6版《人体解剖生理学》教材的商榷

适用于本科药学类专业的卫生部“十二五”规划教材、全国高等医药教材建设研究会“十二五”规划教材、全国高等学校药学专业第7版规划教材《人体解剖生理学》(下称教材)在2011年3月由人民卫生出版社出版,目前已使用3年.该教材紧紧围绕全国高等学校药学类专业教育和人才培养目标要求,突出药学专业特色,强调培养目标与用人要求相结合,是目前最理想的教材,深受师生的欢迎.我们在使用过程中,体会到了优于第5版的许多先进之处,但也存在一些问题,提出来与各位同仁一同讨论,以利于再版时修正.

海藻糖、海藻胶及寡糖对蒸煮南美白对虾的抗冻保水作用

为探索海藻糖类在冷冻熟制水产品中的应用效果,以蒸煮南美白对虾为研究对象,以焦磷酸钠为阳性对照,研究海藻糖、海藻胶及寡糖对蒸煮虾仁的抗冻、保水作用。结果表明:-18℃冻藏6周后,1.0 g/100 m L海藻糖、海藻胶寡糖浸泡处理,显著降低了冷冻蒸煮虾仁解冻和蒸煮损失率(P<0.05),其与焦磷酸钠保水效果无显著性差异(P>0.05)。在整个冻藏期内,0.5、1.0 g/100 m L海藻糖和海藻胶寡糖处理,虾仁肌肉a*值保持效果显著优于其他处理组(P<0.05),表明该2种糖类对蒸煮虾仁色泽具有较好的保护。随着冻藏时间延长,不同处理组虾仁水分含量、水分活度和质构特性均呈逐渐下降趋势,其中以海藻糖、海藻胶寡糖处理对虾仁水分、质构特性保持效果较好,且显著优于蒸馏水和焦磷酸钠组(P<0.05)。经组织结构观察发现,1.0 g/100 m L海藻胶寡糖处理虾仁,肌纤维排列致密、无扭曲变形,且肌肉中无较大间隙或孔洞产生,表明海藻胶寡糖具有抑制肌肉间隙冰晶生长、保护肌肉组织完整性的作用。结果可为开发一种安全、高效、适用于冷冻蒸煮虾仁的无磷保水剂提供参考。

鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠急性肝损伤的保护作用研究

本文对鳕鱼皮胶原蛋白肽(CSCP)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。测定CSCP的急性毒性作用及最大给药剂量;建立CCl4致小鼠急性肝损伤模型,检测小鼠血清ALT、AST活性以及肝组织匀浆GSH-Px、SOD活性以及MDA含量;HE染色观察肝脏病理学改变;透射电镜观察肝脏微观结构;蛋白印迹法测定肝组织Bax、Bcl-2、Cleavage Caspase-3、TNF-α蛋白表达量。结果表明CSCP最大给药量达到8.0 g/kg,无小鼠死亡;CSCP组与模型组比较,血清中ALT、AST的活性显著降低,最高降幅达到60%以上;肝组织匀浆中SOD和GSH-Px活性显著增高,分别增加23%和29%;MDA含量显著降低,最高降幅达到38%;HE染色观察肝组织结构明显好转;透射电镜表明肝脏微观结构得到明显改善;Bcl-2蛋白表达量增加,Bax、Cleavage Caspase-3、TNF-α蛋白表达量降低。因此,CSCP对CCl4小鼠急性肝损伤有较明显的保护作用。

乌贼墨多肽诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡的机制研究

本文探讨了乌贼墨多肽(SHP)诱导DU-145细胞凋亡机制。采用CCK-8法检测SHP对DU-145细胞增殖的影响;采用HE染色和AO/EB荧光染色观察DU-145细胞的形态学的变化;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;并通过Western Blotting检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF的蛋白表达变化。结果表明,SHP对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间依赖性;SHP作用后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;流式细胞术结果显示,随着SHP浓度和作用时间的增加,DU-145细胞的早期凋亡率从12.25%增加到34.20%;Western Blotting结果显示,当SHP作用24 h后,VEGF、Bcl-2蛋白表达量降低,p53、Bax、Caspase-3蛋白表达量增加。综上可知,SHP能够诱导DU-145细胞凋亡,其机制有可能是通过激活抑癌基因p53,下调Bcl-2/Bax比例;下调VEGF,激活凋亡蛋白酶Caspase-3,诱发凋亡级联反应来实现的。

固定化酶水解鱿鱼碎肉制备高F值寡肽的工艺优化

为了研究鱿鱼碎肉通过固定化双酶水解法制备高F值寡肽的工艺,以蛋白质水解度为指标,通过单因素和正交试验确定固定化胃蛋白酶和固定化风味酶的最佳酶解条件。第1步采用固定化胃蛋白酶,其最佳酶解条件是:料水比1∶5、加酶量26.83 U/g鱿鱼碎肉、水解时间5 h、水解温度55℃;第2步采用固定化风味酶,其最佳酶解条件是:加酶量1 692 U/g鱿鱼碎肉、pH 7.0、水解温度55℃、水解时间3 h;两步酶解后的总水解度为(32.09±0.58)%,OD_(280)为0.238±0.001。酶解液经多级活性炭串联吸附脱除芳香族氨基酸后,支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值(F值)大于20。鱿鱼碎肉经固定化胃蛋白酶和固定化风味蛋白酶分步水解后,活性炭串联吸附脱芳后可制备高F值寡肽。

加强药学专业实践教学环节增强就业能力的探索与思考

实践教学对全面提高学生的综合素质、创新能力和就业能力具有非常重要的作用。文章通过分析药学专业实践教学的现状和困境，探索实践教学改革的方法和模式，在教学实践中采取了增设短学期，引导学生早期接触工作岗位；构建主干课程实验教学新体系，增加综合性实验和开放设计性实验的比例；通过“导师制”引导学生积极参与导师的科研活动，提高科研创新能力等做法，取得了良好的效果，促进了药学专业毕业生的就业。

剑麻汁水解液美拉德反应及其产物挥发性成分研究

采用盐酸水解剑麻汁,对其水解液进行美拉德反应,并对其美拉德反应产物的挥发性成分进行了测定。结果表明6 mol/L盐酸与剑麻汁的体积比为4︰1,100℃的条件下水解14 h,剑麻汁的水解度达到16.8%;剑麻汁水解液在pH为7,100℃加热30 min,其美拉德反应褐变程度最强;经气相色谱-质谱联用仪测定,剑麻汁的美拉德反应产物挥发性成分主要包括醇、醛、酮、酸、酯、酚、烯及呋喃8大类,可开发成一种天然的烟草增香剂。

酸性电解水冰衣对单冻虾仁品质的影响

以单冻南美白对虾虾仁为研究对象,重点评价酸性电解水镀冰衣对于虾仁的抑菌效果以及对单冻虾仁贮藏品质的影响。结果表明:1)-18℃冻藏下,酸性电解水冰衣可显著降低单冻虾仁中的细菌总数和金黄色葡萄球菌含量。2)经80 d冻藏后,传统蒸馏水镀冰衣的生、熟虾仁TVBN含量分别为18.96 mg/100 g和13.86 mg/100 g,而酸性电解水镀冰衣的生、熟虾仁TVBN含量仅为11.25 mg/100 g和8.52 mg/100 g,保鲜效果显著。3)酸性电解水冰衣对单冻虾仁的明度、质构特性及挥发性风味物质均未产生显著性影响。4)酸性电解水冰衣通过缓慢释放的有效氯,协同其高氧化-还原作用,可有效延缓虾仁中微生物生长,进而减少微生物产生的酶类对肌肉纤维的分解作用。本研究结果为单冻虾仁产品新型镀冰衣技术的研发提供一定的理论依据和技术支持。