温度休克法在海洋生物多倍体诱导中的应用

温度休克法是海洋生物多倍体育种的一种重要手段,具有操作简便、成本低廉、诱导成功率较高等优点,主要包括冷休克和热休克2种方式。文中综述了温度休克法诱导海洋鱼类和贝类多倍体的原理、特点及研究现状,对多倍体未来的研究方向进行了展望,以期为其他海洋生物多倍体诱导提供理论参考。

工厂化对虾养殖沉积物中氮含量的研究

文中选择工厂化对虾养殖中后期沉积底泥中的氮含量进行分析和测定,结果表明,总氮含量为1.500mg/g,明显高于一般水体中的氮含量,但尚未达到氮污染的水平,这表明该养殖场在养殖过程投洒微生态制剂,对养殖池环境的改善有一定促进效果。本研究结果可为工厂化养殖池底微生物制剂的使用效果研究,养殖废水处理工艺选择、废水处理效果评估以及对虾养殖病害控制提供参考和借鉴。

三种网箱养殖鱼类的水阻力试验研究

研究鱼在游泳过程中受到的阻力是分析鱼类体能消耗的重要依据。本文采用垂直杠杆原理,设计了专用的鱼类水阻力测量装置,研究了三种常见网箱养殖鱼类（日本白姑鱼、美国红鱼、黑鲷）在水流条件下的水阻力系数,探讨了鱼的重量（规格）和种类对水阻力系数CD的影响。研究表明,在雷诺数Re小于2×104时,三种试验鱼的水阻力系数整体呈幂函数趋势下降;当Re大于2×104后,水阻力系数趋于稳定。三种鱼的规格和种类均对阻力系数CD影响不大,结果较为离散,但数值上总体介于0.3~0.6之间。鱼类的横截面积和重量有较为明显的线性关系,横截面积随重量增加而增大。

波浪要素对水平圆柱杆件水动力系数影响研究

通过试验研究了波浪要素对水平固定圆柱杆件水动力系数的影响。试验利用垂直杠杆原理,提取了杆件在波浪下的水平受力历时曲线,基于改造的莫里森方程,计算了不同波浪要素下的水动力系数C_D和C_M取值。定义分析了新的波高参数KH,周期参数KT和雷诺数Re对水动力系数的影响。研究表明,整体拟合法与四点拟合法获得的水动力系数在数值上差异不大。KH、KT及Re均对水动力系数的取值有较显著影响:1)随着波高KH的增大,C_D、C_M整体呈幂指数衰减,且C_M的衰减更为迅速;2)随着波周期KT的增大,C_D、C_M整体亦呈衰减趋势;3)相同波高条件下,C_M随Re数增大而增大,而C_D值相对稳定。最后给出了波浪条件下水动力系数C_D和C_M的经验计算公式。

紫贻贝(Mytilus edulis)养殖群体的遗传多样性及遗传结构分析

基于线粒体DNA的COⅢ基因序列对我国沿海重要经济贝类紫贻贝3个养殖群体(烟台、乳山、东极)的遗传多样性和遗传结构进行了研究。由PCR扩增获得32个体的COⅢ基因750bp的部分序列,其多态性遗传参数统计显示,32个个体共检出18个单倍型,总群体单倍型多样性指数(Hd)为0.946,核苷酸多样性指数(Pi)为0.0207,平均核苷酸差异数(K)为15.316,三个群体均显示出较丰富的遗传多样性。遗传分化系数(Fst)表明,东极群体与烟台群体及乳山群体已明显分化,而烟台群体和乳山群体间无遗传分化,并且存在着较大的基因流。

养殖曼氏无针乌贼白色卵膜营养成分分析及评价

测定分析并评价了养殖曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)白色卵膜(WEM)的营养成分。结果表明,WEM(鲜样)中水分、粗灰分、粗蛋白和粗脂肪的质量分数分别为92.34%、1.76%、5.28%和0.34%。WEM(干样)中氨基酸(AA)总量为55.53%,其中必需氨基酸(EAA)总量为19.85%;必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)的比值为65.6%,构成比例符合FAO/WHO规定的优质蛋白质标准;鲜味氨基酸(DTAA)总量为29.53%。WEM的第一限制性氨基酸为苯丙氨酸+酪氨酸(Phe+Tyr),必需氨基酸指数(EAAI)为38.03。脂肪酸中多不饱和脂肪酸(PUFA)占19.21%。矿物质含量丰富,尤其以磷(P)质量分数最高(1 423.2 mg·kg-1)。结果表明,WEM营养组分较为全面,与野生黑色卵膜(BEM)的营养成分进行对比分析发现,在氨基酸组成、必需氨基酸和无机元素质量分数等方面存在差异,这种差异是否是导致白化受精卵孵化率降低的关键因素有待进一步研究。

中街山列岛岩礁海域鱼类群落多样性研究

加快包括岛礁海域鱼类资源在内的渔业资源调查研究,可以进一步完善该区域鱼类群落生态学内容,探究岩礁海域生境生态学功能,为该海域鱼类资源的养护修复、可持续利用和有效管理提供科学依据。本文基于2013年11月—2014年10月的中街山列岛岩礁海域鱼类资源调查数据,对研究区域鱼类组成及群落多样性分析,结果如下:全年渔获鱼类49种隶属9目28科42属,暖水种和暖温种分别为25和24种,底层、近底层和中上层鱼类各为12、26和11种,定居种、季节性洄游种和偶见种各为28、19和2种;褐菖鲉为全年的绝对优势种,黄姑鱼年IRI值最大,为37.23;迁移指数分析显示群落7月份稳定性最高;ABC曲线分析显示6月受到的干扰最小,2月受到的干扰最大;流刺网年渔获率和CPUE分别为44.03尾/km、13.43 kg/km,延绳钓作业分别为4.91尾/100钓、1.67kg/100钓;群落多样性指数分析结果显示,Margalef种类丰富度指数2月最低,为2.35,7月最大,为4.93;Shannon-Wiener多样性指数7—8月均值最大,为2.80左右;均匀度指数最大和最小值分别是0.97、0.74;三种多样性指数均呈现随气温升高而增大的趋势,但均匀度指数变化没有前2个指数明显,12月和5月3种指数均有波动现象发生。

重金属胁迫下厚壳贻贝谷胱甘肽S-转移酶基因表达分析

谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase,GST)因对环境污染反应灵敏,且具有降解毒物、抗氧化等作用常被作为水体污染的指示分子;厚壳贻贝对环境污染物具有很强的耐受性,是重要的海洋环境污染监测生物,因此研究厚壳贻贝GST分子及其表达特征,对正确使用其进行海洋环境污染预警具有重要价值。本文通过同源克隆法获得厚壳贻贝GST部分序列(Gene Bank序列号为KC176684),经序列比对和系统进化分析初步推断所得到的GST基因为pi型。鉴于铜和镉是目前海水中主要的重金属污染源,进一步利用实时荧光定量PCR技术检测铜和镉胁迫后GST在厚壳贻贝血液中的表达水平,结果显示铜(Cu2+浓度为20μg/L)和镉(Cd2+浓度为200μg/L)胁迫均造成GST高水平表达,但最高表达量出现的时间略有差别,Cu2+出现在刺激后第10 d,表达量为对照组的6.95倍,Cd2+则出现在第15 d,约为对照组的6.11倍,说明GST参与了厚壳贻贝重金属的解毒过程,且对于不同重金属胁迫的解毒能力稍有不同。鉴于厚壳贻贝GST对重金属刺激的敏感作用,可将其作为海水养殖环境污染监测的生物指示基因。

大黄鱼(Larimichthys crocea)补体调节因子CFH和CFHR2基因的分子特征及表达分析

补体是鱼类免疫系统重要的组分,具有识别和消除外来病原体,激活免疫细胞,调控获得性免疫等功能。在免疫组织中,补体调节因子大约占据了补体成分的二分之一,当受到外界病原刺激时会迅速活化补体成分,并且进一步聚合形成酶复合物发挥一系列免疫效应。CFH和CFHR2是补体替代途径重要的调节因子,对于补体系统正常运转必不可少。为此,本文测定了大黄鱼补体调节因子CFH和CFHR2基因的c DNA全序列,并对基因组织特异性表达和溶藻弧菌刺激后基因m RNA表达量的变化等方面进行了研究。CFH和CFHR2序列全长分别为1332 bp和1170 bp,分别编码443和389个氨基酸,N端信号肽序列分别为24和32个氨基酸。推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼CFH和CFHR2基因具有RCA蛋白家族的典型特征,即含有多个保守的CCP结构(补体控制蛋白)。实时荧光定量PCR结果显示,CFH和CFHR2在健康大黄鱼的肝、脾、肾、肠、脑、胃、心和肌肉这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量显著高于其它几种组织。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染了健康的大黄鱼之后,CFH和CFHR2的m RNA表达量均明显上调,并且随着感染时间的变化呈现不同的上升趋势。结果表明补体调节因子m RNA表达量的变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,表明了CFH和CFHR2可能在大黄鱼自身免疫机制中发挥重要的作用。

翘嘴鲌(Culter alburnus)TMEM-57基因的克隆、组织表达和单核苷酸多态性分析

采用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术首次克隆了翘嘴鲌TMEM-57蛋白基因的cDNA全序列,该序列全长为2822bp,其中5′-UTR区93bp,3′-UTR区731bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1998bp,编码665个氨基酸。NJ法系统进化分析将同科或属中TMEM-57基因分成一个分支,表现出种属间的高度保守性。利用荧光定量PCR(qPCR)技术检测了不同组织的表达量,发现在卵巢中表达量最高,其次为心脏和脑。用直接测序法对TMEM-57基因部分区段单核苷酸多态性(SNP)进行了检测,寻找到11个新的SNP位点。

Cr^(6+)、Cd^(2+)对荔枝螺的急性毒性效应

为探求Cr6+、Cd2+对荔枝螺的急性毒性危害,研究了Cr6+和Cd2+在不同质量浓度及温度条件下对荔枝螺24、48、72、96h的急性毒性效应,采用原子吸收光谱法测定荔枝螺内脏团与腹足肌肉对Cr6+和Cd2+的蓄积能力。试验结果表明,Cr6+和Cd2+对荔枝螺属低、中毒物质。Cr6+和Cd2+安全质量浓度分别为7.94mg/L和0.74mg/L,Cd2+对荔枝螺的毒性比Cr6+约大10倍。高于渔业水质标准值(Cr6+≤0.1mg/L,Cd2+≤0.005mg/L),Cr6+约高79倍,Cd2+高148倍,毒性强弱结果为Cd2+>Cr6+;一定范围内,温度升高,Cr6+和Cd2+对荔枝螺的单位时间致死率和致死速率会增大;在一定温度范围内,荔枝螺对Cr6+和Cd2+的吸收量随温度升高而升高,温度升高可促进荔枝螺对Cr6+、Cd2+的吸收;温度对荔枝螺蓄积Cr6+的能力影响较大,而对Cd2+蓄积的能力影响较小。Cr6+的蓄积因温度而变动,而Cd2+在不同温度下都能被稳定的吸收蓄积。内脏是蓄积两种重金属的主要部位,蓄积能力高于肌肉。

大黄鱼(Larimichthys crocea)补体C3和C4基因的分子特征及表达分析

本文测定了大黄鱼C3(L.c-C3)和C4(L.c-C4)基因的c DNA全序列。结果表明,L.c-C3和L.cC4序列全长分别为4962bp和5088bp,分别编码1653和1695个氨基酸,N端信号肽序列分别为23和19个氨基酸。推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼C3和C4与已报道的补体C3、C4同样都具有在功能上比较重要的残基以及保守的硫酯区。分子进化分析表明,L.c-C3和L.c-C4分别与鮸鱼C3、C4的氨基酸同源性最高。实时荧光定量PCR结果显示,L.c-C3和L.c-C4在健康大黄鱼的肝脏、脾脏、肠、鳃、心脏、脑、肌肉和胃这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量最高。在大黄鱼胚胎不同发育时期(从2细胞期到初生仔鱼)中,L.c-C3在各个阶段没有明显的变化,而L.c-C4的表达量有明显升高。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染的大黄鱼肝脏和脾脏中,L.c-C3和L.c-C4的m RNA表达量均明显上调。该结果表明,大黄鱼肝组织C3和C4基因表达变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,揭示了C3和C4在大黄鱼抗细菌免疫反应中具有重要的作用。

光照周期对曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)繁殖、性类固醇激素系统及生长性能的调控作用

养殖条件下的性早熟、个体小型化是影响曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)的养殖效益的重要因素。为探讨养殖条件下曼氏无针乌贼性早熟的可能因素,本文探讨了3种不同光照周期(23D:1L;12D:12L;1D:23L)对其繁殖性能及个体生长的影响。结果表明:光照周期对曼氏无针乌贼的繁殖性能总体影响不大,除长光照周期(1D:23L)下,睾酮(T)、雌二醇(E2)等激素水平有较显著的降低外(P<0.05),光照对乌贼繁殖时间、性腺重及性腺发育指数等指标均无明显影响。但光照周期对曼氏无针乌贼生长却有明显影响,在胴长、体重、瞬时生长率(IGR)及肥满度等生长指标上均呈现出短光照组>中光照组>长光照的趋势。短光照组雌乌贼在体重、瞬时生长率和肥满度,雄乌贼在胴长等指标上,均显著优于长光照组(P<0.05)。该结果表明光照周期可作为影响曼氏无针乌贼生长性能的重要因素,在今后的养殖条件优化中应加以考虑。

美国红鱼游泳体能分配模型及其在海区选址中的应用

以深水网箱养殖的美国红鱼为研究对象,通过研究其游泳时主要能量物质和代谢产物的变化规律,构建美国红鱼的游泳体能分配模型,最后结合特定的潮流规律,建立养殖海区最大潮流选择的理论方法。结果显示,美国红鱼游泳过程中,血糖浓度会显著提高,肌糖原有少量减少,肝糖原会显著降低,鱼类游泳接近疲劳时,肝糖原浓度亦接近耗尽;美国红鱼以较高速度游泳过程中,血乳酸和肌乳酸浓度会有较明显的增加,表明美国红鱼游泳过程伴随着无氧呼吸和有氧呼吸两种能量物质代谢过程。本实验提出以肝糖原浓度作为判定鱼类持续游泳能力的重要指标,并建立了基于肝糖原储能消耗的美国红鱼游泳体能分配模型。最后基于美国红鱼体能分配模型,结合养殖海区潮流规律,提出了美国红鱼养殖海区最大潮流流速选择的计算方法。研究表明,本实验提出的鱼类游泳体能分配模型构建方法以及鱼类养殖海区潮流选择论证方法,可为相关研究提供新的途径,为深水网箱、浅海围网等海洋养殖模式的海区潮流选址提供科学的参考依据。

海水网箱远程投饵测控系统的设计

为使养殖户在岸上就能对海水网箱的投饵进行实时控制、修改投饵设置和查询网箱有关信息,尤其是当投饵发生异常时,能即时收到告警信息,以保证正常自动投饵,设计了一种基于GSM Modem的海水网箱远程投饵测控系统。海上投饵装置由桨叶式投饵器为核心的机械和测控两部分组成。测控部分硬件以STC5410AD单片机为核心,由通信、信息采集、实时时钟和输出驱动等模块组成,文中着重介绍了系统的软硬件设计。运行结果证明,设计完全达到了预定要求,工作稳定可靠,操作简便。

野生曼氏无针乌贼黑色卵膜主要营养成分分析

曼氏无针乌贼（Sepiella maindroni deRochebruns）隶属软体动物门（Mollusca）、头足纲（Cephalopoda）、乌贼目（Sepioidea）、乌贼科（Sepiidae）,广泛分布于俄罗斯远东海、日本濑户内海、朝鲜西南海岸和我国邻近海域,曾与大黄鱼、