Pax-8基因在大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,观察其对心肌细胞凋亡和增殖的影响。方法将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:针对Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8 siRNA)组,非特异性siRNA(NCsiRNA)组和空白对照组。前两组分别给予相应siRNA(5μl)和Lipofectamine 2000(5μl)配制成的siRNA-脂质体复合物溶液,空白对照组给予等量的细胞培养基。采用RT-PCR和Western blotting测定Pax-8的mRNA和蛋白质表达,荧光光度法检测半胱天冬酶(Caspase)-3活性以反映细胞凋亡,CCK-8法检验细胞的增殖抑制率。结果与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8 siRNA组的Pax-8 mRNA表达分别下调60.30%(P<0.05)和63.09%(P<0.05),蛋白表达分别下调50.38%(P<0.05)和54.17%(P<0.05),而NCsiRNA组与空白对照组间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的Caspase-3活性较NCsiRNA组和空白对照组明显升高(P<0.01),而后两者间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的细胞增殖抑制率明显高于NCsiRNA组(P<0.01)。结论Pax-8 siRNA能选择性下调心肌细胞中Pax-8的表达,并促进细胞凋亡、抑制细胞增殖。

内皮祖细胞的动员及影响因素

内皮祖细胞是一类能分化成血管内皮细胞的前体细胞,在生后成人血管发生(vasculo- genesis)中起着重要的作用。从骨髓刺激内皮祖细胞的动员,增加循环内皮祖细胞的数量,是促进血管 新生(neovascularization)的一种有效措施,因此对动员影响因素及其机制的研究具有重要临床意义。

脂质代谢相关基因多态性与冠心病

脂质代谢紊乱是冠心病主要的,独立的危险因素。脂质代谢相关基因的突变会导致血浆脂质代谢紊乱。这些基因多态性通过不同的作用机制和协同作用共同影响着脂质代谢,对动脉粥样硬化及冠心病的发生和发展起着重要作用。本文就近年来主要的脂质代谢相关基因多态性与冠心病易感性关系的研究现状作一综述。

内皮祖细胞在血管新生治疗中的作用

目前对缺血性心脏病研究的一个热点是如何促进缺血部位的新生血管形成,以改善局部的血供情况.促进血管新生(Neovascularization)又包括二个方面,血管形成(angiogenesis)和血管生成(vascularization).

炎症因子基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性

目的研究中国南方汉族人群炎症因子基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）的相关性。方法采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对283例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者和176名对照者的5个炎症因子的基因多态性进行检测，评估不同基因型和等位基因与冠心病患病风险的关联性。结果在受检测的5个炎症因子ESL腺癌易感基因1相关蛋白（BRCA1-associatedprotein，BRAP）、去整合素-金属蛋白酶8、中间α胰蛋白酶抑制因子H3、白细胞介素-15和环氧化酶-2]中，BRAP基因的270T／C及90A／G多态性在冠心病组与对照组间的差异有统计学意义，其等位基因和基因型的分布频率符合Hardy-Weinberg平衡（分别为：χ^2=0．878，P〉0．05；χ^2=0．776，P〉0．05）。冠心病组BRAP270C等位基因和90G等位基因频率高于对照组（分别为：29．51％vs．21．31％，P=0．006；30．04％vs．21．31％，P=0．004）。Logistic回归分析提示，BRAP270CC和90GG基因型携带者患冠心病的发病风险高于BRAP270TT和90AA基因型携带者（分别为：OR=4．51，95％CI：1．41～14．45，P=0．011；OR=5．09，95％CI：1．60～16．26，P=0．006），且该关联独立于性别、年龄、吸烟、高血压、糖尿病及血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平等风险因素之外。没有证据表明其余单核苷酸多态性与冠心病易感性相关。结论BRAP基因内含子270T／C和外显子90A／G多态性可能是中国南方汉族人群冠心病发病的风险因素之一。

两种取血模式对大鼠的致创伤作用及L-选择素的变化

目的比较颈动脉置管取血和剪尾取血对大鼠的致创伤作用及体内L-选择素的变化。方法采用两种失血性休克动物模型的取血方法。24只SD大鼠随机分3组:正常对照组(n=8)、颈动脉取血组(n=8)和剪尾取血组(n=8)。单克隆抗体标记及流式细胞仪检测大鼠中性粒细胞表面L选择素动态表达,以及用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测大鼠白细胞胞质L选择素mRNA的半定量变化。结果剪尾取血组中性粒细胞表面不同时间点之间L选择素表达量(平均荧光道数)变化差异无显著性(P>0.05)。与正常对照组及剪尾取血组相比,颈动脉取血组中性粒细胞表面L选择素表达均上调,细胞表面3h达峰值,4、5h持续高水平,其mRNA进行性升高并于5h达峰值。结论剪尾取血对大鼠L选择素表达无显著影响,颈动脉插管中性粒细胞L选择素表达上调,对大鼠构成中重度创伤,提示在该类研究中不宜作为失血性休克的对照模型。

细胞间黏附分子1基因K469E多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关联研究

目的研究中国汉族人群中细胞间黏附分子1（intercellular adhesion moleculel，ICAM1）基因K469E多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）的关联。方法采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性方法检测了173例冠心病患者和141名对照的ICAM1基因K469E基因型和等位基因的分布。结果基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡。冠心病组的KK基因型的频率显著高于对照组（64．2％比48．9％，P〈0．01），同样，冠心病组K等位基因的频率显著高于对照组（79．2％比69．9％，P〈0．01）。经Logistic回归分析排除年龄，性别，和冠心病其它危险因素的影响后，KK纯合子患冠心病的危险性是KE和EE基因型的2．35倍（95％CI：1．03-5．36，P〈0．05）。结论ICAM1基因K469E多态性与中国汉族人冠心病的危险性相关，其中K等位基因可能是冠心病的遗传危险因素。

炎性反应因子在动脉粥样硬化中的角色

动脉粥样硬化(AS)是严重危害人类健康的因素之一,其形成涉及许多方面,包括脂质代谢紊乱、血小板形成和聚集、血管平滑肌细胞(VSMC)的迁移和增殖、泡沫细胞的形成等.

白细胞介素10基因-592C／A多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病关系的研究

目的研究白细胞介素10（interleukin10，IL10）基因-592C／A多态性与中国南方汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）发病的相关性。方法采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对249例冠心病患者与132名无冠心病对照组人群儿加基因-592C／A位点（rs1800872）多态性检测，比较不同基因型和等位基因与冠心病患病风险的关系。结果IL10—592C／A位点基因型及等位基因在两组人群分布差异有统计学意义（P〈O．05），经Logistic回归分析校正-般临床资料差异后，发现A等位基因携带者（AA＋CA）患冠心病风险是非A等位基因携带者（CC）的2．449倍（95％CI：1．214～4．940，P=0．012）。结论基因-592C／A位点与冠心病发病的危险性相关，A等位基因可能是中国南方汉族人群冠心病发病的遗传危险因素之-。