胡柚皮黄酮对棕榈酸诱导的脂肪变性肝细胞中线粒体膜电位以及自噬相关蛋白表达的影响

目的观察胡柚皮黄酮(PTEC)对棕榈酸(PA)诱导的肝细胞脂肪变性的影响。方法MTT、油红O染色联合检测,设立0.3 mmol/L PA诱导HepG2细胞建立脂肪变性模型,不同浓度(0、20、40、80、160 mg/L)PTEC干预后,采用油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;荧光探针法观测细胞内活性氧水平及线粒体膜电位变化;免疫印迹法检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白质1轻链3(LC3)及P62蛋白表达。结果PA(0.3 mmol/L)诱导后,HepG2细胞内脂滴[(39.13±3.15)比(1.00±0.13),P<0.01]和活性氧[(18.56±1.48)比(1.00±0.25),P<0.01]含量明显增高;与PA组比较,PA+40、80、160 mg/L PTEC组细胞内脂滴[(16.35±4.00)、(6.26±1.69)、(2.76±2.05)比(39.13±3.15),P<0.01]和活性氧[(9.13±1.12)、(7.00±0.45)、(5.03±1.00)比(18.56±1.48),P<0.01]均明显降低,并在荧光显微镜下观察到线粒体膜电位恢复;进一步通过Western blot检测发现,LC3和Beclin-1蛋白表达上调,P62蛋白表达下调。结论PTEC能改善肝细胞脂肪变性和氧化应激反应,机制可能与其调控线粒体自噬,维持线粒体功能稳定有关。

盛丽先经验方清消Ⅰ号对肥胖小鼠血脂及炎症因子的影响

目的研究名中医盛丽先教授经验方清消Ⅰ号对高脂饮食诱导的肥胖小鼠血脂及炎症因子的影响。方法将32只C57BL/6J小鼠,随机分为对照组,模型组,中药低、高剂量组4组,每组8只。模型组给予高脂饮食8周,建立肥胖小鼠模型。于第9周起给药干预,对照组、模型组给予等剂量生理盐水灌胃,中药低、高剂量组分别灌胃5.04、10.08 mg/(g·d)清消Ⅰ号水煎剂,共干预8周。16周末,各组小鼠同时测定Lee′s指数,分离腹腔脂肪,苏木精-伊红染色观察病理。生化法测定血清胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果模型组小鼠的体质量、肝脏湿质量、内脏脂肪质量以及Lee′s指数与对照组相比,均有显著增加;血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量显著增高,高密度脂蛋白含量显著降低,血清TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05)。经清消Ⅰ号治疗后,与模型组比较,小鼠体质量、肝脏湿质量、内脏脂肪质量以及Lee′s指数均明显减低;血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量明显降低,高密度脂蛋白含量升高。血清TNF-α及IL-6水平降低(P<0.05)。结论清消Ⅰ号对高脂饮食引起的肥胖小鼠有较好的治疗作用,可能是通过降低血清炎症因子TNF-α及IL-6的表达水平,调节血脂,从而改善肝脏病理,减轻体质量。

大鼠胃癌前病变形成过程中胃黏膜Sonic Hedgehog信号通路的变化

目的:研究大鼠胃癌前病变形成过程中胃黏膜Sonic Hedgehog(Shh)信号通路的变化。方法:72只乳鼠随机分为正常组36只,造模组36只,雌雄各半。造模组灌服800 mg/L的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)0.1 m L/d,正常组灌服生理盐水0.1 m L/d,共10 d。随后在实验观察第10周、22周、34周末每组分别雌雄各处死6只。HE染色检测胃黏膜组织病理学变化,q RTPCR法检测胃黏膜组织Shh、Ptch1、Smo、Gli1、Gli2、Gli3、Su Fu、Cyclin D1、Cyclin E1、c-Myc、β-actin m RNA的表达。Western blot检测胃黏膜组织Shh、Ptch1、Smo、Gli1、Su Fu、Cyclin D1、Cyclin E1、cMyc、p-c-Myc蛋白表达。结果:随造模时间的延长,模型组大鼠胃黏膜萎缩及异型增生逐渐加重,其胃黏膜内Shh、Smo、Gli1、Cyclin D1、Cyclin E1及c-Myc m RNA表达较正常组不同程度升高,而Ptch1和Su Fu m RNA不同程度降低。模型组胃黏膜内Shh、Smo、Gli1、Cyclin D1、Cyclin E1、p-c-Myc蛋白水平较正常组增加,Ptch1和Su Fu则降低,但差异无统计学意义。结论:大鼠胃癌前病变的形成过程中存在Shh信号通路的激活,提示Shh信号通路可能参与胃癌前病变的发生与发展。

山楂叶总黄酮对FXR及其相关基因调控治疗NAFLD模型大鼠的机制研究

目的:探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的治疗作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组,模型组,TFHL高、中、低剂量组,共5组,高脂膳食建立NAFLD大鼠模型。HE染色、油红O染色观察肝脏病理变化;生化仪检测血清血脂等;RT-PCR法检测肝组织FXR、PPAR-α、PGC1α、CYP7A1等的mRNA表达。Western Blot检测肝脏上述各项基因的蛋白表达。结果:与模型组比较,应用TFHL干预后,肝组织TG、CHOL含量显著降低,同时能增强肝脏FXR、PPAR-α、PGC1αmRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:TFHL可调节NAFLD大鼠肝脏的脂质代谢,改善炎性反应状态,其机制可能与调控FXR相关基因有关。