槲皮素对多囊卵巢综合征大鼠的改善作用

目的探究槲皮素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的改善作用及其机制。方法54只大鼠给予高脂饲料进行喂养,并连续灌胃来曲唑(1 mg/kg)23 d建立PCOS模型;另取10只纳入空白对照组,给予普通饲料。将造模成功的大鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍组(50 mg/kg)及槲皮素低、高剂量组(15、30 mg/kg),灌胃给予相应药物,连续4周。血糖仪检测大鼠血糖水平,ELISA法检测大鼠空腹胰岛素水平和血清TGF-β_(1)、E_(2)、FSH水平,HE染色计数卵巢内各级卵泡数量,RT-qPCR法检测卵巢组织GLUT4 mRNA表达,Western blot法检测卵巢组织AGEs、RAGE、p-Akt、Akt、p-PI3K、PI3K蛋白表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠空腹胰岛素和血糖水平降低(P<0.01),血清TGF-β_(1)水平降低(P<0.01),原始卵泡和初级卵泡数量增加(P<0.01),卵巢组织GLUT4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);槲皮素高剂量组、盐酸二甲双胍组大鼠血清E_(2)水平降低(P<0.01),卵巢组织AGEs、RAGE、p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论槲皮素可能通过抑制AGEs/RAGE信号通路减轻胰岛素抵抗,促进卵泡发育,发挥对PCOS大鼠的改善作用。

五子衍宗丸对生精障碍大鼠生精功能的保护作用研究

目的:考察五子衍宗丸对实验性生精障碍大鼠的保护作用。方法:取90只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、克罗米芬阳性对照组及五子衍宗丸低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组灌服雷公藤多苷40 mg/(kg·d)连续4 w建立生精障碍模型。从第4 w开始,各组按剂量灌胃给药,给药4 w后计算睾丸、附睾、精囊腺脏器指数,检测精子数量、活率和血清生殖激素水平,HE染色观察大鼠睾丸病理组织学改变,TUNEL染色观察睾丸细胞凋亡情况,免疫组化及qRT⁃PCR检测凋亡相关蛋白的表达。结果:生精障碍模型大鼠经高剂量五子衍宗丸治疗后,睾丸脏器指数、精子数量和活率及血清血清T水平显著升高,血清FSH、LH的水平显著降低;睾丸组织病理学损伤明显改善,并能抑制生精细胞的凋亡,促进睾丸组织中抑凋亡相关蛋白Bcl⁃2表达,抑制促凋亡相关蛋白Bax、Caspase⁃3、Caspase⁃9的表达。结论:五子衍宗丸对生精功能障碍大鼠具有保护作用,其机制可能与改善生精并抑制生精细胞凋亡相关。

精子形态畸形相关指数与夫精人工授精结局的关系

人工授精是临床上用于治疗不孕症的常用手段,影响其受孕率的因素有很多。研究表明,精子形态畸形可能导致胚胎发育不良、胚胎种植率和怀孕率低以及反复流产^([1-2])。精子存在多个部位同时畸形的情况,即多重精子缺陷,相关的评价指标主要有多重异常指数(MAI)、畸形精子指数(TZI)和精子畸形指数(SDI),其中研究者发现MAI和TZI与体内生育能力相关^([3]),而SDI与体外受精联系紧密^([4])。目前关于这三个精子形态多重畸形相关指标与人工授精临床结局之间的相关性的研究仍较为缺乏。

不同剂量三羟异黄酮对去势大鼠子宫质量及内膜的影响

目的探讨不同剂量的植物雌激素三羟异黄酮(GST)对子宫质量及内膜的影响。方法选取50只成熟雌性SD大鼠,随机分为5组:假手术组、去卵巢组、去卵巢+GST低剂量组(25rmg/kg)、去卵巢+GST中剂量组(50mg/kg)、去卵巢+GST高剂量组(100rmg/kg),后3组每天以不同剂量GST溶液灌胃,实验持续4周。结果实验结束时,各组大鼠体质量较实验前均有增加,差异均有统计学意义(均P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);GST低、中、高剂量组子宫质量分别为(0.18±0.03)、(0.16±0.04)、(0.17±0.05)g;对应的子宫质量/体质量分别为0.64±0.05、0.53±0.08、0.58±0.03,3组间的差异无统计学意义(P>0.05);分别与去卵巢组比较[子宫质量(0.15±0.05)g、子宫质量/体质量0.48±0.08],差异均无统计学意义(均P>0.05);但与假手术组比较[子宫质量(0.45±0.08)g、子宫质量/体质量3.45±0.25],差异均有统计学意义(均P<0.01)。显微镜下观察大鼠子宫内膜,去卵巢组子宫内膜腺体小而稀少,使用不同剂量GST的低、中及高剂量组子宫内膜仍与去卵巢组一样,分布不均匀,腺体内衬上皮由立方或扁平细胞组成,明显富于细胞。结论不同剂量GST均不会促进去势大鼠子宫质量增加及子宫内膜增生,在临床应用可能是安全的。

基于网络药理学探讨苍附导痰汤加减方对多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的作用机制

目的基于网络药理学探讨苍附导痰汤加减方(modified Cangfu Daotandecoction,CFDTD)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的影响。方法利用TCMSP、TCM Database@Taiwan、Drugbank、GeneCards数据库检索CFDTD中的活性化合物并筛选作用靶点;从TTD、PubMed及PharmGKB数据库检索与PCOS相关的疾病靶点,成分靶点与疾病靶点映射后使用Cytoscape3.7.1软件构建药物有效成分-靶点蛋白相互作用网络。然后,采用STRING和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络并筛选核心靶点。随后,利用Cytoscape软件中的ClueGO插件进行Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路分析。最后,采用来曲唑联合高糖高脂饮食构建PCOS伴IR大鼠模型加以验证;给药组分别给予15,30 g·kg^(-1)·d^(-1)CFDTD及50 mg·kg^(-1)·d^(-1)盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride,MH)灌胃;对照组和PCOS组给予等体积生理盐水灌胃,干预4周。全自动化学分析仪检测大鼠空腹血糖(fastingbloodglucose,FPG)、空腹胰岛素(fastinginsulin,FINS)、促卵泡生长激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)含量差异并计算胰岛素抵抗指数(homeostatic model assessment insulin resistance index,HOMA-IR)。HE染色观察大鼠卵巢组织病理变化。Western blotting检测大鼠卵巢组织胰岛素受体(insulin receptor,INSR)、胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I,IGF-I)、胰岛素样生长因子I受体(insulin-like growth factor-I receptor,IGF-IR)、胰岛素(insulin,INS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白表达水平。结果CFDTD筛选得到86个活性成分及126个CFDTD治疗PCOS潜在相关靶点。KEGG分析结果显示,潜在靶点主要涉及insulin resistance,steroid hormone biosynthesis,ovarian steroidogenesis,estrogen signaling pathway,PI3K-Akt signaling pathway,type II diabetes mellitus等信号通路。蛋白相互作用分析提示INS、TNF-α及IL-6为蛋白相互作用网络中的关键靶点。与PCOS组相比,给药组大鼠血清FPG、FINS、HOMA-IR、LH、T、E_(2)的含量明显减少(P均<0.01)及卵巢组织形态明显恢复。Western blotting检测结果显示CFDTD显著降低PCOS大鼠卵巢组织INSR、IGF-IR、INS、TNF-α及IL-6蛋白表达。结论CFDTD可能通过下调INSR、IGF-IR、INS、TNF-α及IL-6蛋白表达,改善PCOS大鼠IR。

不孕症大型临床试验项目执行委员会的建立与运行

高质量临床试验依赖于课题的前期研究方案设计及优化、中期实施质量及后期数据核查统计。临床试验设立项目执行委员会可满足以上需求。本课题组针对项目自身特点邀请享有国际声誉的妇产科学专家、统计学专家及方法学专家共同合作,成立项目执行委员会并定期举办会议。会议内容涵盖项目进展和质量控制、研究助手培训及考核、学科内涵及外延知识讲座等方面。通过项目执行委员会的设立确保了方案的可操作性,同时从不同专业背景及视角回答了研究病种相关问题,解决了如何提高临床试验研究成果产出等问题。临床试验执行委员会不仅为研究者提供了科研实践、交流学习和自我提升的平台,对规范临床试验管理、增强团队合作意识、加强多学科协作、拓展临床科研思维以及培养临床科研人才都具有深远意义。

苍附导痰汤对来曲唑致多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢形态和卵泡发育的影响

目的研究苍附导痰汤(Cangfu Daotan decoction,CFDTD)对来曲唑致多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠卵巢形态和卵泡发育的影响。方法SD大鼠给予来曲唑制备PCOS模型,并行阴道涂片观察动情周期,随机分为PCOS组,CFDTD 15,30 g·kg^(-1)·d^(-1)组、二甲双胍(metformin,MH,50 mg·kg^(-1)·d^(-1))组,各10只,分别给予等量生理盐水及相应药物灌胃,并以高脂饲料喂养;同时设置对照组,等量生理盐水灌胃、普通饲料喂养,共给药4周。给药结束后腹主动脉采血并收集卵巢组织,检测各组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、卵巢质量、卵巢直径、卵巢脏器指数、血清促黄体生成素(luteinizinghormone,LH)、促卵泡生长激素(follicle stimulatinghormone,FSH)、睾酮(testosterone,T)水平。同时采用HE染色、Tunel染色观察卵巢组织形态、细胞凋亡情况。Western blotting检测卵巢组织cleaved caspase 3、cleaved caspase 9、Bcl-2蛋白表达。结果PCOS大鼠无规则动情周期。与PCOS组相比,CFDTD 15 g·kg^(-1)·d^(-1)组左卵巢质量、血清LH、T水平显著降低(P<0.05),CFDTD 30 g·kg^(-1)·d^(-1)组与MH组大鼠FPG、FINS、胰岛素抵抗指数水平、体质量、左右卵巢质量、卵巢直径、卵巢脏器指数、血清LH、T水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。HE染色、Tunel染色结果显示,与PCOS组相比,给药组卵巢组织形态改善、阳性细胞凋亡数减少,改善程度从大到小为MH组、CFDTD 30 g·kg^(-1)·d^(-1)组、CFDTD 15 g·kg^(-1)·d^(-1)组。Western blotting检测结果显示给药组可下调cleaved caspase 3、cleaved caspase 9蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达。结论CFDTD可通过抑制颗粒细胞凋亡、改善胰岛素抵抗和生殖激素水平来发挥改善PCOS大鼠的卵巢形态和卵泡发育的治疗作用。

生活方式对青春期女性多囊卵巢综合征的疗效评价

目的分析生活方式对青春期多囊卵巢综合征患者治疗效果的影响,为从生活方式角度改善青春期多囊卵巢综合征患者的治疗效果提供依据。方法选取2017年3月—2018年2月就诊的112例青春期多囊卵巢综合征患者为研究对象,进行生活方式调整和药物治疗,6个月后以多囊卵巢综合征患者生活方式自评量表的5个维度得分均值为界,把研究对象分为高得分组和低得分组,对高、低得分组睾酮水平、卵巢体积、体质量指数及多毛、痤疮指标进行比较,分析不同生活方式对青春期多囊卵巢综合征患者治疗效果的影响,数据以SPSS 19.0统计软件进行统计分析。结果饮食节律、饮食内容、体质认识和生活节奏低得分组的睾酮水平、卵巢体积、体质量指数及Rosenfield评分均低于高得分组,运动意识高得分组的睾酮水平、卵巢体积、体质量指数及Rosenfield评分均低于低得分组,差异有统计学意义(均P<0.05),但多囊卵巢综合征患者生活方式自评量表的5个维度高低得分组间Ferriman-Gallwey评分量表得分差异无统计学意义(均P>0.05)。结论良好的生活方式对青春期多囊卵巢综合征患者治疗效果起积极促进作用,对改善睾酮水平、卵巢体积、控制体重及痤疮症状起积极作用,但对多毛症状影响甚微。