膳食纤维肠内营养对大鼠急性重症胰腺炎肠屏障功能的影响

目的探讨早期添加膳食纤维(dietary fiber,DF)、肠内营养(enteral nutrion,EN)对急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肠屏障功能的影响。方法SD大鼠32只,随机分成4组(n=8):SAP组(A组),EN组(B组),膳食纤维肠内营养(fiber enteral nutrion,FEN)组(C组)和对照组即假手术组(D组)。采用逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠溶液制成重症胰腺炎大鼠模型。A组和D组术后36 h开始自由饮葡萄糖盐水;C组和B组术后36 h开始空肠营养管分次注射肠内营养液。5 d后再次麻醉大鼠,收集组织及血液标本;检测指标包括细菌移位率、胰腺病理评分、结肠组织形态学变化、血浆D-乳酸以及小肠黏膜固有层CD4+,CD8+和CD4+/CD8+比值等。结果SAP大鼠结肠黏膜萎缩,黏膜腺体稀疏。FEN组结肠黏膜形态变化好于EN组。FEN组细菌培养阳性率明显低于SAP组。FEN组血浆D-乳酸水平明显低于EN组。FEN组与EN组比较,胰腺病理学评分、CD4+、CD8+淋巴细胞数和CD4+/CD8+比值差异无统计学意义。结论添加DF的EN在维护SAP肠黏膜屏障、改善肠道免疫功能、防止细菌易位方面作用优于单纯EN。DF尚不能提高小肠局部免疫功能。

膳食纤维肠内营养对全肠道缺血再灌注大鼠肠屏障功能的影响

目的:通过建立大鼠全肠道缺血再灌注模型,探讨膳食纤维肠内营养对肠屏障功能的影响。方法:将实验大鼠随机分成4组,每组10只。第1组为对照组,第2组为缺血再灌注组(I/R组),该两组为术后24h取材。第3组为普通肠内营养组(EN组),第4组为膳食纤维肠内营养组(FEN组),营养支持7d后取材。上述4组均行回、结肠形态学检查,细菌及内毒素移位、结肠固有层淋巴细胞分布检测,用循环D-乳酸法测定肠道通透性。结果:I/R组大鼠回、结肠黏膜萎缩,腺体稀疏,黏膜下层水肿、出血。FEN组肠黏膜形态学变化好于EN组。I/R组细菌移位率、血浆D-乳酸、血浆内毒素显著高于对照组;FEN组D-乳酸、内毒素水平低于EN组。I/R组结肠固有层CD4+、CD8+T淋巴细胞显著低于其余各组。FEN组CD4+、CD8+T淋巴细胞较EN组增多。结论:添加膳食纤维的肠内营养在维护肠黏膜屏障、改善肠道免疫功能、防止细菌及内毒素移位方面作用优于单纯肠内营养。膳食纤维能提高结肠局部免疫功能。

微生态制剂对老年结肠癌术后肠道屏障功能的影响

目的观察微生态制剂对老年结肠癌术后患者肠道屏障功能的影响。方法72例老年结肠癌手术患者根据随机数字表法分为两组，对照组按常规术前、术后处理，试验组术前及术后使用微生态制剂，每组各36例。比较两组患者术后一般情况及血浆D-乳酸水平与尿乳果糖／甘露醇（L/M）。结果试验组的首次肛门排气时间[（3．1±1．2）d]、腹泻发生率（11．1％，4／36）、腹泻总时间[（6．2±3．1）d]、发热持续时间[（5．1±1．3）d]均较对照组明显改善，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组术后第1天D哥L酸水平与尿L／M均较术前明显增高，两组术后第8天D-乳酸水平较术后第1天明显改善（P〈0．05），且试验组改善更明显。试验组术后第8天尿L／M明显低于对照组及术后第1天，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论微生态制剂能改善结肠癌患者术后肠道屏障功能，从而减少细菌易位的发生，有利于术后恢复。

COX-2与P73在胃癌中的表达及相关性探讨

目的:探讨COX-2和P73在胃癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化Envision法检测COX-2和P73在62例胃癌组织中的表达情况。结果:全组COX-2阳性率为64.5%(40/62),P73阳性率为69.4%(43/62)。COX-2的表达与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床TNM分期相关(P<0.05);P73的表达与浸润深度、淋巴结转移和临床TNM分期相关(P<0.05)。COX-2和P73同时表达、单独表达及不表达时,胃癌的组织分化程度、病变浸润深度(T分期)、淋巴结转移(N分期)和临床分期组间差异有统计学意义(P<0.05)。COX-2和P73在胃癌组织中的表达具有相关性(r=0.384,P<0.05)。结论:胃癌组织中存在COX-2和P73基因的过度表达,COX-2和P73基因的过度表达与胃癌发生发展有关。

肠癌手术中三头带肿瘤区域无瘤隔离技术的应用

目的探讨三头带肿瘤区域无瘤隔离技术预防肠癌手术中医源性转移的临床效果。方法回顾性分析2018年3月~2019年9月采用三头带肿瘤区域无瘤隔离技术治疗的36例肠癌患者的临床资料。其中,乙状结肠癌13例,横结肠癌6例,升结肠癌12例,降结肠癌3例,小肠癌2例。结果本组36例患者行开腹手术11例,腹腔镜手术25例,均顺利完成手术,术中行三头带肿瘤区域无瘤隔离技术操作平均用时5.5(3~10)min。所有患者术后恢复良好,无术后并发症。所有患者均获随访,平均随访15.3(6~24)个月,无复发转移。结论小肠和结肠癌手术中三头带肿瘤区域无瘤隔离技术是安全有效、可行和易于掌握的简易技术,对预防医源性转移具有积极的临床实践意义。

ARHI基因过表达对肝细胞癌血管生成的影响

目的探讨ARHI蛋白对肝细胞癌血管生成的影响及其机制。方法以人肝组织总RNA为模板通过RT—PCR获取全长ARHIcDNA。将该序列克隆并构建pcDNA3．1-ARHI表达质粒。将pcDNA3．1-ARHI表达质粒转染人肝细胞癌细胞系Hep3B细胞，通过G418筛选稳定表达ARHI的细胞。应用MTT法检测过表达ARHI对细胞增殖活性的影响。分别用稳转空载体和ARHI的Hep3B细胞接种建立裸鼠人肝细胞癌移植瘤模型。每周测量瘤体积。5周后麻醉处死裸鼠。免疫组化法检测增殖细胞核标志物Ki-67和血管内皮细胞标志物CD31的表达。应用Westernblotting法检测血管生成相关的mTOR通路中mTOR下游靶蛋白S6K1和4E—BP1的磷酸化情况，并检测肿瘤组织血管生成相关因子缺氧诱导因子1n（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果ARHI过表达显著降低Hep3B细胞的增殖能力（P〈0．01）。并且，该基因对裸鼠人肝癌移植瘤有明显的生长抑制作用，ARHI组瘤体显著减小，抑瘤率达76．4％（P〈0．01）。免疫组化检测显示，ARHI显著抑制细胞增殖核抗原蛋白Ki-67（P〈0．01）和血管内皮细胞标记物CD31（P〈0．05）的表达。Western blot法检测显示，ARHI显著抑制s6K1（P〈0．01）和4E-BPI（P〈0．05）的磷酸化，而且抑制肿瘤组织中HIF-1a（P〈0．05）和VEGF蛋白（P〈0．01）的表达。结论过表达ARHI抑制肝细胞癌生长和血管生成，这可能与其抑制mTOR／VEGF通路有关，提示过表达ARHI可能成为肝细胞癌治疗的新方法。

增强子结合蛋白α在结肠癌转移中的分子调控机制

目的探讨增强子结合蛋白α(C/EBPα)在结肠癌转移中的分子调控机制,为防治结肠癌及其转移提供研发方向和临床思路。方法比较Ad C/EBPα感染后在正常的人结肠黏膜上皮细胞株、结肠癌细胞株SW620和LOVO中C/EBPα及相关基因、蛋白的表达差异,用CCK-8法检测SW620和LOVO细胞生长增殖情况,以流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;体外分离人正常结肠上皮细胞和结肠癌细胞株SW620和LOVO以观察其体外存活率;构建实验性结肠癌和肝转移的小鼠模型,部分小鼠分别经瘤内或尾静脉注射导入Ad C/EBPα接受治疗,以进一步明确C/EBPα在体内对实验性结肠癌和肝转移小鼠的作用机制。结果 Ad C/EBPα以MOI400感染结肠癌细胞株SW620和LOVO 4 d后,Westernblot检测K-ras基因表达上调,C/EBPαmRNA和ANXA1蛋白表达明显上调;免疫组化法也显示结肠癌细胞中的C/EBPαmRNA和蛋白表达明显上调,定位在细胞核内。CCK-8法检测SW620和LOVO细胞生长增殖的结果显示,Ad C/EBPα感染7 d后出现明显的生长抑制。Ad C/EBPα感染结肠癌细胞株SW620和LOVO 5 d后,流式细胞仪检测结果表明细胞株凋亡率差异无统计学意义。而体外分离细胞的实验结果表明,Ad C/EBPα感染7 d后,结肠癌SW620和LOVO细胞的存活率明显降低。经C/EBPα治疗实验性结肠癌或肝转移小鼠,发现其能显著抑制瘤体重量和体积,且采用Real-TimeRT-PCR法检测发现经C/EBPα治疗的小鼠其K-ras基因和ANXA1蛋白表达明显低于未经治疗组,提示C/EBPα对结肠癌及其肝转移的作用与Raf/MEK/ERK/MAPK细胞信号通路的激活有关系,从分子水平揭示了C/EBPα的作用机制。结论本研究提示C/EBPα治疗结肠癌转移的分子机制为激活Ras/Raf/MEK/ERK/MAPK细胞信号通路,下调ANXA1表达和K-ras基因,从而抑制肿瘤细胞的增殖、生长和远端转移。

外周血二氢尿嘧啶脱氢酶活性对胃癌氟尿嘧啶化疗耐药影响的前瞻性研究

目的 探讨胃癌对氟尿嘧啶化疗耐药的机制，从细胞培养水平上论证外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶（DPD）活性对氟尿嘧啶化疗耐药的影响。方法 采用间接法测定45例胃癌患者外周血DPD活性，根据结果分为高活性组（≥2.27，共23例）和低活性组（〈2．27，共22例）。应用MTT法计算患者体外培养胃癌细胞氟尿嘧啶抑制率，并进行比较。结果 高活性组氟尿嘧啶的抑制率[（47．6±4．0）％]明显低于低活性组[（53．7±8．0）％]。结论 外周血DPD活性可作为预测氟尿嘧啶化疗耐药的简便指标。