蝉花虫草多糖脱蛋白研究

蝉花虫草粗多糖中杂有蛋白、核酸、酚类等物质,给多糖的分离纯化带来许多干扰,为了排除杂质干扰,获得较为纯净的多糖组分,采用Sevag法和大孔树脂吸附法相结合对蝉花虫草粗多糖进行了脱蛋白试验。结果表明:采用大孔树脂法或Sevag法均不能完全去除粗多糖中的游离蛋白,两种方法结合脱蛋白除杂效果较为理想,蛋白去除率达96%以上。初步分离获得大孔树脂水相洗脱部位和20%乙醇洗脱部位2种主要多糖组分。综合分析,先用Sevag法脱蛋白2～3次,再用大孔树脂AB-8吸附分离,或先大孔树脂AB-8吸附分离获得不同多糖组分,再用Sevag法辅助脱蛋白1～2次,两种方法去除蝉花虫草粗多糖中蛋白的效果均较好。

几种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内抑菌研究

本文选用本地市面上常用的10种防治细菌性病害的药剂对番茄青枯病菌进行了室内抑菌测定,以期筛选出防效较好的药剂。采用平板打孔抑菌圈法测定结果表明,30%甲霜·恶霉灵水剂和2%春雷霉素水剂抑菌率较高,为第一档优选药剂,其次是20%噻森酮悬浮剂、53.8%氢氧化铜水分散粒剂和47%春雷·王铜可湿性粉剂3种铜制剂为第二档选择药剂,而3%N-糖苷类生物源抗生素和5%氨基寡糖素水剂寡糖类为第三档选用药剂,生产实践中需不同药剂种类进行科学合理混用或轮换使用。而一直以来防治青枯病的主推生物药剂芽孢杆菌则抑菌作用表现不佳,可能与该类活体菌剂货架期等因素导致药性失活等有关,具体有待进一步验证。本研究为更好地实施番茄青枯病的田间防控提供依据,为番茄优质生产提供指导。

虫草蝉花废弃培养基对肉鸡免疫因子及生长发育的影响

蝉花（Cordyeps cicadae）是由麦角菌科（Claviceptaceae）的蝉拟青霉[Paecilomyces cicadae（Miquel）Samson4]真菌寄生于蝉（Platylomia pie li Koto）若虫的虫菌复合体,是一类珍贵的传统中药。现代药理研究表明天然蝉花及人工培养蝉花中含有多糖,腺苷和N6-（2-羟乙基）腺苷等核苷类物质,氨基酸,生物碱及麦角甾醇等多种活性物质,具有明显的解热镇痛、抗惊厥等作用,

灵芝栽培技术研究进展

本文作者从灵芝菌种的选择、栽培方式选择、生长条件、生长时间、出芝管理、灵芝的采收、灵芝的品质等方面对灵芝栽培技术的研究进展进行了综述,以期为灵芝资源的开发利用提供技术参考。

温州城市绿化有害生物风险评估模型的建立及几种有害生物的风险评估

参照国际上有害生物危险性分析方法和已有模型,利用德尔菲法,采用delphi 7.0可视化编程技术开发了温州城市绿化有害生物风险评估模型微型软件。利用该风险评估模型软件,并结合温州资源和城市绿化状况及有害生物发生情况,对红棕象甲、椰心叶甲、家白蚁、松材线虫、凤眼莲、假高粱、日本菟丝子、一枝黄花、橘小实蝇和樟巢螟在温州城市绿化中的风险性进行了分析和评价。评估城市绿化有害生物不同危险程度可为制定相关风险管理策略提供依据。

蝉花多糖和植物提取物对雁荡麻鸡生长性能和免疫功能的影响

本试验旨在探讨蝉花多糖和植物提取物对雁荡麻鸡生长性能和免疫功能的影响。随机选取同一批次的1日龄雁荡麻鸡雏鸡315只,随机分为7组,分别为空白对照组(A组)、免疫对照组(B组)、抗生素对照组(C组)、蝉花多糖组(D组)、蝉花多糖植物提取物低剂量复合组(E组)、蝉花多糖植物提取物高剂量复合组(F组)和植物提取物组(G组),每组3个重复,每个重复15只。分别于11~17日龄和25~31日龄每天1次灌服试验鸡,其中A组和B组各灌服生理盐水0.5 mL/只,C组灌服杆菌肽锌0.5 mL/只(50 mg/kg BW),D^G组分别灌服蝉花多糖0.5 mL/只(50 mg/kg BW)、蝉花多糖(25 mg/kg BW)+植物提取物(125 mg/kg BW)0.5 mL/只、蝉花多糖(50 mg/kg BW)+植物提取物(125 mg/kg BW) 0.5 mL/只和植物提取物0.5 mL/只(250 mg/kg BW)。试验期42 d。结果显示:1)10~28日龄,D^G组雁荡麻鸡平均日增重均显著高于B组(P<0.05);与B组、C组相比,G组料重比有所降低(P>0.05)。2)29~42日龄,D组、F组雁荡麻鸡平均日增重显著高于B组、C组(P<0.05)。3)42日龄,与B组相比,D组、E组雁荡麻鸡体重显著提高(P<0.05)。4) F组、G组雁荡麻鸡血清免疫球蛋白A含量显著高于A组、C组(P <0.05),F组雁荡麻鸡血清免疫球蛋白G含量显著高于A^C组(P <0.05),D组、F组雁荡麻鸡血清补体3含量显著高于C组(P<0.05)。5)与A组、B组相比,E组、G组雁荡麻鸡血清干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-2含量均显著提高(P<0.05),D组、F组雁荡麻鸡血清白细胞介素-4含量显著高于A^C组(P<0.05)。综上可知,蝉花多糖、植物提取物及其复合物能促进雁荡麻鸡生长,提高其免疫力。本试验条件下,蝉花多糖(50 mg/kg BW)+植物提取物(125 mg/kg BW)高剂量复合组效果最佳。

红火蚁的危害及防控策略

本文介绍红火蚁的发生起源、危害特点,入侵我国时间、过程,给人类社会带来的危害损失,并对红火蚁的防控技术现状进行概述。

桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-2的分离纯化与鉴定

采用阳离子交换层析、RP-FPLC及RP-HPLC分离纯化技术,从细菌诱导的桔小实蝇蛹中分离鉴定出桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-1的同系物Bactrocerin-2。结果表明:Bactrocerin-2含有20个氨基酸残基,分子量为2 311.51 u,序列为VTKTWIKVIRGIGKSKIKWA;并且Bactrocerin-2与Bactrocerin-1的相似性极高,氨基酸同源性达到90%;该肽与鞘翅目Coleoptericin C-末端的20个氨基酸也具有较高的相似性。氨基酸组成分析结果表明,该肽是一种疏水、带正电荷的抗菌肽。该研究将有助于对昆虫天然免疫反应的认知,并为设计有效的抗菌分子奠定基础。

植物激活蛋白对大棚草莓产量及品质的影响

在草莓盛花期前采用叶面喷施的方法连续二次使用3%植物激活蛋白,研究其对草莓的产量和品质的影响,结果表明,与空白对照清水处理组相比,施用3%植物激活蛋白800~1 000倍液,能极显著的提高草莓的产量和品质。其中3%植物激活蛋白可湿性粉剂800倍液、1 000倍液能显著提高草莓的平均单果重和平均单株产量(5%),3%植物激活蛋白可湿性粉剂800倍液处理组单株产量极显著高于1%超级Harpin蛋白(1%);3%植物激活蛋白可湿性粉剂800倍液处理组草莓果实总糖、固形物、维生素C含量均极显著高于1%超级Harpin蛋白(1%)。本研究还发现,3%植物激活蛋白可湿性粉剂处理能显著降低草莓的硬度,因此,经3%植物激活蛋白可湿性粉剂处理后的草莓要尽量避免长途运输和储藏。

HarpinEa蛋白制剂及绿颖对杨梅品质和采后保鲜的影响

本试验研究了HarpinEa蛋白制剂及绿颖喷施杨梅果树对杨梅品质和采后果实保鲜的影响,结果表明,HarpinEa蛋白制剂能够显著改善东魁杨梅的品质和风味口感,并具有鲜果保鲜的功效;绿颖对提高杨梅产量和成熟果实保鲜效果显著。说明HarpinEa蛋白制剂及绿颖的推广应用对无公害杨梅的生产意义重大。

蝉花虫草提取物N^6-(2-羟乙基)腺苷对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

研究蝉花虫草提取物N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion,IR)的影响。选择20–25g雄性C57BL/6小鼠,随机分成5组。假手术组小鼠仅接受腹中线开腹、游离双侧肾蒂及缝合腹部操作;IR组小鼠制成肾脏IR模型,不给药;HEA低剂量组、HEA中剂量组、HEA高剂量组分别在建立肾脏缺血再灌注模型前15min腹腔注射HEA(2.5mg/kg、5mg/kg和7.5mg/kg)。再灌注24h后检测各组肾功能指标血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平。苏木精-伊红染色后用光学显微镜观察肾脏组织形态学改变。电镜和TUNEL分析法观察肾小管上皮细胞凋亡状况。实时荧光定量RT-PCR检测细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等基因的m RNA的表达情况。结果显示,与假手术组比较,IR组BUN和Scr水平明显升高(P<0.01,P<0.05);肾脏病理表现为上皮细胞碎片和管型,且最为严重;与IR组比较,HEA 7.5mg/kg组血清BUN和Scr水平显著降低(P<0.05);HEA 5mg/kg组和HEA 7.5mg/kg组肾损伤情况明显改善(P<0.05,P<0.01);电镜观察可知HEA 7.5mg/kg组明显改善肾小管上皮细胞的损伤程度,并且保护线粒体和细胞核膜的完整性。原位末端标记法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]显示HEA治疗组凋亡细胞数量明显低于IR组(P<0.01)。HEA治疗组ICAM-1、IL-1β和TNF-αm RNA的水平均低于IR组(P<0.01)。所以预处理HEA 7.5mg/kg对肾脏缺血再灌注有保护作用。

生防药剂对草莓灰霉病的防治效果

为筛选适用于防治草莓灰霉病的生防药剂,测定了4种生防药剂对灰霉病菌的抑制效果,并开展了田间药效试验。室内生测结果表明:4种供试药剂均能明显抑制灰霉菌的菌丝生长,其中多抗霉素的抑菌效果最高,抑制率达100%。田间药效调查结果表明:4种供试药剂控病保果的效果较为接近,第2次药后14 d防效在84.24%~89.13%,显著高于对照药剂腐霉利,持效性较好。

蝉花虫草镇痛化合物对痛风大鼠转录组及Adora1等疼痛相关基因的影响

本研究采用活性追踪的方法从蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera中分离提取了镇痛活性物质N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA],并通过转录组测序技术探索了HEA对痛风模型大鼠疼痛相关基因的影响。结果表明932个基因存在差异表达,将差异基因与在线疼痛基因大数据及相关文献进行比对,发现了57个疼痛相关基因,其中12个基因与镇痛相关,包括上调表达的腺苷A1受体基因(Adora1)及A2A受体基因(Adora2a)。应用Western blot的方法验证了HEA(7.5mg/kg)诱导镇痛靶标受体腺苷A1受体(A1R)表达上调、腺苷A2A受体(A2AR)表达下调。选择性A1R拮抗剂DPCPX显著抑制HEA对A1R的上调表达作用。综上所述,蝉花虫草的镇痛活性物质为HEA,而HEA可能通过激活腺苷A1R、下调A2AR及调控一系列疼痛相关基因发挥其镇痛作用。

蝉花多糖对肉鸡生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响

为探讨蝉花多糖对肉鸡生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响,试验选取270只1日龄雁荡麻鸡,公母各半,随机分为6组,每组3个重复,每个重复15只。在11~17日龄和25~31日龄,A组(非免疫)和B组(免疫)灌服生理盐水,C组灌服杆菌肽锌(50mg/kg),D~F组分别灌服蝉花多糖25,50,100mg/kg、1次/d、0.5mL/次,试验期42d。结果显示,E组28日龄体质量显著高于A~C组(P<0.05),42日龄体质量显著高于B、C组(P<0.05);E组8~28日龄平均日增体质量(ADG)显著高于B、C组(P<0.05),料重比(F/G)显著优于A~C组(P<0.05);29~42日龄E、F组ADG显著高于C组(P<0.05),D组F/G显著低于C组(P<0.05);E组全期ADG高于其余各组且显著高于B组(P<0.05),D、F组全期F/G显著低于C组(P<0.05);D、E组血清中T-AOC、SOD含量显著高于A、C组(P<0.05),GSH-Px含量显著高于A~C组(P<0.05);E、F组的α、β多样性,Shannon指数较B、C组降低,表明蝉花多糖对雁荡麻鸡肠道菌群有一定影响;在属水平上,E、F组拟杆菌属较B、C组有增加,E组粪杆菌属较C组有增加;Lefse分析在E组中富集的菌群有拟杆菌属(Bacteroides)、拟杆菌科(Bacteroidaceae)、梭菌属(Fusobacterium),F组富集的菌群有巨单胞菌属(Megamonas)、Negativicutes纲、Selenomonadales目、韦荣菌科(Veillonellaceae);通过KEGG代谢通路途径差异分析,E组中的免疫系统、环境适应等通路,F组中核苷酸代谢、消化系统通路均与C组存在显著性差异。由此可见,蝉花多糖能提高雁荡麻鸡体质量、平均日增体质量,降低料重比,并提高雁荡麻鸡血清抗氧化水平,在一定程度上能影响鸡肠道微生物菌群多样性。本试验条件下,蝉花多糖灌服剂量为50mg/kg时效果较佳。

从蝉花虫草提取的N^6-(2-羟乙基)腺苷的降压活性及其与人血清白蛋白的相互作用

从蝉花虫草中提取分离了N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA],对其降压机制及其与人血清白蛋白的相互作用进行了研究,揭示了降压机制以及在体内的传输机制。研究结果表明使用水沉醇提法提取HEA,HEA的纯度达到95%以上。HEA低(2.5mg/kg)、中(5mg/kg)、高(7.5mg/kg)浓度组腹腔注射高血压大鼠体内,HEA具有显著降压效果,中浓度组表现出较稳定的降压作用,其机制可能是激活腺苷A1受体。在HEA与人血清白蛋白结合过程中,范德华力、氢键和疏水作用力是结合过程中的主要作用力,HEA在位点I与人血清白蛋白进行结合,结合过程轻微地改变人血清白蛋白的结构和微环境。分子对接结果表明,Ser-192、Lys-195、Arg-257、Ser-287和Arg-291是HEA与人血清白蛋白结合过程中重要的氨基酸残基。

蝉花多糖对肉鸡脂质代谢和免疫功能的影响

为探究在雏鸡生长中添加蝉花多糖对鸡脂质代谢及免疫功能的影响,试验选取270只雁荡麻鸡,随机分成6组,公母各半,每组3个重复,每个重复15只。每只鸡分别于11~17日龄和25~31日龄灌服(1次/d),其中Ⅰ组(非免疫)和Ⅱ组(免疫)各灌服生理盐水,Ⅲ组灌服杆菌肽锌(50 mg/kg),Ⅳ~Ⅵ组分别灌服25,50,100 mg/kg的蝉花多糖,每只0.5 mL,试验期42 d。结果显示:Ⅳ~Ⅵ组血清中TC含量显著低于Ⅲ组(P<0.05),Ⅳ组TC含量和Ⅴ组TP含量显著优于Ⅰ~Ⅲ组(P<0.05),Ⅵ组TP含量和Ⅴ组GLB含量显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),Ⅵ组GLB含量和Ⅳ组TG含量显著优于Ⅰ组(P<0.05);Ⅳ~Ⅵ组脾脏指数和法氏囊指数高于Ⅲ组(P>0.05);Ⅴ组血清中免疫球蛋白A(IgA)含量显著高于Ⅰ、Ⅱ组,Ⅴ组血清中补体C3(C3)含量显著高于Ⅰ~Ⅲ组(P<0.05),Ⅳ组血清中补体C4(C4)含量显著高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);Ⅴ组血清中干扰素-γ(IFN-γ)含量、Ⅳ组血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及Ⅳ~Ⅵ组血清中白介素-2(IL-2)含量均显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),Ⅴ组血清中TNF-α含量显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),Ⅴ、Ⅵ组血清中白介素-4(IL-4)含量显著高于Ⅱ组(P<0.05)。结果表明,蝉花多糖能提高雁荡麻鸡脂质代谢和免疫能力。本试验条件下,蝉花多糖中剂量组(50 mg/kg)效果最佳。

人工蝉花多糖对三黄鸡免疫功能及部分相关因子基因表达的影响

为探究蝉花多糖对放养三黄鸡禽流感疫苗免疫效果的影响,选取1日龄同日出雏三黄鸡1 500只随机分为3组,每组500只。其中:对照组饲喂基础饲粮,蝉花多糖组在基础饲粮中添加0.5 g/kg蝉花多糖(相当于添加蝉花粗多糖1.12 g/kg),蝉花菌丝体组在基础饲粮添加20 g/kg蝉花菌丝体(相当于添加蝉花粗多糖2.84 g/kg)。试验期共51 d。结果:蝉花菌丝体组51日龄时H5-Re8、H7N9抗体水平最高,且显著高于其他2组(P<0.05)。与对照组相比,蝉花多糖组白细胞介素1(IL-1)含量、27和51日龄时白细胞介素4(IL-4)含量、蝉花多糖组27日龄时干扰素-γ(IFN-γ)含量均显著升高(P<0.05);蝉花菌丝体组51日龄时IL-4含量、27日龄时IFN-γ含量显著提高(P<0.05);蝉花多糖组27、51日龄时、蝉花菌丝体组37日龄时肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著升高(P<0.05)。蝉花多糖组、蝉花菌丝体组脾脏组织中IFN-γ、IL-4的mRNA表达量较对照组呈上升趋势(P>0.05)。试验表明在三黄鸡日粮中添加蝉花多糖、蝉花菌丝体可以提高鸡的体液免疫水平。