组蛋白去甲基化酶3调控SESN2介导的线粒体自噬在脓毒症心肌损伤中的机制研究

目的探讨组蛋白去甲基化酶3(JMJD3)调控SESTRIN 2蛋白重组蛋白(SESN2)介导的线粒体自噬在脓毒症心肌损伤(SIMI)中的作用,并分析其机制。方法20只SD大鼠按随机数字表法分为对照组和SIMI组,每组10只。SIMI组大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg(2 mL/kg)构建脓毒症大鼠模型,对照组大鼠按2 mL/kg注射0.9%氯化钠注射液。采用HE染色检测大鼠心脏组织病理学变化,ELISA法测定大鼠血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、TNF-α和IL-6水平,Western blot法测定大鼠心脏组织中JMJD3和SESN2蛋白表达水平。使用LPS(10μg/mL)处理H9C2细胞48 h,构建脓毒症细胞模型,随机分为对照组、LPS组、LPS+JMJD3表达的小干扰RNA(si-JMJD3)组、LPS+si-JMJD3+SESN2表达的小干扰RNA(si-SESN2)组、LPS+SESN2过表达(oe-SESN2)组和LPS+oe-SESN2+JMJD3过表达(oe-JMJD3)组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法测定细胞凋亡水平,ELISA法测定细胞培养上清液中TNF-α和IL-6水平,Western blot法测定凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X基因(Bax)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3(LC3)、重组人自噬效应蛋白(Beclin1)、选择性自噬接头蛋白(p62)]及JMJD3和SESN2蛋白表达水平。结果与对照组比较,SIMI组大鼠心脏组织心肌纤维束排列松散,部分心肌纤维断裂溶解,伴有间质水肿和炎症细胞浸润。与对照组比较,SIMI组大鼠血清中cTnT、TNF-α和IL-6水平均升高,心脏组织中JMJD3蛋白表达水平升高,而SESN2蛋白表达水平降低(均P<0.01)。与对照组比较,LPS组细胞培养上清液TNF-α和IL-6水平升高,JMJD3蛋白表达水平升高,SESN2蛋白表达水平降低,同时,细胞活性减弱,凋亡水平增强(均P<0.05)。JMJD3敲低后SESN2蛋白表达水平升高,细胞活性增强,凋亡水平减弱,同时自噬水平增强(均P<0.05),而进一步敲低SESN2后,以上趋势发生逆转。相反,SESN2过表达后,细胞自噬水平增强,细胞活性增强,凋亡水平减弱(均P<0.05);而进一步过表达JMJD3后,SESN2蛋白表达水平降低,同时oe-SESN2对LPS-H9C2的作用能被oe-JMJD3逆转。结论JMJD3通过调控SESN2介导线粒体自噬,促进心肌细胞损伤和凋亡,从而促进SIMI的发展。

青少年胰腺手术引起远期心理问题1例

患者,女,19岁,学生,因"乏力、注意力及学习成绩下降3个月"于2021年7月7日来浙江省人民医院就诊。患者3个月前无明显诱因出现乏力,注意力下降,学习能力下降,情绪低落,伴暴食,但体重增加时能自行节食。平素容易情绪低落,反复思虑不好的事,伴焦虑烦躁,紧张担心,情绪易怒且不稳定。对于日常的生活、学习等兴趣索然,有比较强烈的无助感和无力感。患者在外院行近红外、脑地形图、脑电图等检查未见明显器质性脑病,诊断为"抑郁症伴焦虑"。3个月来予心理及药物治疗,并通知父母陪读,效果不佳。个人史:4年前因胰头巨大肿瘤于本院行腹腔镜胰十二指肠切除术,手术顺利,术中未输血。术前MRI示胰头囊实性病变(图1)。术中见胰头部7 cm×5 cm囊实性肿块,边界清。术后病理:实性假乳头状肿瘤伴大片出血坏死(图2);区域淋巴结未见转移。术后恢复顺利,无并发症,术后第10天出院。患者父母细心照料,重视营养均衡饮食,患者一般状态好,学习成绩良好,术后第4年外出上学。月经史:平素月经量正常。查体:身高169 cm,体重64 kg,BMI 22.4 kg/m2。脸色稍苍白。表情忧愁,查体合作。一问一答,对答切题。思维清晰,稍显消极,逻辑清晰,反复思虑困境和不好的结果,对未来缺乏信心。自我评价低于实际状态,自信受挫。情绪低落,焦虑烦躁,易怒且不稳定。有比较强烈的无助感和无力感。心理测试结果:症状自评量表(SCL90):躯体化2.33,强迫2.8,人际关系敏感3.56,抑郁3.46,焦虑3.10,敌对2.33;抑郁自评量表(SDS):81分;焦虑自评量表(SAS):60分;汉密尔顿焦虑量表(HAMA):18分;汉密尔顿抑郁量表(HAMD):32分。化验:血红蛋白85 g/L,红细胞4.44×1012/L,红细胞压积29%。增强CT:胰头缺如,肿瘤未见复发,胰体尾胰管未见扩张。诊断:抑郁、焦虑状态;中度贫血;胰头肿瘤,胰十二指肠切除术后。经精神心理科、普外科、血液科等多学科会诊,认为该患者有缺铁性贫血,4年前有胰十二指肠切除手术史,目前没有肿瘤复发(图3),也没有消化道及妇科失血。可能因胰腺手术后胃部吸收铁剂有一定影响,由于住校后饮食不均衡,造成铁剂摄入不足,从而出现中度缺铁性贫血,需补铁治疗。长期缺铁性贫血可引起乏力、头晕、耳鸣、注意力不集中、记忆力减退等症状,而这些症状造成刚入学、独自生活学习的女生无法很好适应大学生活和学习,进而出现抑郁、焦虑。心理评估后认为其抑郁症状可先予心理支持,等缺铁性贫血纠正后观察患者情绪状态。患者补铁治疗1个月后血红蛋白升到99 g/L,2个月后达正常水平,体力明显恢复;患者情绪稳定,注意力容易集中,学习能力增强,能很好地融入校园生活。随访2年至2023年7月学习成绩一直良好。