USP10与肺发育及相关疾病

泛素特异性蛋白酶10(ubiquitin-specific protease 10,USP10)作为去泛素化酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)家族的重要成员之一,通过去泛素化数十种底物蛋白调节多种细胞功能。USP10的异常表达参与多种病理进程,如肿瘤恶化、造血功能障碍、非酒精性脂肪肝、纤维化等。最近的研究显示,USP10在肺癌以及其他肺部疾病如囊性纤维化(cysticfibrosis,CF)中发挥重要作用。因此,本文对USP10的生物功能和调节机制进行系统的回顾与总结,为进一步探索其在疾病治疗方面的潜力提供新的见解。本综述将重点讨论USP10从肺发育到肺癌以及肺部纤维化的潜在作用及可能机制。

YWHAZ在非小细胞肺癌中的研究进展

YWHAZ隶属14-3-3蛋白家族成员,在真核细胞中普遍表达,主要作为伴侣蛋白经磷酸化伴侣相互作用的方式调控细胞信号转导、细胞周期、细胞迁移等生理功能。在病理情况下,异常表达的YWHAZ可以参与肿瘤的恶性转化。YWHAZ作为原癌基因,在包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的发生发展中发挥重要作用。YWHAZ在非小细胞肺癌中异常高表达,YWHAZ的异常高表达与肿瘤细胞增殖抵抗凋亡、侵袭迁移和抗肿瘤药物耐药等恶性生物学行为密切相关,但其潜在的分子机制仍未完全阐明,未来仍需更多研究揭示其中的分子机制,以将YWHAZ作为潜在诊治靶点进行抗肿瘤药物开发。

基于临床生物信息学技术的慢阻肺危险因素、病因与发病机制研究

"十三五"国家重点研发项目"基于临床生物信息学技术的慢阻肺危险因素、病因与发病机制研究"(2016YFC 1304000)通过了国家验收.项目牵头单位为温州医科大学附属第一医院,项目负责人为陈成水教授.项目取得的系列成果在慢阻肺临床进程研究等方面得到应用.

自噬流在细颗粒物诱导的气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10调控自噬流的抗炎效应

目的:探讨自噬流在细颗粒物(PM)诱导气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10(FGF10)是否通过调控自噬流发挥抗炎效应。方法:选取雄性C57BL/6小鼠进行随机分组,预先1 h给予5 mg/kg FGF10气道滴注,然后予以4 mg/kg PM气道滴注,连续气道滴注2 d,构建动物模型,具体分组:空白对照(vehicle)组、FGF10组、PM组和PM+FGF10组。获取肺组织进行病理分级评分,获取支气管肺泡灌洗液(BALF)以ELISA检测炎症介质白细胞介素6(IL-6)、IL-8、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌,获取肺组织蛋白以Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。预先给予4 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激人正常气道上皮BEAS-2B细胞1 h,Western blot检测NF-κB通路p65和IκBα磷酸化水平。预先给予4mmol/L 3-MA或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞24 h,ELISA检测炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α的分泌,Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。结果:动物模型中PM短时暴露可以诱导C57BL/6小鼠气道炎症的改变,伴随BALF中炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α升高,肺组织发生自噬流异常;FGF10干预可以逆转PM诱导的气道炎症和炎症介质分泌,伴随着自噬流的改变。细胞模型中PM可以诱导BEAS-2B细胞炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α分泌,3-MA干预或FGF10干预可以逆转炎症介质的分泌,3-MA干预可以逆转NF-κB通路的改变,FGF10干预可以逆转自噬流的改变。结论:FGF10在PM诱导的气道炎症中发挥抗炎效应,其中分子机制涉及自噬和NF-κB信号通路。

PM诱导支气管上皮细胞炎症反应及内质网应激机制研究

目的探讨细颗粒物(PM)诱导气道炎症中支气管上皮细胞内质网应激(ERS)现象和氧化应激的调控机制。方法雄性C57BL/6小鼠用4 mg/kg PM连续气道滴注2 d,构建动物模型。获取空白组和PM组小鼠肺组织进行病理分级评分;采用Western blot法检测肺组织葡萄糖调节蛋白前体78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)的相对表达量,采用免疫组化法检测GRP78和CHOP的累计光密度值,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定肺组织中丙二醛(MDA)质量摩尔浓度。获取肺泡灌洗液,ELISA法检测IL-6、IL-8和前列腺素E(PGE)的分泌水平。用100、200、400 mg/L PM和2.5 mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)、200 mg/L PM与支气管上皮细胞BEAS-2B共培养,构建细胞模型。检测各组细胞活性氧(ROS)变化。Western blot法检测NAC干预下的BEAS-2B中GRP78和CHOP表达变化,ELISA法检测炎症介质分泌水平。结果气道滴注PM诱导C57BL/6小鼠支气管病理形态学改变,肺组织GRP78、CHOP表达升高(P<0.05),肺组织MDA质量摩尔浓度升高(P<0.05),伴随肺泡灌洗液中IL-6、IL-8和PGE分泌增多(P<0.05)。细胞模型中,PM作用下各组细胞ROS表达水平均升高(均P<0.05)。NAC干预后细胞ROS表达水平降低(P<0.05),CHOP/GRP78相对表达量降低(P<0.05),IL-6、IL-8和PGE分泌水平降低(P<0.05)。结论PM诱导的支气管上皮细胞炎症中存在内质网应激现象,其调控机制为氧化应激。

FGF10干预PM诱导支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)表达的分子机制

目的探讨成纤维生长因子10(FGF10)对细颗粒物(PM)诱导支气管上皮细胞表达环氧合酶2/前列腺素E_(2)(COX2/PGE_(2))的作用及其分子机制。方法雄性C57BL/6小鼠给予0.5 mg/kg FGF10腹腔注射和4.0 mg/kg PM气道滴注,构建动物模型,设置空白组、FGF10组、PM组和PM+FGF10组。获取各组肺组织并进行病理分级评分,采用Western blot法检测各组肺组织中COX2的相对表达量,采用免疫荧光法检测支气管上皮中COX2的相对表达量,采用ELISA法检测肺泡灌洗液中PGE_(2)的分泌水平。先给予5 mmol/L ERK1/2抑制剂(U0126)/PI3K抑制剂(LY294002)干预,然后10μg/L FGF10干预,最后200 mg/L PM刺激支气管上皮细胞BEAS-2B,构建细胞模型,设置空白组、PM组、PM+FGF10组、PM+FGF10+LY294002组和PM+FGF10+U0126组。采用ELISA法检测各组细胞PGE_(2)分泌水平,采用Western blot法检测各组细胞COX2的表达水平。同时进行细胞计数、线粒体功能和乳酸脱氢酶分泌分析等细胞功能检测。结果动物模型中,气道滴注PM诱导C57BL/6小鼠支气管病理形态学的改变,伴随肺泡灌洗液中PGE_(2)分泌增多(P<0.05),肺组织COX2表达升高(P<0.05),支气管上皮COX2荧光强度升高(P>0.05)。FGF10干预下,PM诱导支气管炎症和COX2/PGE_(2)表达被逆转(P<0.05)。细胞模型中,PM诱导支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)表达水平升高(P<0.05),FGF10干预下,COX2/PGE_(2)的表达均降低(P<0.05),BEAS-2B细胞计数、线粒体功能和乳酸脱氢酶分泌等细胞功能改变(P<0.05)。就分子机制而言,LY294002和U0126逆转了FGF10对PM诱导COX2/PGE_(2)表达的调控作用(P<0.05)。结论FGF10可以调控PM对支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)的诱导表达,其分子机制涉及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路。

成纤维细胞生长因子10在肺损伤性修复中的研究进展

成纤维细胞生长因子(FGF)10来源于间充质细胞,介导间充质-上皮之间的信号转导,调控支气管-肺泡上皮细胞的增殖分化,在胚胎支气管-肺的形态发生过程中发挥重要调控作用。伴随组织修复和再生医学的兴起,FGF10在肺损伤中的修复能力开始受到关注,FGF10-FGF受体2b信号通路决定了FGF10靶向调控支气管-肺泡上皮的细胞特异性,在支气管-肺泡上皮的损伤性修复中发挥调控作用。然而,FGF10在肺损伤性修复中的表达调控和促进上皮修复的分子机制尚未明确,未来仍需更多研究进一步阐明其促进肺损伤性修复的分子机制。

接受抗真菌药物治疗肺隐球菌病患者胸部CT和隐球菌荚膜抗原滴度的动态观察

目的观察胸部CT和隐球菌荚膜抗原(CrAg)试验在肺隐球菌病(PC)治疗中的动态变化.方法回顾性分析2015年1月至2018年4月,温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科收治的PC病例.收集临床资料、治疗前后胸部CT表现及血清CrAg试验滴度.根据患者病史和基础疾病是否存在免疫损害或导致免疫抑制易感因素分为免疫正常组和免疫损害组,并进行比较分析.结果82例PC,确诊52例(63.4%),临床诊断30例(36.6%).男46例(56.1%),女36例(43.9%).有基础疾病45例(54.9%).免疫正常组54例(65.9%),免疫损害组28例(34.1%).抗真菌治疗疗程(7.9±2.4)个月,随访时间(24.0±10.0)个月.抗真菌治疗3~6个月后复查胸部CT,免疫正常组64.8%患者病灶吸收≥75%,免疫损害组67.9%患者病灶吸收≥75%.实变浸润型88.9%患者病灶吸收≥75%,而结节肿块及混合型63.0%患者病灶吸收≥75%.55例PC抗真菌治疗前血清CrAg滴度为1∶40(1∶4~1∶640),治疗后血清CrAg滴度全部下降,20例PC血清CrAg试验滴度最终转阴,转阴时间(11.8±8.1)个月.24例患者停药时血清CrAg试验滴度转阴或降至1∶1,治疗前滴度为1∶20(1∶5~1∶160),31例PC停药时血清CrAg试验滴度未转阴,治疗前滴度为1∶64(1∶4~1∶640),停药时滴度仍为1∶10(1∶2~1∶160).结论PC经抗真菌治疗后,不论免疫损害和免疫正常宿主,胸部CT病灶可明显吸收,其中实变浸润型吸收较快,结节肿块型及混合型吸收缓慢.CrAg经治疗后滴度可逐渐下降.

Parkin调控凋亡、坏死性凋亡和焦亡的研究进展

细胞的死亡有多种形式,包括凋亡、坏死性凋亡、焦亡等,各具有独特的分子特征,发挥着不同的功能。近年来,对各种死亡形式的功能和机制研究不断深入,围绕着细胞死亡途径的特征分子及其调控取得重要进展。Parkin作为E3泛素连接酶,通过其对底物的泛素化修饰,而发挥多种生物学功能。除了其被熟知的介导线粒体自噬途径之外,近年的研究还发现Parkin通过直接泛素化修饰多种"死亡"特征分子调控细胞死亡进程和肿瘤的发生。该文综述了Parkin参与调控细胞死亡进程的作用和方式,对其以线粒体自噬依赖和非依赖的方式调控细胞死亡的机制深度解析,以揭示细胞死亡相关的分子生物学奥秘。