大麦成熟胚胚性悬浮细胞系的建立及植株再生

利用10个大麦品种成熟胚,在MS培养基上诱导愈伤组织,挑选不同培养时期的胚性愈伤组织在不同的液体培养基中进行悬浮培养。结果表明,愈伤组织继代培养时期和悬浮培养基对细胞系的建立有很大影响,一般以继代培养80-100天为最适;液体培养基以AA和MS较好。在AA培养基中加入AgNO_3Na_2S_2O_3可显著促进细胞生长和阻止愈伤组织长根和长芽或变褐死亡。悬浮培养过程中,细胞生长可分为三个时期,各时期细胞生长表现不同的特性,需采取不同的转培处理措施。经10-17周悬浮培养,在5个基因型中成功地建成了8个细胞团小、呈黄色或淡黄色、胞质浓、生长快的悬浮细胞系。植板后,除了2个再生白化苗,1个未能再生外,其余5个细胞系均再生了绿苗。

六棱大麦“Frances”游离小孢子的分离、培养与植株再生

大麦小孢子单核中期的穗，经4℃预处理4星期后，直接剪成小段，捣碎、过滤、离心和洗涤后收集小孢子。用MSm＋Maltose60.0g／L＋1．0mg／LBAP对小孢子慢速振荡培养，7天后可观察到小孢子分裂的小细胞团，经3星期左右培养，小细胞团总数达最高，其频率为总小孢子的2．36％。这些小细胞团80％发育为类似体细胞胚结构，20％为典型愈伤组织，类似体细胞结构胚置于1／2MS＋1.0mg／LBAP＋0．2mg／LNAA＋0．2mg／LZT分化培养基上，总分化频率为67％，其中绿苗率为39％，愈伤组织经胚性改造后，在1／2MS＋4．0mg／LBAP＋0．5mg／LNAA＋0.5mg／LIAA培养基上分化，总分化频率为62％，绿苗率为18％。

转基因蚕研究进展概述

转基因动、植物的研究,是近年来在基因工程中发展很快的一个研究领域,已经有转基因牛、猪和转基因水稻,棉花获得成功并在生产中应用推广.家蚕作为一种独特的经济昆虫被人们利用已有数千年的历史,蚕的许多遗传背景和生理生化反应机制已被阐明,这些知识和成果的积累无疑为开展转基因蚕的研究,奠定了良好的基础.因此,尽管转基因蚕的研究起步较迟,但已有一些颇有趣味的研究结果崭露,本文就近年来的研究结果作一概述.

利用PCR技术克隆家蚕丝素基因启动子片段

家蚕丝素(fibroin)是由一条约370kD的重链和一条约25kD的轻链,通过二硫键连接而成。为其编码的两个基因在后丝腺内等量、同步表达。它们5′端上游的转录调控区同源性很强,说明重链与轻链受同—机制调控。