新型布尼亚病毒感染的流行病学及诊治进展

近年来，中国部分地区相继发现并报道了以发热伴血小板减少为主要表现的感染性疾病病例，其中少数重症患者因多器官功能损害，救治无效死亡。部分病例为人粒细胞无形体病，但大多数病例不能检测到人粒细胞无形体的核酸和特异性抗体。

慢性HBV感染者病毒DNA水平与患者肝组织炎症损伤程度的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者疾病自然进程中病毒学标志物与宿主抗HBV免疫所致肝脏病理损伤的关系及动态变化。方法回顾性选取2016年1月到2022年6月于浙江省台州医院接受肝穿刺活检的238例成人慢性HBV感染者。收集患者的年龄、性别、血小板、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白、HBV DNA、qHBsAg、HBeAg等一般临床资料,以及患者的肝组织炎症活动度和纤维化分级等肝脏病理诊断指标。按HBeAg状态对患者进行分组,并分别按不同肝脏炎症活动度、不同HBV DNA载量对患者行亚组分组,统计学分析比较各组的HBV病毒学标志物水平的组间差异,及其与患者肝脏炎症损伤指标如ALT、AST及肝组织炎症活动度间的相关性。结果HBeAg阳性患者中有中度及以上肝脏炎症活动度(G≥2)患者的病毒学标志物水平均显著低于轻(无)炎症活动度(G<2)者(HBV DNA:t=3.102,P=0.002;qHBsAg:Z=-4.859,P<0.001;HBeAg:Z=-4.386,P<0.001);而在HBeAg阴性患者中则呈现相反的趋势,G≥2亚组的HBV DNA水平、qHBsAg显著高于G<2亚组(HBV DNA:t=-5.269,P<0.001;qHBsAg:Z=-2.951,P=0.003)。对应地,HBV DNA水平、qHBsAg在HBeAg阳性患者中与肝脏炎症活动度及肝脏炎症损伤指标AST呈弱到中等强度的负相关(HBV DNA与炎症活动度:r=-0.300,P=0.001;qHBsAg与炎症活动度:r=-0.432,P<0.001;qHBsAg与AST:r=-0.233,P=0.008);而在HBeAg阴性患者中则与肝脏炎症活动度及ALT、AST呈弱到中等强度的正相关(HBV DNA与炎症活动度:r=0.439,P<0.001;HBV DNA与ALT:r=0.502,P<0.001;HBV DNA与AST:r=0.582,P<0.001),其中qHBsAg仅与患者的肝脏炎症活动度呈弱的正相关(r=0.285,P=0.003)。进一步对HBeAg阳性患者按HBV DNA是否>2×106 IU/ml进行亚组分析发现,HBV DNA>2×106 IU/ml亚组的患者其HBV病毒学标志物与肝脏炎症活动度及ALT、AST间呈弱到中等强度的负相关(HBV DNA与炎症活动度:r=-0.276,P=0.009;HBV DNA与AST:r=-0.262,P=0.014;qHBsAg与炎症活动度:r=-0.448,P<0.001;qHBsAg与ALT:r=-0.223,P=0.037;qHBsAg与AST:r=-0.455,P<0.001;HBeAg与炎症活动度:r=-0.433,P<0.001;HBeAg与ALT:r=-0.257,P=0.016;HBeAg与AST:r=-0.369,P<0.001);但上述"负相关"在HBeAg仍为阳性且HBV DNA≤2×106 IU/ml的患者中消失。不仅如此,HBV DNA与ALT、HBeAg与AST更分别呈中等强度的正相关(HBV DNA与ALT:r=0.305,P=0.0497;HBeAg与AST:r=0.321,P=0.038)。结论在慢性HBV感染的疾病进程中,在HBeAg阳性且HBV DNA>2×106 IU/ml时,患者的抗HBV免疫应答可通过清除感染肝细胞来有效地抑制HBV的复制,而当HBV DNA载量低于该界值时,患者的抗HBV免疫性应答更多地造成了肝组织炎症损伤。

HepG2-hNTCP细胞模型的构建及在miRNA-548ah调控乙型肝炎病毒研究中的应用

目的构建并鉴定表达人钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(hNTCP)的HepG2-hNTCP细胞模型,探讨微小RNA-548ah(miR-548ah)对乙型肝炎病毒复制和表达的影响。方法扩增重组慢病毒pWPI-hNTCP-Puro质粒,pWPI-hNTCP-Puro慢病毒感染HepG2细胞,聚合酶链反应(PCR)检测hNTCPmRNA的表达水平,共聚焦显微镜检测hNTCP蛋白定位。Lipofectamine转染miR-548ah激动剂、miR-548ah抑制剂及阴性对照至细胞系。酶联免疫吸附测定检测HBsAg和HBeAg的表达水平,荧光定量PCR检测HBVDNA的表达,应用SPSS 17.0对数据进行分析。结果hNTCP mRNA在HepG2hNTCP呈高水平表达。共聚焦荧光显微镜观察HepG2hNTCP中的hNTCP蛋白正常表达且主要定位在细胞膜上。与HepG2细胞比较,HBsAg和HBeAg在感染后HepG2-hNTCP细胞5天和7天后的表达水平存在差异,随培养天数呈上升趋势,具有统计学意义(P<0.01)。与转染阴性对照比较,HBsAg在转染miR-548ah激动剂组的表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而HBeAg和HBVDNA的表达水平无明显变化,差异均无统计学意义。结论成功构建了表达hNTCP的HepG2-hNTCP细胞模型,对乙型肝炎病毒感染具有良好的易感性;miR-548ah可促进HBV感染HepG2-hNTCP细胞模型中HBsAg的表达。