基于指纹图谱和化学模式识别评价达原饮质量

目的建立达原饮的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,结合化学模式识别评价其质量。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,检测波长为190~400 nm,图谱提取波长为240 nm,进样量为2μL。建立18批达原饮样品的UPLC指纹图谱,应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,并对共有峰进行归属与指认。采用层次聚类分析(HCA)法、主成分分析(PCA)法及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法对指纹图谱进行评价。结果18批达原饮样品的指纹图谱相似度较好(0.988~0.999),标定了30个共有峰,指认了8个色谱峰,即峰7(芒果苷)、峰9(芍药苷)、峰11(甘草苷)、峰17(黄芩苷)、峰24(黄芩素)、峰27(甘草酸铵)、峰29(和厚朴酚)、峰30(厚朴酚)。经HCA和PCA可将18批达原饮样品分为3类;通过变量投影重要性(VIP)值筛选出4个差异性成分,即峰17、峰22、峰23(归属于黄芩)和峰3(归属于知母)。结论所建立的达原饮UPLC指纹图谱及其化学模式识别评价方法稳定可行,可用于达原饮的质量控制与评价,方中黄芩和知母饮片的质量优劣对达原饮指纹图谱影响较大。

砂仁乙酸龙脑酯含量稳定性研究

目的研究砂仁乙酸龙脑脂含量的稳定性。方法采用气相色谱法,色谱柱DB-1毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);柱温100℃,进样口温度230℃,检测器(FID)温度250℃,分流比10:1;选用万能粉碎机、高速粉碎机和冷冻混合球磨仪粉碎、粉碎后0～48 h测定砂仁乙酸龙脑脂含量。结果万能粉碎机、高速粉碎机和冷冻混合球磨仪粉碎后,测定含量分别为1.42%,0.91%和1.42%,随着粉末放置时间越长,砂仁乙酸龙脑酯含量越小。结论选用产热小的粉碎机粉碎后及时检测,含量稳定。

基于调控ABCA1表达探讨升麻苷抗动脉粥样硬化的作用机制

目的研究升麻苷对人单核细胞THP-1源性巨噬泡沫细胞炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,调控腺嘌呤核苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)表达,探讨其抗动脉粥样硬化的机制。方法使用适当浓度升麻苷(16、64μg/mL)作用于诱导成功的THP-1源性巨噬泡沫细胞,ELISA法测定细胞上清培养液IL-6、TNF-α表达,Western blot测定IL-6、TNF-α以及ABCA1的蛋白表达量,闪烁计数法测定细胞内胆固醇流出率。结果与对照组比较,升麻苷干预浓度128、256μg/mL对泡沫细胞呈现损伤[(90.29±5.46)%、(66.02±4.11)%比(100.22±3.13)%,P<0.05或P<0.01];与对照组比较,模型组泡沫细胞上清液IL-6、TNF-α含量明显增加[(58.93±8.34)pg/mL比(27.86±7.53)pg/mL,P<0.01;(208.76±9.07)pg/mL比(89.35±8.15)pg/mL,P<0.01],细胞IL-6、TNF-α蛋白表达明显增加[(0.89±0.09)比(0.32±0.05),P<0.01;(1.78±0.21)比(1.13±0.12),P<0.01],ACBA1蛋白表达降低[(1.11±0.12)比(1.74±0.13),P<0.01],胆固醇流出率增加[(15.32±0.72)%比(9.13±1.06)%,P<0.01]。与ox-LDL模型组比较,16、64μg/mL升麻苷能明显减少上清液IL-6、TNF-α含量[(47.71±9.38)pg/mL、(41.24±7.69)pg/mL比(58.93±8.34)pg/mL,P<0.05或P<0.01;(188.74±7.09)pg/mL、(107.95±8.23)pg/mL比(208.76±9.07)pg/mL,P<0.05或P<0.01],减少IL-6、TNF-α蛋白表达[(0.76±0.08)、(0.60±0.07)比(0.89±0.09),P<0.05或P<0.01;(1.61±0.14)、(1.29±0.18)比(1.78±0.21),P<0.05或P<0.01],增加ACBA1蛋白表达[(1.25±0.16)、(1.60±0.14)比(1.11±0.12),P<0.05或P<0.01],增加胆固醇流出率[(17.26±0.85)%、(20.23±1.98)%比(15.32±0.72)%,P<0.05或P<0.01]。结论升麻苷可能通过抑制THP-1源性巨噬泡沫细胞炎症因子IL-6、TNF-α表达,提升ABCA1表达,促进胆固醇外排,从而发挥抗炎及抑制动脉粥样硬化作用。

复方对乙酰氨基酚片溶出度方法研究及溶出行为评价

目的建立复方对乙酰氨基酚片的溶出度方法,并对不同样品进行溶出曲线评价。方法采用HPLC,使用Sepax Amethyst C18-H(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液(取0.01 mol·L-1磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH值至2.6±0.1)-甲醇(70︰30)为流动相;流速:1.0 m L·min-1;柱温:35℃;检测波长:波长切换,0~12.5 min,波长为275 nm,12.5~16 min,波长为303 nm;溶出度试验采用桨法,以900 m L盐酸溶液(稀盐酸24 m L,加水至1 000 m L)为溶出介质,转速为50 r·min-1。结果阿司匹林和水杨酸分别在12.54~501.60μg·m L-1(r=1.000 0)和0.99~39.76μg·m L-1(r=0.999 9)线性关系良好;低、中、高3种浓度的平均回收率分别为98.9%,96.7%,97.7%,RSD分别为0.46%,0.65%,0.31%;溶出度方法较好地反映了不同厂家复方对乙酰氨基酚片溶出行为的差异。结论建立的HPLC溶出度测定方法简单方便,具有较好的专属性、精密度和准确度,溶出方法能较好地体现不同厂家样品间的差异。