丹参素经PI3K/Akt信号通路改善血管性痴呆模型小鼠认知功能的机制研究

目的基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探讨丹参素对血管性痴呆小鼠认知功能的改善情况。方法将60只SPF级昆明种小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、阳性对照组、丹参素低、中、高剂量组,每组10只。模型组、阳性对照组、丹参素低、中、高剂量组小鼠参照文献的方法构建血管性痴呆模型。建模成功后,从第1天开始丹参素各剂量组按10、20、30mg/kg鼠重腹腔注射丹参素混悬液,阳性对照组按2mg/kg鼠体腹腔注射尼莫地平注射液,正常对照组和模型组腹腔注射等体积生理盐水,每天1次,持续28天。给药结束后对小鼠进行水迷宫实验,检测小鼠血清脑损伤相关因子星形胶质源性蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠脑组织结构,ELISA法检测小鼠脑组织PI3K、Akt蛋白水平。结果正常对照组小鼠脑组织结构正常,细胞排列整齐,无明显空泡结构;模型组可见明显的脑白质受损,细胞排列紊乱,视野中大量空泡结构;给予丹参素干预后,随着丹参素给药剂量的增加,小鼠脑组织细胞排列逐渐变整齐,空泡结构逐渐减少。与正常对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长[(46.36±3.12)s比(15.25±1.23)s,P<0.05];血清S-100β、NSE水平升高[S-100β:(1.54±0.11)ng/L比(0.65±0.03)ng/L、NSE:(4.36±0.12)ng/L比(2.13±0.15)ng/L,P均<0.05],脑组织PI3K、Akt蛋白表达水平显著降低[PI3K:(0.17±0.03)比(1.13±0.12)、Akt:(0.47±0.03)比(1.81±0.13),P均<0.05];与模型组比较,丹参素低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠逃避潜伏期显著缩短[(40.78±3.54)s、(34.65±3.13)s、(26.31±2.01)s、(25.23±1.75)s比(46.36±3.12)s,P均<0.05],血清S-100β、NSE水平显著降低[S-100β:(1.31±0.12)ng/L、(1.01±0.08)ng/L、(0.70±0.05)ng/L、(0.71±0.03)ng/L比(1.54±0.11)ng/L、NSE:(3.78±0.18)ng/L、(2.95±0.13)ng/L、(2.31±0.17)ng/L、(2.23±0.15)ng/L比(4.36±0.12)ng/L,P均<0.05],脑组织PI3K、Akt蛋白表达水平显著升高[PI3K:(0.33±0.06)、(0.52±0.07)、(0.74±0.09)、(0.77±0.09)比(0.17±0.03),Akt:(0.72±0.07)、(1.04±0.09)、(1.40±0.11)、(1.42±0.10)比(0.47±0.03),P<0.05];随着丹参素给药剂量的增加,小鼠逃避潜伏期缩短,血清S-100β、NSE水平逐渐降低,脑组织PI3K、Akt蛋白表达水平逐渐升高,具有量-效关系(P均<0.05);丹参素高剂量组上述指标与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参素可能通过调节PI3K/Akt信号通路及相关细胞因子,改善血管性痴呆模型小鼠认知功能障碍。