微小RNA-26b在乳腺癌中的作用及其分子机制研究

目的研究微小RNA-26b(miR-26b)在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达以及对乳腺癌MBA-MD-231细胞增殖的影响,并分析其可能的机制。方法选取上海市同济大学附属第十人民医院甲乳外科2010年1月—2012年5月行手术治疗的38例女性乳腺癌患者的乳腺癌组织,并取距离肿瘤组织>5 cm正常乳腺组织。运用荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测乳腺癌组织和正常乳腺组织中miR-26b的表达量。运用MTT法分析miR-26b对乳腺癌MBA-MD-231细胞增殖的影响,采用50、100 nmol/L miR-26b mimics转染为50 nmol/L组和100nmol/L组,脂质体处理为空对照组,小分子RNA片段转染为负对照组,转染后24、48、72、96 h分别测定细胞相对增殖情况。通过TargetScan软件寻找miR-26b可能靶基因〔前列腺素内过氧化物酶2(PTGS-2)〕,并应用荧光素酶报告实验和Western blotting技术进行验证。结果乳腺癌组织中miR-26bΔCt为(15.25±0.98),正常乳腺组织中为(12.37±1.23),正常乳腺组织中miR-26b表达水平为乳腺癌组织的7.33倍,乳腺癌组织中miR-26b表达低于正常乳腺组织(t=12.21,P=0.007)。MTT实验结果显示,50 nmol/L组、100 nmol/L组、空对照组和负对照组转染后72、96 h相对细胞增殖比较,差异均有统计学意义(F值分别为11.037和5.470,P值分别为0.003和0.024);其中转染后96 h 50 nmol/L组较空对照组降低(q=-3.048,P=0.038);转染后72 h和96 h 100 nmol/L组较空对照组降低(q值分别为-3.248和-4.254,P值分别为0.031和0.013)。荧光素酶报告实验结果显示,PTGS-2组、突变体对照组及空载体对照组荧光素酶活性比较,差异有统计学意义(F=99.88,P=0.000);其中PTGS-2组较突变体对照组和空载体对照组降低(q值分别为-10.314和-12.108,P值分别为0.000和0.000)。Western blotting结果显示,与空对照组和负对照组相比,实验组PTGS-2 mRNA和蛋白的表达量明显减少。结论 miR-26b在乳腺癌组织中呈低表达,其可能通过作用于下游基因PTGS-2抑制乳腺癌细胞的增殖,miR-26b在肿瘤发生发展中可能担任着抑癌基因的角色。

具有神经内分泌特征胃癌的诊治及预后分析

目的探讨具有神经内分泌特征胃癌的临床病理特点、治疗及预后。方法回顾性分析北京大学临床肿瘤学院1997年1月至2008年12月收治的19例具有神经内分泌特征胃癌病例的临床资料。结果本组19例患者中胃神经内分泌癌14例，其中9例位于胃底贲门，5例位于胃体；另5例胃癌伴神经内分泌分化者中2例位于胃底贲门，2例位于胃窦，1例位于全胃。根据2000年WHO肿瘤国际组织新分类标准．本组19例患者可分为Ⅰ型胃类癌2例（10．5％），Ⅱ型散发性胃类癌9例（47．4％），胃小细胞癌3例（15．8％），胃癌伴神经内分泌分化5例（26．3％）。临床无特异性表现，诊断主要依靠病理及免疫组织化学检查。18例患者接受手术治疗，手术采用根治性胃大部切除术或全胃切除术．3例伴肝转移者行同时性肝转移灶切除：另1例胃体小细胞癌伴肝转移无耘．手术切除者予以单纯化疗。本组患者1年及3年生存率分别为73．7％和38．6％。结论胃神经内分泌癌好发于贲门、胃底部及胃体，胃癌伴神经内分泌分化可发生于胃的各个部位。免疫组织化学染色对该病的诊断具有重要价值。本病总体预后不佳．治疗应尽可能行根治性切除术。