改良的甲基化特异PCR法在人宫颈癌Hela细胞检测中的应用

目的介绍一种CpG岛甲基化分析方法,即甲基化特异PCR法(methylation-specific PCR,MSP)以及对该方法的改良。方法用亚硫酸氢盐修饰被测DNA后,进行甲基化与非甲基化特异PCR的扩增,并对MSP法进行改良。应用该法分析人宫颈癌Hela细胞中RASSF1A、p16基因5'CpG岛甲基化状态。结果发现人宫颈癌Hela细胞中有RASSF1A、p16基因的甲基化,改良后的MSP更容易获得较好的效果。结论MSP法是一种较为简便、灵敏和具特异性的甲基化检测方法,改良后该方法更加简便可行。

427例足癣的菌型分布及患者相关知识的调查分析

目的了解杭州地区足癣的菌型分布情况及患者对足癣知识的认识程度。方法采用镜检,真菌培养方法对427例足癣患者进行了病原菌的流行病学调查,同时采用问卷调查方式,了解患者对足癣有关知识的认知情况。结果427例真菌镜检阳性的足癣患者中真菌鉴定结果红色毛癣菌302例,占70.73%,其次是须癣毛癣菌67例,占15.69%,另有32例絮状表皮癣菌和17例白色念珠菌感染,9例培养未见真菌生长。足癣是传染性皮肤病;足癣是真菌感染;足癣不是脚气病;足癣可引起化脓感染;传染足癣的主要途径是共用拖鞋、脚盆、擦脚布;足部出汗过多是病因之一;足癣治疗要坚持用药的正确回答率分别为64.87%,42.86%,68.62%,27.40%,62.06%,42.39%及33.26%。结论足癣主要由红色毛癣菌和须癣毛癣菌感染所致。约半数的足癣患者对足癣相关知识了解不全面,临床工作中应加强对患者有关足癣知识的宣传及普及。

幽门螺杆菌感染与慢性荨麻疹的关系探讨

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与慢性荨麻疹之间的关系,并分析根除幽门螺杆菌对荨麻疹诊疗的影响。方法选择杭州市第三人民医院门诊治疗的慢性荨麻疹患者180例作为观察组,并随机选择本院同期接受自愿检测Hp的健康人群180例作为对照组,两组均采取^(14)C尿素呼气试验方法检测Hp,分析慢性荨麻疹组和健康对照组两组Hp的阳性情况;同时将70例慢性荨麻疹Hp阳性患者分为对照组35例和试验组35例,对照组患者应用常规荨麻疹治疗,试验组患者在对照组治疗基础上增加四联疗法根除Hp,并进行两组疗效对比分析。结果在幽门螺杆菌阳性检出率方面,慢性荨麻疹组Hp阳性患者(38.9%)显著高于健康对照组(10.6%);在慢性荨麻疹Hp检测阳性患者试验组临床疗效有效率(97.1%)显著高于对照组(77.1%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性荨麻疹与Hp感染之间存在一定的相关性,Hp的检测及根除对慢性荨麻疹患者的预后具有重要的临床意义。

心理社会因素与系统性红斑狼疮患者心身症状的关系

目的 研究心理社会因素对系统性红斑狼疮 (SL E)患者心身症状的影响 ,为临床上对 SL E患者进行心理社会干预提供理论依据。方法 使用 90项症状自评问卷 (SCL- 90 )、艾森克人格问卷 (EPQ)、医学应对方式问卷 (MCMQ)、领悟社会支持量表 (PSSS)对 6 6例 SL E患者作调查研究 ,并作相关性分析和多元回归分析。结果 (1)较多采用面对或屈服应对方式的 SL E患者其心身症状较重 ;(2 )获得较多社会支持的 SL E患者其心身症状较轻 ;(3) EPQ中的 N分较高或 E分、L 分较低的 SL E患者伴有较为严重的心身症状 ;(4 ) SL E患者的文化程度越高 ,其心身症状越轻 ;(5 ) EPQ中的 E分、社会支持和面对应对方式对 SL E患者的心身症状有更重要的影响。结论 临床上在对 SL E患者实施药物治疗的同时 ,应重视运用心理社会干预 。

免疫印迹法和对流免疫电泳法检测ENA抗体的评价和意义

目的 : 评价两种检测可提取性核抗原 (ENA)多肽抗体方法在临床诊断中的价值。方法 : 同时应用免疫印迹法 (IBT)和对流免疫电泳法 (CIE)检测 2 18例结缔组织病 (CTD)患者和 15 0例非结缔组织病对照血清ENA多肽抗体 ,比较两者的检测结果。结果 : CTD中用IBT法测得抗ENA抗体阳性 14 8例占 6 7.9% ,用CIE法阳性 133例占 6 1.0 % ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。IBT阳性而CIE阴性为 18例 ,IBT阴性而CIE阳性者 4例。IBT可以同时检测 7种ENA抗体 ,而CIE只能检测 4种ENA抗体 ,但由于两种方法抗原制作过程中某些技术性因素会出现假阴性和假阳性。结论 : IBT是一种敏感性和特异性高而广谱的ENA血清学诊断方法 ,但同时应用CIE法可以相互补充和验证 ,从而提高抗ENA抗体检测的阳性率。

外用米诺地尔治疗女性雄激素性脱发的系统评价

为评价米诺地尔治疗女性雄激素性脱发的安全性和有效性,检索中国生物医学文摘数据库、网络数据库PubMed、Ovid、Web of Science、UMI、elsevier以及Cochrane图书馆的临床对照试验资料库,搜集相关的随机对照试验,对其逐个进行质量评价,并进行Meta-分析。结果:纳入4个高质量的研究,共治疗606例患者。对治疗有效率的Meta-分析结果显示:米诺地尔与安慰剂比较(患者评价),OR合并=1.98[95%CI(1.43～2.74),P<0.0001];米诺地尔与安慰剂比较(调查员评价),OR合并=2.31[95%CI(1.65～3.24),P<0.00001]。脱发评估区域1cm2非毳毛计数的Meta-分析表明:米诺地尔与安慰剂比较(第32周),WMD合并=18.00[95%CI(5.10～30.90),P=0.006];米诺地尔与安慰剂比较(32周和0周的均数变化),WMD合并=14.88[95%CI(7.46～22.31),P<0.0001]。所有的研究均未发现严重的副作用。结论:外用2%米诺地尔治疗女性雄激素性脱发是安全、有效的。

单纯疱疹病毒2型ICP4基因荧光实时定量PCR检测方法的建立

目的建立实时荧光PCR定量检测单纯疱疹病毒2型(HSV2)ICP4基因的方法。方法依据HSV2ICP4基因序列设计引物,PCR纯化后克隆到pMD-18T载体上进行测序,抽提重组质粒作为标准品。根据测序结果设计荧光定量PCR的引物和探针,质粒标准品10倍稀释后进行扩增,建立标准曲线,并进行灵敏度和可靠性分析。结果测序结果显示在扩增的PCR片段中有在A-G无和T-C的无义突变。标准品101以下没有检测信号,101具有明确的检测信号,因而检测的灵敏度为10。可靠性测定结果:107～101进行10次重复Ct值的平均值分别为14.275±0.137、17.988±0.162、22.081±0.259、25.957±0.345、29.565±0.203、33.269±0.287、37.737±0.698,变异系数分别为0.965%、0.902%、1.174%、1.329%、0.686%、0.862%、1.851%。Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。回归系数为0.998。结论成功建立了HSV2ICP4基因实时定量荧光PCR检测的方法,灵敏度高,重复性好,可用于HSV2ICP4基因的定量分析。

发疹性汗管瘤6例

发疹性汗管瘤６例施鉴勇①沈宏①汗管瘤较为常见，临床上可分３型：眼睑型、发疹性汗管瘤、限局型［１］；发疹性汗管瘤（ＥＳ）较为少见，现将作者１９９１年７月以来收集完整资料的６例报告如下。临床资料：６例患者，男１例，女５例；年龄１９～４１岁，发病年龄１７～...

红皮病合并败血症的临床分析和护理

红皮病有较高死亡率，国外报道约10％～20％，国内报道死亡率11．4％，而败血症是红皮病死亡的常见原因。我们临床发现红皮病并发败血症并不少见，现报道如下。

11种常用消毒剂灭真菌效果观察

目的 :对 11种常用消毒剂灭真菌效果进行评价。方法 :将各种消毒剂配成 3种浓度 ,与 3种真菌作用 5个时间段 ,依次划种于沙堡氏培养基 ,培养 7d后观察有无真菌生长。结果 :5 %甲酚皂、0 5 %新洁尔灭、95 %乙醇、10 %甲醛、1∶2 5石炭酸、1%过氧乙酸、0 1%洗必泰、0 2 %三氯异氰尿酸钠、1%高锰酸钾 9种消毒剂 10min能有效杀灭真菌 ,戊二醛、聚维酮碘灭真菌效果不佳。结论 :11种常用消毒剂中大部分对真菌有不同程度的杀灭作用 ,但有效浓度明显高于常规使用浓度。

黑素生成素对黑素瘤mel586细胞白癜风相关基因-1和酪氨酸酶表达的影响

采用MTT法测定黑素生成素对细胞增殖率的影响;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;半定量RT-PCR检测黑素生成素对黑素细胞白癜风相关基因-1(VIT-1),酪氨酸酶(TYR)和酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP1)基因表达的影响。结果:黑素生成素能促进黑素瘤细胞mel586的增殖,并与浓度呈正相关性,对TYR和TRP-1mRNA表达无明显促进作用;黑素生成素在浓度为6μg/mL和12μg/mL时对黑素瘤细胞mel586酪氨酸酶活性有促进作用(P<0.05)。黑素生成素治疗白癜风有效的机制可能与提高VIT-1的表达量和促进细胞增殖有关。