高三尖杉酯碱联合三氧化二砷诱导人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株凋亡的实验研究

目的通过体外实验阐述高三尖杉酯碱(HHT)单药及联合亚砷酸(ATO)用药对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226作用及其机制。方法应用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,检测HHT、ATO单药及两者联合用药对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖的影响,Hoechst染色法检测细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞早期凋亡比率。Western blot检测药物处理后凋亡关键蛋白(Caspase-3、9及PARP)、Bcl-2家族蛋白(Bcl-2、Mcl-1、Bcl-xl)及AKT蛋白的表达。结果 HHT、ATO单药可显著抑制RPMI8226细胞的增殖,其作用呈时间及浓度依赖(P<0.05),且两药联合具有协同作用(CI<1)。HHT、ATO单药可诱导RP-MI8226细胞凋亡且呈浓度依赖,出现细胞凋亡形态学改变及早期凋亡比率增高,两药联合可加强诱导凋亡作用。HHT可呈浓度依赖性激活Caspase-3、PARP表达;HHT(40ng/mL)与ATO(8.5μmol/L)联合用药可显著激活Caspase-3、9,下调抗凋亡蛋白Mcl-1及Bcl-xl的表达,呈时间依赖性降低AKT磷酸化水平。结论 HHT、ATO单药或联合用药可诱导RPMI8226细胞凋亡,其机制可能和激活Caspase通路、调节Bcl-2家族蛋白表达、抑制AKT磷酸化等有关。