水产品药物残留快速检测质量控制技术探讨

水产品药物残留快速检测质量控制技术是确保检测数据准确性的重要基础,是水产品质量安全监管工作的重要组成部分,包含保证检测数据科学准确的全部活动措施。本文从检测人员、设备环境、方法标准、快检产品、质控样品等环节对结果判定的影响进行阐述,旨在探讨在水产品药物残留快速检测工作中,如何规范工作流程,严格质控措施,确保检测结果的科学准确并被有效采用,以期推动水产品检测行业的健康发展。

不同修饰基团的副溶血性弧菌适配体在磁性纳米颗粒表面的固定效果和反应活性研究

目的 研究副溶血性弧菌适配体的不同修饰基团对磁性纳米颗粒修饰效果和与副溶血性弧菌结合活性的影响。方法 采用一步合成法合成氨基修饰的磁性纳米颗粒,将其分别与氨基、生物素和羧基修饰的副溶血性弧菌适配体结合,通过紫外吸收间接分析适配体的固定率,并利用外加磁场分离目标物,平板涂布确定磁分离效果。结果 生物素修饰的副溶血性弧菌适配体与磁性纳米颗粒有更高的结合效率,为62.16%。在菌液浓度较低时,不同基团修饰的适配体与磁性纳米颗粒结合后对副溶血性弧菌的分离效果影响较小,但当菌液浓度为10^(5) CFU/mL时,不同基团修饰对副溶血性弧菌分离效果差距明显,氨基修饰的适配体显示了更为优异的反应活性,分离率为69.24%,分别较生物素和羧基修饰的适配体高21.04%和16.26%。结论 氨基修饰的副溶血性弧菌适配体在磁性纳米颗粒表面固定后显示了更为优越的反应活性,为副溶血性弧菌分离和检测的相关应用研究提供参考。

一例中华鳖腮腺炎的诊断与防治

2021年5月,浙江诸暨某中华鳖养殖场中华鳖脖子肿胀、伸长,底板出现多处血点,并伴随大量死亡,经解剖可见腮部糜烂、充血明显,内脏呈现不同程度病变。从病鳖腮、肝、脾、肾、肠等组织分离纯化病原菌,经形态观察、生化鉴定确定其种属,并采用微量肉汤连续稀释法确定8种国标渔药对其最低抑菌浓度;同时,利用PCR方法检验是否存在病毒感染。结果显示:自有典型临床症状的中华鳖组织中分离到嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明,该菌对恩诺沙星、硫酸新霉素和盐酸多西环素3种抗菌药物敏感。同时,在患病中华鳖内脏中检测到一种病毒,通过测序与构建系统进化树发现该病毒与中华鳖出血性综合征病毒同源性最高且聚为一支。病原回归感染试验结果表明,分离的嗜水气单胞菌与病毒均可引起中华鳖不同程度死亡。该例中华鳖腮腺炎为嗜水气单胞菌与出血性综合征病毒混合感染所致。该研究可为中华鳖腮腺炎的科学诊断与防控提供理论依据。

饲料中添加蝇蛆蛋白对中华鳖肝和血清免疫代谢应答的影响

为评估蝇蛆蛋白对提高中华鳖免疫代谢的作用效果,设置2个中华鳖饲料组,分别含有质量分数5%和10%蝇蛆蛋白,以投喂常规饲料为对照。投喂3个月后,统计鳖存活率并测量体增重,测定血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)等指标,并利用转录组测序技术比较不同组中华鳖的基因表达谱。结果表明,添加蝇蛆蛋白组中华鳖较常规饲料组的养殖存活率和平均体增重率均有所升高,血清指标中除了GPX活性降低,其他5种酶活性均升高。转录组测序比较显示,添加蝇蛆蛋白组与常规饲料组间、不同添加量组间均存在显著差异表达基因。KEGG通路富集分析提示,蝇蛆蛋白添加组和常规饲料组差异基因均主要富集于吞噬体、补体与凝血级联两种免疫通路;此外,10%添加组和5%添加组、10%添加组和常规饲料组的差异基因富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,维生素消化与吸收等免疫和代谢通路。综上表明,饲料中添加蝇蛆蛋白具有增强中华鳖免疫和代谢活性的作用,以添加10%效果最佳,其潜在作用机理与吞噬体,补体和凝血级联,细胞因子-细胞因子受体相互作用,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢和维生素消化与吸收等通路密切相关。研究结果可对蝇蛆蛋白作为中华鳖饲料添加剂的有效性评价提供参考。

Captiva EMR-Lipid小柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中五氯酚钠残留

本研究建立了一种基于Captiva EMR-Lipid小柱净化结合高效液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS)快速分析多种水产品基质中五氯酚钠残留的方法。样品经1%乙酸乙腈溶液(v/v)提取,Captiva EMR-Lipid小柱净化后采用LC-MS/MS方法进行检测。选择ZORBAX RRHD Eclipse Plus C_(18)色谱柱作为分析柱,甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,多反应监测负离子模式扫描,同位素内标法定量。结果表明,五氯酚钠在相关范围内线性关系良好,相关系数r不低于0.99,本研究方法在缢蛏(Sinonovacula constricta)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、大口黑鲈(Micropterus salmoides)、中华鳖(Trionyx Sinensis)、大黄鱼(Larimichthys crocea)和青蟹(Scylla)样品中的定量限均为0.5μg/kg,基质加标回收率范围为89.6%~103.0%,相对标准偏差为4.39%~12.20%。该方法操作简便,测定结果准确、可靠,适用于水产品中五氯酚钠残留的快速测定。

同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中五氯酚钠的不确定度评定

采用同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中的五氯酚钠含量,依据JJF 1059.1—2012《测定不确定度评定与表示》等不确定度评定的相关标准及规范,对测定结果的不确定度进行评定。分别对标准溶液配制、样品称量、标准曲线拟合、测量重复性等影响不确定度的分量进行分析。结果表明,不确定度的主要来源是标准溶液的配制、样品测定重复性和标准曲线拟合。当包含因子k=2时,同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中五氯酚钠的含量为24.4μg/kg,在95%的置信区间下,扩展不确定度为1.0μg/kg。该方法为科学评价实验结果的准确性提供依据,为评定其他相关检测方法的不确定度提供参考。

PRIME HLB固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中11种酰胺醇和抗病毒类药物残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定水产品中11种酰胺醇和抗病毒类药物残留的检测方法。选择鱼、虾、鳖和贝类作为分析对象,样品采用4%(w/w)NaCl溶液分散基质后,2%(V/V)氨水-乙酸乙酯溶液萃取,提取液浓缩后残留物用80%(V/V)乙腈(含0.2%(V/V)甲酸)复溶,过Oasis PRIME HLB小柱净化后再次浓缩并上机分析。选择ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,乙腈与5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,正、负源切换多反应监测模式采集质谱数据,同位素内标法定量。结果表明,11种待测药物在一定范围内线性良好,线性相关系数(r2)不低于0.996,方法的定量限为0.20~2.0μg/kg,加标回收率为84.6%~110%,相对标准偏差为1.0%~14%。方法适用于水产品中酰胺醇和抗病毒类药物的痕量分析,并成功用于水产品质量安全风险监测工作。