p38信号通路在小鼠骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞中的作用

目的探索p38信号转导通路在损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mBMMSCs)向肝细胞分化中的作用。方法将四氯化碳(CC l4)注射的小鼠肝脏进行培养,收集到的上清液即为损伤肝脏条件培养液;密度梯度离心法分离获得小鼠骨髓来源的骨髓间充质干细胞,采用反复贴壁筛选法纯化,培养并传代;将培养至第3～7代骨髓间充质干细胞分为3组:对照组、正常诱导组和抑制剂组,对照组用10%FBS的IMDM培养液培养,其余两组均加入损伤肝脏条件培养液,此外抑制剂组再加入p38信号转导通路抑制剂SB203580至终浓度10.5μmol/L。结果①正常组在诱导处理21天后,相差显微镜下观察,细胞形态由梭形、纤维样分化为多边形或上皮样,胞核清晰,并出现双核或多核;而抑制剂组在诱导处理21天后,细胞形态改变的比例明显减少;②p38信号通路抑制剂SB203580作用于抑制剂组中骨髓间充质干细胞7天后,肝细胞分化特异性指标AFP在诱导第7天时、ALB以及分泌尿素量在诱导第14天和第21天时,与正常诱导组相比,明显减少(P<0.05,n=5)。结论丝裂原激活蛋白酶p38的活化可能在损伤肝脏条件培养液诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞过程中起重要作用。