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题名脂肪间质干细胞抑制肝星状细胞增殖活化及肝脏纤维化
被引量:4
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作者
俞富祥
苏龙丰
季世强
张启瑜
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机构
浙江省温州医学院附属第一医院肝胆胰外科
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出处
《中华普通外科杂志》
CSCD
北大核心
2011年第12期1027-1030,共4页
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文摘
目的 探讨脂肪间质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)对活化态肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)增殖、活化的影响及其对活体肝硬化模型的治疗作用.方法 分别分离纯化培养HSCs及ADSCs,通过半透膜(transwell insert)建立HSCs与ADSCs的双层培养体系,大鼠正常肝细胞系((buffalo rat liver cells,BRLs)培养作为对照.通过CCK-8比色法检测ADSCs对HSCs增殖的影响;Western blot检测HSCs的α-肌动蛋白(α-SMA)表达;建立鼠肝硬化模型,经门静脉输注ADSCs或BRLs,检测肝组织肝硬化;通过检测培养液中细胞因子的含量探讨可能的作用机制.结果 成功分离获得原代HSCs与ADSCs,活化的HSCs与ADSCs共培养72 h,与对照组相比,ADSCs明显抑制HSCs的活化(各组灰度值分别为1.4±0.2,152±14,258±18,F=283.348,P<0.05)与增殖(各组吸光度A值分别为2.172±0.107,1.424±0.013,1.209±0.117,F=90.605,P <0.05),活体移植显示ADSCs对肝硬化具有明显抑制作用(分别F=77.234、65.164、58.309,均P <0.05).培养液细胞因子检测显示ADSCs比BRLs分泌更多的肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)(F=0.005,P<0.05),分泌较少的转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β1)(F=1.767,P<0.01)及神经生长因子(nerve growth factor,NGF)(F=2.301,P<0.05). 结论 ADSCs具有分泌细胞因子抑制HSCs活化增殖的潜能,对活体肝硬化进程具有一定的抑制作用.
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关键词
肝硬化
实验性
间质干细胞
增殖
肝星状细胞
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Keywords
Liver cirrhosis, experimental
Mesenchymal stem cells
Cell proliferation
Hepatic stellate cells
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分类号
R575.2
[医药卫生—消化系统]
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题名脂肪特异性蛋白27基因抑制大鼠肝星状细胞增殖活化
被引量:2
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作者
俞富祥
宋才鑫
吴志伟
朱千东
张启瑜
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机构
浙江省温州医学院附属第一医院肝胆胰外科
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出处
《中华肝胆外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期701-705,共5页
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基金
温州市科技计划项目(Y20120191)、浙江省重中之重外科学组资助(浙教高科2008-255)
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文摘
目的探讨脂肪特异性蛋白27(Fsp27)基因对活化态肝星状细胞(HSCs)增殖、活化的影响及其对纤维化相关基因的调节作用。方法提取HSCs并培养。用实时定量PCR技术检测原代HSCs及活化HSCs中的Fsp27基因表达。构建携带Fsp27目的基因的慢病毒,转染活化的HSCs并继续培养72h。通过CCK-8比色法检测Fsp27基因对HSCs增殖的影响。Western blot检测HSCs α-肌动蛋白(α—SMA)的表达,了解HSCs的活化状态。实时定量PCR技术研究Fsp27基因对HSCs纤维化相关基因表达的影响。结果成功分离原代HSCs,Fsp27基因在原代HSCs及活化HSCs中表达差异显著(P〈0.01)。活化HSCs成功转染携带Fsp27目的基因的慢病毒后继续培养72h,与对照组比较,HSCs的活化与增殖受到明显抑制(P〈0.05);Fsp27基因促进MMP-2的表达(P〈0.05),降低了TIMP-1及TGF-β1的表达(P〈0.05)。结论Fsp27基因具有抑制HSCs活化增殖的潜能,Fsp27基因可调节纤维化相关基因的表达。Fsp27基因的作用可能与维持HSCs静息状态细胞表型有关。
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关键词
脂肪特异性蛋白27
基因
肝星状细胞
增殖
活化
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Keywords
Fat-specific protein 27
Genes
Hepatic stellate cells
Proliferation
Activation
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分类号
R575.2
[医药卫生—消化系统]
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