活性氧响应靶向纳米粒对细胞氧化应激和细胞炎症因子的影响

目的探讨活性氧(ROS)响应靶向纳米粒(OXb CD NP)对细胞氧化应激和细胞炎症因子的影响。方法采用化学键合方式自制ROS响应靶向纳米粒。(1)选用RAW264.7细胞,随机分为四组,空白1组(无任何处理),对照1组(PMA刺激),10μg/m L OXbCD NP1组(10μg/m L OXbCD NP孵育后再加入PMA刺激),100μg/mL OXbCD NP1组(100μg/mL OXbCD NP孵育后再加入PMA刺激)。用DCFH-DA探针染色,流式细胞术检测细胞内的ROS水平,并荧光成像;(2)选用RAW264.7细胞,随机分为四组,空白2组(无任何处理),对照2组(IFN-γ和LPS刺激),10μg/mL OXbCD NP 2组(10μg/mL OXbCD NP孵育后加入IFN-γ和LPS刺激),100μg/mL OXbCD NP 2组(100μg/mL OXbCD NP孵育后加入IFN-γ和LPS刺激),用ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;(3)将RAW264.7细胞用0μg/m L、5μg/m L、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL、1280μg/mL OXb CD NP培养液孵育12 h或24 h后,用MTT法检测细胞存活率。结果(1)相比于对照1组,10μg/m L和100μg/m L OXbCD NP 1组ROS水平下降,荧光强度下降,差异有统计学意义(P<0.01);(2)与对照2组比较,10μg/m L和100μg/m L OXbCD NP 2组IL-1β、TNF-α水平下降,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)纳米粒与细胞共孵育12 h,与OXbCD NP水平为0μg/mL(不含OXbCD NP)对比,OXbCD NP水平达到640μg/mL及1280μg/mL时,存活率差异有统计学意义(P<0.05);当孵育时间为24 h,与不含OXbCD NP对比,OXbCD NP水平为320μg/mL、640μg/mL及1280μg/mL时,存活率差异有统计学意义(P<0.05)。结论ROS响应靶向纳米粒在细胞水平具有良好的安全性,并且有抗细胞氧化应激和抗炎症因子反应的作用。