FOXO1调控PGC-1β/ERRα减轻LPS诱导的心肌细胞损伤

目的探讨叉头盒蛋白O1A(FOXO1)以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1β/雌激素相关受体α(PGC-1β/ERRα)通路在脓毒症诱导的心肌损伤中的作用机制。方法通过脂多糖(LPS)诱导H9C2细胞以模拟体外脓毒性心肌病模型。通过CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液的炎症因子评估细胞损伤情况。利用JC-1探针检查测线粒体膜电位以评估线粒体损伤情况。蛋白免疫印迹实验和荧光定量PCR检测FOXO1、PGC-1β和ERRα的表达情况。结果与control组比较,LPS诱导的H9C2细胞活力[(39.26±4.32)%比(100.00±6.10)%,P<0.05]和FOXO1[(0.26±0.11)比(1.00±0.10),P<0.05]、PGC-1β[(0.18±0.03)比(1.00±0.08),P<0.05]、ERRα[(0.28±0.07)比(1.00±0.09),P<0.05]蛋白水平显著降低,凋亡水平[(17.32±0.49)%比(4.60±0.51)%,P<0.05]和炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[(268.38±11.14)pg/mL比(82.34±6.60)pg/mL,P<0.05]、白细胞介素-6(IL-6)[(143.65±8.41)pg/mL比(41.15±4.05)pg/mL,P<0.05]的释放显著升高。与LPS+oe-NC组比较,过表达FOXO1能促进PGC-1β[(3.98±0.16)比(0.99±0.19),P<0.05]、ERRα[(3.94±0.17)比(1.02±0.13),P<0.05]的表达和提高细胞活力[(294.64±13.71)%比(98.20±10.54)%,P<0.05],并减弱LPS诱导的线粒体损伤,抑制凋亡水平[(10.41±0.90)%比(16.68±1.24)%,P<0.05]和TNF-α[(129.90±10.13)pg/mL比(269.43±14.52)pg/mL,P<0.05]、IL-6[(69.55±7.35)pg/mL比(142.81±8.20)pg/mL,P<0.05]的释放水平。与LPS+oe-FOXO1组比较,应用ERRαantagonist-1后,PGC-1β[(1.03±0.20)比(3.98±0.16),P<0.05]和ERRα[(0.98±0.16)比(3.94±0.17),P<0.05]的蛋白表达以及细胞活力[(185.98±12.03)%比(294.64±13.71)%,P<0.05]下降,凋亡水平[(14.35±0.50)%比(10.41±0.90)%,P<0.05]和TNF-α[(197.74±8.00)pg/mL比(129.90±10.13)pg/mL,P<0.05]、IL-6[(105.75±7.27)pg/mL比(69.55±7.35)pg/mL,P<0.05]的释放水平上升。联合应用鱼藤酮/抗霉素A发现,与LPS+oe-FOXO1组比较,细胞活力[(100.64±12.00)%比(282.01±23.97)%,P<0.05]下降,凋亡水平[(16.91±0.36)%比(9.39±1.74)%,P<0.05]和TNF-α[(259.93±12.17)pg/mL比(131.97±12.94)pg/mL,P<0.05]、IL-6[(144.46±16.02)pg/mL比(65.69±9.37)pg/mL,P<0.05]的释放水平上升。结论FOXO1可能通过调控PGC-1β/ERRα减轻线粒体损伤,从而减缓LPS诱导的心肌细胞凋亡和炎症反应。