RNA干扰MDR1基因对乳腺癌多细胞球阿霉素敏感性的影响

目的通过RNA干扰沉默MDR1基因,探讨后者在乳腺癌多细胞球阿霉素耐药中的作用。方法用liquid overlay技术培养获得多细胞球(multicellular spheroids,MCS),用脂质体转染法把特异针对MDR1基因的双链小RNA干扰片段导入MCF-7细胞中,采用台盼蓝拒染法检测阿霉素对MCF-7的细胞抑制率,MDR1 mRNA水平及蛋白水平分别用RT-PCR和免疫印迹法检测,用荧光光度计法检测阿霉素在细胞内的蓄积情况。结果多细胞球形成后,阿霉素对MCF-7细胞的抑制率明显减少,MDR1 mRNA及蛋白水平明显升高,阿霉素在细胞内的蓄积量减少;RNA干扰法能明显抑制MDR1基因表达,增加阿霉素在MCS细胞中的蓄积,提高阿霉素对MCS的细胞抑制率。结论多细胞球的形成可以增强MCF-7细胞的阿霉素耐药性,RNA干扰沉默MDR1基因可以部分逆转MCF-7多细胞球的阿霉素耐药。