基于决策树模型的内镜逆行胰胆管造影术后胆总管结石复发的研究

目的通过决策树模型,探讨内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)后胆总管结石复发的危险因素及风险。方法回顾性分析该院2016年1月-2020年12月因胆总管结石行ERCP取石术的500例患者的临床资料,分别建立决策树模型和Logistic回归模型,并绘制受试者操作特征曲线(ROC curve),用曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度对两种模型的预测效果进行评价,筛选影响ERCP后胆总管结石复发的独立危险因素,并使用模型预测患者复发风险。结果决策树分析结果显示,既往有胆道取石史(P=0.000)、胆总管直径>1.60 cm(P=0.000)和既往有胆囊切除史(P=0.004)为ERCP后胆总管结石复发的高危危险因素;多因素Logistic回归分析显示,既往有胆囊切除史(P=0.003)、既往有胆道取石史(P=0.000)、胆总管直径>1.60 cm(P=0.000)、结石数量≥2枚(P=0.001)和胆道支架(P=0.038)为影响ERCP后胆总管结石复发的独立危险因素,白蛋白≥40.5 g/L(P=0.026)为保护性因素。决策树模型与多因素Logistic回归模型相比,总体准确率为92.2%和93.3%,AUC为0.890(95%CI:0.839~0.940)和0.926(95%CI:0.887~0.964),敏感度为87.0%和85.3%,特异度为81.0%和89.2%。结论既往有胆道取石史、胆总管直径>1.60 cm和既往有胆囊切除史是影响结石复发的高危危险因素。决策树模型简单易行,可以较好地预测结石患者的复发风险,可用于筛选ERCP后胆总管结石复发的高危人群,并针对性预防。

MicroRNA-101调控人胃癌细胞系增殖、迁移、侵袭的实验研究

目的通过实验研究miRNA-101在胃癌中的表达水平,以及对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭力和皮下移植瘤的影响,以探讨将miRNA-101用于胃癌生物靶向治疗的可能性。方法分子克隆技术构建miRNA-101重组腺病毒表达载体,MTT法检测细胞增殖能力,Millipore Transwell小室法检测细胞迁移能力,Matirgel法检测细胞侵袭能力,q-PCR定量分析各基因表达水平,使用BALB/c免疫缺陷裸鼠建立胃癌皮下移植瘤模型。结果 miRNA-101在胃癌组织中的表达量为(0.661±0.396),低于所对应的癌旁组织(1.128±0.697),差异有统计学意义(t=10.091,P<0.01)。胃正常上皮细胞GES-1中的miRNA-101表达量高于胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-45和AGS。miRNA-101对MKN-45细胞的增殖能力呈现明显的抑制作用,对胃癌细胞BGC-823、SGC-7901、MKN-45、AGS的迁移和侵袭均有抑制作用。选取MKN-45细胞系建立裸鼠皮下移植瘤模型后5周,Ad-miRNA-101组肿瘤体积为(333.56±46.71)mm^3,小于Ad-EGFP组(806.41±51.83)mm^3,差异有统计学意义(t=21.431,P<0.01)。结论在胃组织中,miRNA-101是一个抑制性miRNA,miRNA-101表达水平下调参与胃癌的发生和发展。miRNA-101将有可能成为胃癌生物靶向治疗的新靶点。

Overlap吻合法在完全腹腔镜根治性右半结肠切除术中的应用

目的探讨完全腹腔镜根治性右半结肠切除术中采用Overlap吻合法行回结肠吻合的可行性。方法回顾性分析2020年6月至2022年12月于桐乡市第一人民医院胃肠外科接受完全腹腔镜根治性右半结肠切除+Overlap法行回结肠侧侧吻合术的32例右半结肠癌患者及接受腹腔镜辅助根治性右半结肠切除+体外吻合法行回结肠端侧吻合术的30例右半结肠癌患者的临床资料,分别记录患者的手术时间、回结肠吻合时间、术中出血量、淋巴结清扫数目、切口长度、术后24 h疼痛评分、术后肛门排气时间、术后并发症和住院天数等围手术期资料。结果全部患者成功实施腹腔镜根治性右半结肠切除术。两组患者的性别、年龄、BMI指数、肿瘤部位、cTNM分期等差异无统计学意义(P>0.05)。与体外吻合组相比,Overlap吻合组的平均回结肠吻合时间稍长,但差异无统计学意义(P>0.05);两组手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数目、术后住院天数相比差异均无统计学意义(均P>0.05);切口长度、术后24 h疼痛评分、术后肛门排气时间相比差异有统计学意义(均P<0.05)。Overlap吻合组1例患者术后出现淋巴漏,经禁食、营养等对症治疗后治愈;体外吻合组1例患者术后出现切口感染,经换药、引流后切口愈合。Overlap吻合组1例患者、体外吻合组2例患者出现术后肠梗阻,经禁食、胃肠减压、营养等对症支持治疗后治愈。两组各有1例患者术后出现肺部感染,经抗感染、化痰、雾化等治疗后好转。结论完全腹腔镜根治性右半结肠切除术中采用Overlap吻合法行回结肠吻合安全可行,切口小、疼痛轻、术后肠道功能恢复快,具有良好的临床应用前景。

胰体尾恶性肿瘤微创手术治疗若干问题

胰腺癌恶性程度高,预后极差,而发病率又不断上升,已成为十大常见的致死性癌种,值得高度重视。外科手术切除是其最主要的治疗手段,RO切除是长期生存的前提条件。腹腔镜和机器人手术视野清,出血少,病人恢复快,相对于传统的开腹手术,具有微创优势,已开始用于胰腺癌,特别是胰体尾癌的外科治疗[1].

胆总管结石发生风险预测模型的研究进展

胆总管结石(CBDS)是消化系统较为常见的良性疾病之一,主要表现为发热、腹痛、黄疸等临床症状,不仅影响患者的生活质量,也给家庭、社会带来了巨大的经济负担。CBDS的风险预测模型有助于高危患者的早发现,早干预,指导临床实践,合理优化医疗资源分配。本文对国内外的CBDS风险预测模型的研究进展作一综述。

Toll样受体4及核因子-κB在脂多糖诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9表达中的作用

目的探讨Toll样受体4(TLR4)和核因子(NF-)κB在脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达中的作用,观察TLR4抑制剂TAK-242对MMP-9表达的影响。方法以终浓度为0、0.1、1、10、100μg/L的LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24h,或以LPS(终浓度10μg/L)刺激细胞0、8、12、16、24h,检测LPS刺激与MMP-9表达的量效和时效性关系。以TAK-242(100μg/L)或PDTC(50mg/L)预处理HBE4-E6/E7细胞后以100μg/L LPS刺激24h,采用RT-PCR检测MMP-9mRNA表达,用Western blotting检测MMP-9蛋白表达,以明胶酶谱法检测MMP-9酶活性,采用凝胶阻滞实验检测活化NF-κB的含量。结果 MMP-9mRNA表达随着LPS刺激剂量的增加而增加(P<0.05),且随着LPS刺激时间延长,MMP-9mRNA表达量亦显著增加(P<0.05)。TAK-242和PDTC均能显著抑制LPS诱导的MMP-9mRNA和蛋白的表达,降低其酶活性(P<0.05)。TAK-242和PDTC均能显著降低LPS诱导的活化NF-κB含量(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路在LPS诱导的气道上皮细胞MMP-9表达中发挥着重要的调控作用;TAK-242可抑制LPS诱导的MMP-9的表达。

腹腔镜胰头十二指肠切除术可以成为常规术式

腹腔镜手术切口小、视野清、解剖更精细、出血少，患者术后疼痛轻、恢复快，相对于传统开放手术，显得微创，已广泛应用于胆囊切除、脾脏切除等，使外科学进入微创外科时代。胰腺解剖位置深，周围血管丰富，切除困难，术后并发症多，腹腔镜胰腺手术相对落后。

miRNA-186靶向Twist-1促胃癌侵袭、迁移的机制研究

目的检测miRNA-186在胃癌中的表达情况,观察miRNA-186表达改变对人胃癌细胞株侵袭、迁移能力的影响并分析可能的分子机制。方法 RT-PCR法检测40例胃癌患者胃癌及配对的正常胃黏膜组织中miRNA-186的表达水平,同时检测miRNA-186在胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中的表达水平。在胃癌细胞中分别转染miRNA-186模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)以上调、下调miRNA-186的表达,应用Transwell试验观察其对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响。应用生物信息学软件预测miRNA-186可能的靶基因,并经双荧光素酶试验及Western blot试验验证靶基因,分析其促转移的分子机制。结果胃癌组织相较于正常胃黏膜组织、胃癌细胞株相较于正常胃黏膜上皮细胞株的miRNA-186表达水平均降低(均P<0.05)。在胃癌细胞中,分别上调、下调miRNA-186的表达水平,能够抑制、促进胃癌细胞的侵袭、迁移能力。miRNA-186与Twist-1之间存在反向调控的关系,Twist-1是miRNA-186的靶基因。同时发现,下调miRNA-186的表达时,Twist-1和N-cadherin表达上调,E-cadherin表达下调,而当上调miRNA-186的表达时,Twist-1和N-cadherin表达下调,E-cadherin表达上调。结论在胃癌组织中miRNA-186的表达水平降低,可能通过靶向调控Twist-1的表达,改变E-cadherin和N-cadherin的表达水平,导致胃癌细胞上皮间质转化,进而促进胃癌细胞的侵袭、迁移。

miR-328-5p靶向SPON2介导FAK/Src信号调控胃癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-328-5p对胃癌细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法将30只小鼠按照随机数字表法分为胃癌组和正常组,每组15只,采用N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)化学诱导法构建小鼠胃癌模型,采用RT-PCR法检测两组小鼠胃组织中miR-328-5p、脊椎蛋白2(SPON2)相对表达量;Western blot法检测两组小鼠胃组织中酪氨酸蛋白激酶(Src)、磷酸化Src(p-Src)、局部黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(p-FAK)蛋白表达水平。将胃癌细胞系SGC7901分为miR-328-5p组、miR-con组、NC组共3组,采用RT-PCR法检测3组细胞miR-328-5p、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)相对表达量;采用Transwell小室实验检测3组细胞迁移和侵袭数。采用荧光素酶报告基因实验检测胃癌细胞miR-328-5p、miR-con+SPON2基因野生型(WT)和突变型(MUT)的荧光素酶相对活力值。结果与正常组比较,胃癌组胃组织中miR-328-5p相对表达量明显降低,SPON2相对表达量明显升高(均P<0.05);与正常组比较,胃癌组胃组织中p-FAK、p-Src蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与NC、miR-con组比较,miR-328-5p组miR-328-5p相对表达量明显升高,同时Vimentin、MMP-9相对表达量均明显降低(均P<0.05);与NC、miR-con组比较,miR-328-5p组细胞迁移数和侵袭数均明显降低(均P<0.05)。与miR-328-5p+SPON2 WT组比较,miR-con+SPON2 WT组、miR-con+SPON2 MUT组、miR-328-5p+SPON2 MUT组荧光素酶相对活力值均明显为高(均P<0.05)。结论miR-328-5p在胃癌组织中呈低表达,过表达miR-328-5p可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力;miR-328-5p直接靶向SPON2基因3'UTR序列,调控其转录表达,并抑制其下游FAK/Src信号活化及其下游Vimentin、MMP-9的表达。

微创时代新生代胰腺外科医师的成长与培训

21世纪,外科进入微创时代。微创胰腺手术具有出血少、疼痛轻、恢复快等微创优势,已经成为发展趋势。新生代胰腺外科医师站在微创外科时代的风口,面对着新的挑战和机遇。笔者将从微创模拟培训、临床实践培训及职业认知三方面简述新生代胰腺外科医师的成长过程和培训要点。

两种钉仓对腹腔镜远端胰腺切除术后胰瘘影响的随机对照研究

腹腔镜远端胰腺切除术因具有出血少、住院时间短等优点逐渐成为胰体尾良性肿瘤的标准术式[1]。但术后胰瘘仍是胰腺手术的主要并发症,并且其与术后严重并发症(出血、腹腔感染等)密切相关。很多研究表明,术后胰瘘与多种因素有关,如胰腺质地、胰腺厚度等。其中,胰腺残端处理方法被认为是影响胰瘘的关键技术[2]。研究表明,直线切割闭合器闭合残端与手工缝合残端是同样安全的,对胰瘘的影响差异并无统计学意义。然而,关于不同钉仓处理胰腺残端对术后胰瘘影响的随机对照研究未见报道[3]。本研究采用单盲、随机、平行对照的方法评估不同钉仓类型对术后胰瘘的影响。

微创时代胰腺肿瘤的诊治策略

胰腺恶性肿瘤诊断困难,预后极差,是当今的“癌中之王”。外科手术切除曾经是最主要的治疗手段,增强CT则是诊断和评估可切除性的依据。随着不断微创外科的发展,几乎所有的手术都可以在腹腔镜或机器人下完成,外科已进入微创时代。胰腺肿瘤的诊断也日新月异,如超声已经从显像发展到内镜超声显像及穿刺活检,并可测定弹力比,预测化疗敏感性。随着对胰腺肿瘤生物学特性的深入了解,胰腺外科医师认识到胰腺肿瘤类型众多,并非所有的肿瘤都是胰腺癌。对不同类型和病期的胰腺肿瘤,可采取不同的治疗方案。除了经典的标准术式,对于良性或低度恶性的胰腺肿瘤,可采取功能保留术式,保证术后生活质量。对局部进展期或晚期病例,积极实施新辅助放化疗、免疫治疗、靶向治疗,可望降期或转化后手术。因而,在微创时代,我们倡导胰腺肿瘤的诊治策略应该基于“以微创为核心”多学科合作(MDT),进行精准评估。可手术者,尽可能微创手术;不适宜手术的,仍进行积极的综合治疗,争取转化后手术。

再谈腹腔镜与机器人胰腺手术的优势和劣势

腹腔镜手术较传统开放手术有明显的微创优势,深得医护人员和病人及其家属的青睐,是近30年外科学发展的主流。笔者团队于1997年开始腹腔镜胆囊手术,并于2001年在国内率先开展腹腔镜胰腺手术,手术量至今近2000例。2016年开展机器人手术初期,笔者曾对两者进行比较^([1])。近年来,机器人设备引进逐渐增多,并国产化,引起医师、病人、医院管理人员越来越多的关注。机器人手术已超过350例,较前有更多的经验和体会。现结合文献再谈两者的优劣。

胰腺癌外科治疗进展

胰腺癌恶性程度高,是当今“癌中之王”。外科治愈性切除是胰腺癌患者长期生存的先决条件。近年来,随着腹腔镜手术的兴起,外科已经进入微创时代;胰腺癌化疗、放疗和免疫治疗也有长足进展,并从术后辅助治疗走向术前新辅助治疗,多学科合作(MDT)成为肿瘤治疗新模式。本文介绍胰腺癌术前新辅助治疗、微创手术及以微创为核心的MDT模式。

ARID2在胰腺癌组织中表达的临床研究

目的探讨ARID2在胰腺癌与癌旁组织中的表达情况及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测60例胰腺腺癌及其癌旁组织中ARID2的表达情况,并结合临床病理资料进行统计分析。结果 ARID2主要表达于细胞核。胰腺癌组织中ARID2阳性表达19例(31.7%),癌旁正常组织中ARID2阳性表达46例(76.7%),差异有统计学意义(P<001)。胰腺癌组织中ARID2的表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴转移及远处转移明显相关(均P<0.05),但与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位无相关性(均P>0.05)。结论 ARID2在胰腺癌中低表达,且其表达程度与胰腺癌进展呈负相关,提示其可能在胰腺癌发生、发展中发挥抑癌作用,是胰腺癌预后的良好指标,可为临床诊治提供一定的参考依据。

再生蛋白4的相关表达在胰腺癌诊断中的意义

目的:探讨检测血清中再生蛋白4(REG4)水平在胰腺癌诊治中的作用。方法:分别采用ELISA法和化学发光免疫法对84例胰腺癌血清REG4和CA19-9进行测定,并与58例胰腺良性疾病和70名正常人进行比较,分析REG4对胰腺癌的临床诊断价值。结果:胰腺癌病人血清REG4水平[(2.34±1.37)μg/L]明显高于胰腺良性疾病[(0.82±0.57)μg/L](P<0.001)和正常人[(0.73±0.43)μg/L](P<0.001);Ⅰ+Ⅱ期胰腺癌REG4升高的病人数明显高于CA19-9升高的病人数(P=0.031)。联合检测血清REG4和CA19-9可将诊断灵敏度提高至90.5%,术后监测表明,胰腺癌切除术后血清REG4下降。血清REG4表达与胰腺癌细胞REG4表达明显相关(χ2=7.54,P<0.001)。结论:血清REG4是一个潜在的胰腺癌血清标志物,对胰腺癌的诊断和随访具有临床价值。

紫杉醇腹腔热灌注化疗对胃癌腹膜转移患者生存期的影响

目的探讨紫杉醇腹腔热灌注化疗(HIPEC)对胃癌腹膜转移患者生存期的影响。方法回顾性分析55例胃癌腹膜转移患者,所有患者均行腹腔镜探查术,术中冰冻病理明确诊断腹膜转移。采用BRTRG-I型高精度体腔热灌注治疗系统,在术后第1天、第3天、第5天使用紫杉醇HIPEC治疗。分析胃癌腹膜转移患者行紫杉醇HIPEC后对生存期的影响,对可能影响生存期的因素进行生存分析。结果胃癌腹膜转移患者使用紫杉醇HIPEC后中位生存时间11个月,1年生存率可以达到49.09%,3年生存率为5.45%。单因素分析显示,肿瘤类型对胃癌腹膜转移患者行HIPEC后生存率有明显影响,差异有统计学意义(χ^(2)=12.97,P<0.05),胃腺癌腹腔转移患者3年生存率较高。性别、年龄、分化程度和肿瘤标志物对胃癌腹膜转移患者行HIPEC后生存率无明显影响,差异均无统计学意义(χ^(2)分别=0.08、0.65、1.45、0.04,P均>0.05)。进一步多元线性回归分析显示,肿瘤类型不能独立影响胃癌腹膜转移患者行紫杉醇HIPEC后的生存率(χ^(2)=3.03,P>0.05)。结论胃癌腹膜转移患者行紫杉醇HIPEC可以延长患者的生存期。胃腺癌腹腔转移患者行紫杉醇HIPEC的预后可能更好。

miR-146b-5p靶向调控NAIF1抑制胃癌细胞凋亡

目的分析miR-146b-5p对胃癌细胞MGC803增殖与凋亡的调控作用及分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、MKN28、MKN45和SGC7901)中miR-146b-5p水平;应用miR-146b-5p抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miRNA-NC)分别转染胃癌细胞MGC803,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;TargetScan数据库分析miR-146b-5p的潜在靶基因,蛋白免疫印迹技术(western blot)检测核诱导凋亡因子1(NAIF1)蛋白表达水平;双荧光素酶实验验证miR-146b-5p和NAIF1之间的关系。结果不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、SGC7901、MKN45和MKN28)miR-146b-5p水平均高于正常人胃黏膜细胞(GES-1)(t分别=26.21、13.08、11.09、11.09、6.41,P均<0.05)。miR-146b-5p inhibitor转染胃癌细胞MGC803后miR-146b-5p水平明显降低(t=9.14,P<0.05)。抑制MGC803胃癌细胞miR-146b-5p水平后,细胞活力明显降低,细胞凋亡比例升高(t分别=3.73、9.55,P均<0.05)。miR-146b-5p mimics转染组WT-NAIF1荧光素酶活性明显低于miRNA-NC组(t=8.35,P<0.05)。Western blot结果表明,上调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显降低(t=5.67,P<0.05),而下调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显升高(t=4.32,P<0.05),在过表达NAIF1的基础上转染miR-146b-5p,细胞活力明显升高,细胞凋亡比例降低(t分别=6.54、4.73,P均<0.05)。结论miR-146b-5p通过靶向抑制NAIF1抑制胃癌细胞凋亡。

创新学科“微创胰胃外科学”建设十年回顾与展望

创新学科“微创胰胃外科学”建设已有十周年,团队以直接造福患者为目的,以临床技术创新为重点,获得了一些成绩和体会,且具有实用性和可复制性。笔者回顾创新学科“微创胰胃外科学”的背景、建设历程、业绩和体会。

Klotho基因与肿瘤关系的研究进展

Klotho基因是Kuro-o等[1]在研究自发性高血压时发现的与人类衰老密切相关的基因。该基因与人类心血管疾病、肾脏疾病及骨质疏松等衰老性疾病密切相关。近年来的研究认为Klotho基因的异常表达可能参与到肿瘤的发生、发展，作为一个抑癌基因参与调控多种肿瘤的生物学过程[2]。本文现就Klotho基因及其与肿瘤的关系进行综述。