ELISA检测梅毒螺旋体抗体的结果不确定度评定

目前国内各医疗卫生机构和检验检疫机构的梅毒螺旋体抗体检查普遍采用免疫学检测并作为检查的诊断依据。免疫学检测指标主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行感染状况的判别，ELISA具有快速、简便、价格便宜的优点。

钩端螺旋体脂多糖诱导J774A.1细胞凋亡及相关信号通路调控作用的研究

目的 了解问号钩端螺旋体脂多糖（L-LPS）体外诱导小鼠单核-巨噬样细胞株（J774A.1）凋亡及Toll样受体（TLR）和相关信号通路调控细胞凋亡的作用.方法 酚水法从问号钩体黄疸出血群赖型赖株中提取L-LPS.流式细胞术测定L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡及FasL中和抗体阻断细胞凋亡的作用.实时荧光定量RT-PCR（qPCR）及流式细胞术检测L-LPS作用前后J774A.1细胞Fas/FasLmRNAs和蛋白表达水平变化.TLR2或TLR4抗体封闭试验、信号通路阻断试验及流式细胞术,检测TLR2、TLR4及p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和胞外信号调节激酶（ERK）通路对L-LPS诱导细胞凋亡的调控作用.结果 100 ng/ml L-LPS作用J774A.1细胞4、12和24 h的凋亡率分别为56.50%、69.28%和24.35%,FasL中和抗体封闭后,细胞凋亡率分别下降至11.21%、21.58%和12.70%（P＜0.05）.L-LPS作用4、12和24 h的J774A.1细胞FasL和Fas mRNAs水平分别为正常细胞的1.34、2.12、2.10及2.45、3.87、3.12倍（P＜0.05）,FasL和Fas蛋白表达率分别从L-LPS作用前的4.82%和15.32%上调至18.61%、60.13%、42.75%（P＜0.05）和76.34%、85.70%和77.92%（P＜0.05）.TLR2抗体封闭后L-LPS诱导J774A.1细胞的凋亡率（11.54%）明显低于未封闭细胞（66.56%,P＜0.05）,但TLR4抗体封闭细胞的凋亡率仍高达55.27%（P＞0.05）.p38MAPK与JNK通路阻断后L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡率（20.54%和47.98%）明显低于未阻断细胞（62.17%,P＜0.05）,ERK通路阻断后细胞凋亡率仍高达61.72%（P＞0.05）.结论 L-LPS经TLR2识别后通过p38MAPK和JNK通路上调J774A.1细胞Fas和FasL表达,从而参与L-LPS诱导细胞凋亡过程.